Inizia utilizzando un kit di estrazione commerciale per estrarre il DNA genomico dalle pupe o dalle zanzare Anopheles maschi adulti. Successivamente, preparare la miscela di reazione PCR. Etichettare il 18 SR-DNA e il satellite AGY 53B eseguendo una reazione PCR.
Per la preparazione della soluzione di ibridazione, aggiungere cinque microlitri di sonda di DNA marcata in una provetta da 1,5 millilitri. Quindi aggiungere cinque microlitri di DNA di sperma di salmone. Precipitare la sonda di DNA aggiungendo due volumi di etanolo al 100% e 0,1 volumi di acetato di sodio a tre molari.
Mantenere a meno 20 gradi Celsius per almeno 2,5 ore. Centrifugare la provetta a 17.000 g per 20 minuti a quattro gradi Celsius. Quindi rimuovere l'etanolo e asciugare il pellet all'aria a temperatura ambiente al buio per 20 minuti.
Successivamente, preparare il tampone di ibridazione in una provetta da 1,5 millilitri. Agitare la soluzione per un minuto e lasciare che il destrano solfato si sciolga a 37 gradi Celsius per 30 minuti. Per ottenere la soluzione di ibridazione, sciogliere la tavolozza del DNA in 20-30 microlitri del tampone di ibridazione.
Agitare la soluzione per un minuto. Esegui una rapida rotazione e conserva i tubi a 37 gradi Celsius al buio.
