शुरू करने के लिए, जीएफपी-एचयूवीईसी के पेलेट को 80 से 100% के संगम स्तर तक ले जाएं और स्टॉक समाधान के प्रति मिलीलीटर एक गुना 10 से सातवें सेल की एकाग्रता प्राप्त करने के लिए बेसल माध्यम की उचित मात्रा में कोशिकाओं को फिर से निलंबित करें। संबंधित विकास कारकों के साथ पूरक बेसल माध्यम की आवश्यक मात्रा वाले 50-मिलीलीटर शंक्वाकार सेंट्रीफ्यूज ट्यूब तैयार करें। प्रति माइक्रोलीटर पांचवीं कोशिकाओं में 1.5 गुना 10 की एकाग्रता प्राप्त करने के लिए स्टॉक समाधान से जीएफपी-एचयूवीईसी को एक से 66.67 तक कम करने के लिए जोड़ें।
फिर स्ट्रोमल मोनोकल्चर युक्त प्लेट से माध्यम को अलग करें और तैयार जीएफपी-एचयूवीईसी निलंबन के प्रति कुएं में 200 माइक्रोलीटर जोड़ें। एक ह्यूमिडिफायर वातावरण में 5% कार्बन डाइऑक्साइड में 37 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें, हर तीन से चार दिनों में माध्यम को बदलें। पांच बार उद्देश्य का उपयोग करके उज्ज्वल-क्षेत्र और प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी द्वारा संस्कृति के विकास की निगरानी करें।
संस्कृतियों के बीच अंतर उज्ज्वल क्षेत्र और प्रतिदीप्ति छवियों से देखा जा सकता है जो केवल जीएफपी-एचयूवीईसी दिखाते हैं। संस्कृतियां बिना किसी विकास कारक के कम विकसित दिखाई दीं, हालांकि, एफजीएफ -2 की उपस्थिति में तेजी से विकास देखा गया। इसके विपरीत, उज्ज्वल-क्षेत्र छवियों ने बीएमपी -2 की उपस्थिति में सबसे घनी संस्कृतियों को दिखाया।
हालांकि, विकास कारक युक्त स्थितियों और सबसे व्यापक और परस्पर जुड़े नेटवर्क दोनों में गठित संवहनी जैसे नेटवर्क एफजीएफ -2 के साथ बनाए गए थे।
