स्ट्रोमल एंडोथेलियल सेल सह-संस्कृति स्थापित करने के बाद, परिमाणीकरण के लिए उपयुक्त सेटिंग्स के साथ फ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोपी का उपयोग करके जीएफपी हुवेक से जीएफपी सिग्नल प्राप्त करें। कंट्रास्ट को और बढ़ाने के लिए उसी दिन प्राप्त सभी छवियों को पूर्व-प्रक्रिया करें। यदि फिजी या छवि जे का उपयोग कर रहे हैं, तो एक ही समय बिंदु पर सभी एन्हांस्ड जीएफपी चैनल छवियों को खोलें और चमक और कंट्रास्ट मेनू खोलें।
एक मध्यवर्ती स्थिति का प्रतिनिधित्व करने वाली छवि का चयन करें और ऑटो का चयन करके कंट्रास्ट को स्वचालित रूप से समायोजित करें। सेट पर क्लिक करें और अन्य सभी खुली छवियों के लिए प्रचार करें। नेत्रहीन रूप से आकलन करें कि स्वचालित रूप से चयनित श्रेणी वर्तमान समय बिंदु की सभी छवियों को फिट करती है या नहीं।
यदि आवश्यक हो, तो मैन्युअल रूप से सभी छवियों के लिए सीमा को रीडजस्ट और पुन: प्रचारित करें और समायोजित छवियों को टीआईएफएफ फ़ाइलों के रूप में सहेजें। इसके बाद, सभी छवियों पर एक मीडियन ब्लर फ़िल्टर लागू करें। बिनिंग द्वारा आकार कम करें और उन्हें परिमाणीकरण के लिए एक फ़ोल्डर में ग्रे स्केल आरजीबी रंग टीआईएफएफ फ़ाइलों के रूप में सहेजें।
यह मैक्रोज़ का उपयोग करके मैन्युअल रूप से या बैच मोड में किया जा सकता है। छवि जे के लिए एंजियोजेनेसिस विश्लेषक में बैच प्रक्रिया मोड का उपयोग करके सभी बनाई गई छवियों का विश्लेषण करें, फिर मान्यता प्राप्त संरचनाओं और मूल छवियों के ओवरले की जांच करके परिमाणीकरण परिणामों को मान्य करें। पूर्व-प्रसंस्करण मापदंडों को समायोजित करें, मूल छवियों का पुन: विश्लेषण करें, या समस्याग्रस्त क्षेत्रों को बाहर करें यदि एल्गोरिदम मूल छवि में दिखाई देने वाली कुछ या कोई कोशिकाओं के साथ कृत्रिम संरचनाओं का पता लगाता है।
अंत में विश्लेषण किए गए क्षेत्र के अनुपात से प्रत्येक नमूने के मूल्यों को एक वर्ग मिलीमीटर के अनुपात से गुणा करके प्राप्त मूल्यों को एक वर्ग मिलीमीटर के क्षेत्र में सामान्य करें। जीएफपी हुवेक नेटवर्क के परिमाणित मापदंडों से पता चला है कि एफजीएफ -2 की उपस्थिति में कुल नेटवर्क की लंबाई सबसे अधिक थी और विकास कारकों की अनुपस्थिति में सबसे कम थी। नेटवर्क में ब्रांचिंग पॉइंट को इंगित करने वाले जंक्शनों की संख्या ने कुल लंबाई के समान प्रवृत्ति का पालन किया।
इसके विपरीत, दोनों विकास कारकों में काफी कम अलग-थलग खंड थे जो बिना किसी विकास कारक के स्थिति की तुलना में उच्च इंटरकनेक्टिविटी का संकेत देते थे।
