Name: Surgical Preparation and Heterotopic Transplantation of the Neonatal Donor Heart in the Recipient Rat (Video) | JoVE
Uploaded: 2023-07-21T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Surgical Preparation and Heterotopic Transplantation of the Neonatal Donor Heart in the Recipient Rat at JoVE.com

surgical preparation and heterotopic transplantation of the neonatal donor heart in the recipient rat

A Neonatal Heterotopic Rat Heart Transplantation Model for the Study of Endothelial-to-Mesenchymal Transition

Watch this Scientific Journal Video about Surgical Preparation and Heterotopic Transplantation of the Neonatal Donor Heart in the Recipient Rat at JoVE.com

Surgical Preparation and Heterotopic Transplantation of the Neonatal Donor Heart in the Recipient Rat (Video) | JoVE 

Kirurgisk förberedelse och heterotopisk transplantation av det neonatala donatorhjärtat hos mottagarråttan

Börja skörda det neonatala donatorhjärtat genom att bedöva och sterilisera råttan och göra ett horisontellt snitt vid xiphoiden med en skalpell med 15 blad under ett 12,5x kirurgiskt mikroskop. Använd sedan en sax för att skapa vertikala snitt i sidled upp till armhålorna, på båda sidor. Ta bort den främre bröstkorgsväggen med ett annat horisontellt snitt under halsen.Dissekera nedre hålvenen, eller IVC, höger och vänster övre hålven, eller SVC, och lungkärlen med sax. Omringa och ligera slöa kärl med en 7-0 silkessutur. Tryck ner membranet något med en pincett och administrera tre milliliter iskall Krebs-Henseleit-lösning med hög kaliumhalt till höger förmak genom att punktera IVC med en 30-gauge nål.Klipp IVC-, SVC- och lungkärlen med en sax. Säkerställ rätt längd genom att transektera lungartärerna så långt som möjligt och aortan, distalt om brachiocephaliska stammen, med hjälp av en skalpell med nummer 11. Spola hjärtat med den iskalla kardioplegiska lösningen med en tre milliliters spruta.Placera den sövda råttan på en sned hylla. Fäst framtänderna med ett snöre och placera huvudet mot kirurgen. Placera ljuset på utsidan av halsen på stämbanden.Ta tag i tungan med två fingrar och tryck den försiktigt uppåt och åt vänster för optimal intubationssynlighet. Använd nu en 18-gauge, två-tums kanyl för en 100 till 150 grams råtta och fäst intratrakealtuben med tejp. Anslut intubationskanylen till smådjursventilatorn och justera inställningarna baserat på djurets storlek, enligt tillverkarens instruktioner.Efter att ha intuberat råttan, utför en laparotomi i mitten av linjen med en skalpell med 15 blad för att göra hudsnittet. Öppna den främre bukväggen med en sax och mobilisera tarmarna mot den högra övre kvadranten. Exponera sedan den retroperitoneala bukaortan och IVC med hjälp av bomullsspetsapplikatorer.Täck tarmarna med varm, saltindränkt gasväv och använd upprullningsdon för att bibehålla optimal exponering av IVC och bukaorta. Utför nu trubbig dissektion av infrarenal IVC och bukaorta upp till förgreningen. Ligate tråkiga infrarenala förgrenade artärer och vener med en 10-0 nylonsutur.Transportera den skördade donatorns hjärta i en steril operationsbassäng som innehåller Krebs-Heneseleit-buffert till operationsområdet. Se till att skölja donatorhjärtat intermittent med iskall kardioplegisk lösning. Separera sedan lungstammen och den nedåtgående aortan med hjälp av en mikrosax och skölj donatorhjärtat med iskall kardioplegisk lösning.Applicera sedan fyra atraumatiska vaskulära klämmor på de distala och proximala segmenten av infrarenal aorta och IVC. Utför en aortotomi med en mikrosax för att göra två små horisontella snitt. Placera sedan donatorhjärtat på vänster sida av aortan.Fäst mottagarens infrarenala aorta och donatorns uppåtgående aorta och lägg den åt sidan vid aortotomins positioner klockan 12 och sex med suturer. Fortsätt med den tredje och fjärde suturen vid klockan tre och nio, vänd försiktigt hjärtat till vänster sida av aortan efter den tredje suturen. Avsluta den arteriella anastomosen genom att lägga till en till två suturer till varje mellanrum.Vrid nu råttan moturs så att huvudet är vänt mot kirurgens vänstra hand. Flytta donatorns hjärta till vänster sida av bukaortan för en optimal bild av IVC. Utför en venotomi på IVC, något proximalt till aortaanastomosen.Använd ett 11-blad för punktering och mikrosax för att justera storleken efter donatorns lungstamsdiameter, spola intrakovallumen med hepariniserad koksaltlösning. Utför sedan den venösa anastomosen mellan mottagarens IVC och donatorns lungstam genom att placera avbrutna 11-0 nylonsuturer på kärlets bakvägg, med början vid positionerna klockan 12 och sex. Placera en kontinuerlig 11-0 nylonsutur på den främre väggen, placera absorberbara gelatinsvampremsor över anastomoserna och ta bort de mikrovaskulära klämmorna, börja med de distala.Se till att kranskärren fylls och att donatorns hjärta börjar slå kort efter att de proximala klämmorna släppts. Applicera ett lätt tryck med en bomullsapplikator på svamparna för att uppnå optimal hemostas. Placera försiktigt tillbaka tarmarna i buken, var försiktig så att du inte förvränger den arteriella och venösa anastomosen.Stäng bukväggen och låt djuret återhämta sig. En horisontell del av donatortransplantatet som avlägsnats på mitten av ventrikelnivån i höger och vänster kammare visas. Histologisk analys indikerade att endokardiell fibroelastosvävnad hade stora mängder organiserade kollagen- och elastinfibrer.Endokardiell fibroelastosvävnad, dubbelfärgad för VE-Cadherin och alfa-SMA. CD-31, fosfo-SMAD2 och SMAD3, CD-31 och snigel indikerade endotel till mesenkymal övergång.

Research

JoVE Journal

Medicine

Surgical Preparation and Heterotopic Transplantation of the Neonatal Donor Heart in the Recipient Rat

In Vivo Heart Transplantation to Study Endothelial-to-Mesenchymal Transition

A Neonatal Heterotopic Rat Heart Transplantation Model for the Study of Endothelial-to-Mesenchymal Transition (Video) | JoVE 

Endocardial fibroelastosis (EFE), defined by subendocardial tissue accumulation, has major impacts on the development of the left ventricle (LV) and ...