मोनोसाइट्स से विभेदित छठे मानव मोनोसाइट व्युत्पन्न डेंड्राइटिक कोशिकाओं को लगभग 10 गुना 10 एकत्र करें। 24 वेल प्लेट के 10 कुओं से, जिनमें प्रति कुएं 1.3 गुना 10 से छठी कोशिकाएं होती हैं, उन्हें एक नए बाँझ 15 मिलीलीटर शंक्वाकार ट्यूब में स्थानांतरित करें। कमरे के तापमान पर पांच से सात मिनट के लिए 300 G पर कोशिकाओं को सेंट्रीफ्यूज करने के बाद, सामान्य ब्रेक का उपयोग करके, मृत कोशिकाओं और मलबे को हटाने के लिए सतह पर तैरनेवाला को छोड़ दें।
ट्यूब में 11.1 मिलीमोलर ग्लूकोज युक्त आरपीएमआई 1640 माध्यम के 10 मिलीलीटर जोड़ें। 300 G पर चार मिनट के लिए कमरे के तापमान पर सेंट्रीफ्यूजिंग के बाद, सामान्य ब्रेक का उपयोग करके, सुपरनैटेंट को फिर से छोड़ दें। सेल गोली में आरपीएमआई 1640 माध्यम के दो मिलीलीटर जोड़ें और सेल निलंबन के एक मिलीलीटर को नंबर एक और नंबर दो के रूप में लेबल किए गए दो नए बाँझ माइक्रो ट्यूबों में विभाजित करें।
माइक्रो ट्यूब एक के लिए, क्लोस्ट्रीडियम पेरिंजन्स से सियालिडेज़ की 500 मिलीयूनिट जोड़ें। 37 डिग्री सेल्सियस पर 60 मिनट के लिए दोनों ट्यूबों को इनक्यूबेट करें। इनक्यूबेशन के बाद, दोनों सूक्ष्म ट्यूबों से कोशिकाओं को नंबर एक और नंबर दो के रूप में लेबल किए गए संबंधित नए 15 मिलीलीटर शंक्वाकार ट्यूबों में स्थानांतरित करें।
फिर प्रत्येक शंक्वाकार ट्यूब में 10% एफबीएस युक्त पूर्ण आरपीएमआई 1640 माध्यम के लगभग चार मिलीलीटर जोड़ें। सामान्य ब्रेक का उपयोग करके 300 ग्राम पर चार मिनट के लिए कमरे के तापमान पर ट्यूबों को सेंट्रीफ्यूज करें और गोली में पूर्ण आरपीएमआई 1640 माध्यम के पांच मिलीलीटर जोड़ें। प्रति अच्छी तरह से एक मिलीलीटर कोशिकाओं को प्लेट करें।
मानव मोनोसाइट व्युत्पन्न डेंड्राइटिक कोशिकाओं की सतह के नीचे सियालिक एसिड सामग्री को कम करने के लिए सैलिडेज़ उपचार की प्रभावशीलता का मूल्यांकन फ्लो साइटोमेट्री और कॉन्फोकल माइक्रोस्कोपी द्वारा किया गया था। सैलिडेज़ उपचार ने मूंगफली एग्लूटीनिन लेक्टिन धुंधला होने के दौरान मैकिया अमुरेन्सिस लेक्टिन और संबूकस निग्रा लेक्टिन बाइंडिंग को काफी कम कर दिया। सैलिडेज़ उपचार के बाद संबूकस निग्रा लेक्टिन धुंधला होने में कमी से कोशिका की सतह पर संबूकस निग्रा लेक्टिन धुंधला पन काफी कम हो गया।