Uploaded: 2023-06-16T14:00:00
Duration: 4 min 46 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Procedure for Swine Burn Wounding, Burn Wound Imaging, Wound Inoculation, and Biopsy Collection at JoVE.com

procedure for swine burn wounding, burn wound imaging, wound inoculation, and biopsy collection

Swine Model of Biofilm Infection and Invisible Wounds

Watch this Scientific Journal Video about Procedure for Swine Burn Wounding, Burn Wound Imaging, Wound Inoculation, and Biopsy Collection at JoVE.com

إجراء لجرح حرق الخنازير ، وتصوير جروح الحروق ، وتلقيح الجروح ، وجمع الخزعة

لبدء الإجراء داخل غرفة الجراحة المرتبة بشكل صحيح ، ضع الخنزير المخدر في وضع الاستلقاء القصي ، وتأكد من تأمين جميع الخطوط والأنابيب المتصلة. قم بإزالة أي شعر متبقي من المنطقة المحلوقة المخصصة للجرح باستخدام كريم إزالة الشعر. بعد تعقيم مواقع الجرح ، حدد المنطقة باستخدام قالب حرق معقم وعلامة جلدية جراحية.اضبط الموقد عن طريق ضبط نقطة الضبط على وحدة التحكم على 150 درجة مئوية. نقطة الضبط المنخفضة إلى 145 درجة مئوية ونقطة الضبط العالية إلى 155 درجة مئوية. باستخدام كتل ساخنة من الفولاذ المقاوم للصدأ متصلة بجهاز الحرق ، قم بإنشاء جرح حرق كامل السماكة عن طريق وضع الكتل على الجلد لمدة 60 ثانية.التقط صورة رقمية للجزء الخلفي بالكامل من الخنزير ، بما في ذلك لافتة بها نقطة زمنية وتاريخ تحديد هوية الخنزير. ثم التقط صورا لكل جرح بشكل منفصل مع مسطرة ولافتة تعرض معرف الخنزير ومعرف الجرح والنقطة الزمنية. لتقييم التروية الوعائية الدقيقة للجرح في الوقت الفعلي باستخدام تصوير البقع بالليزر أو LSI، قم بتصوير جميع الجروح في تسجيل واحد باستخدام جهاز تصوير نضح الدم LASCA.لقياس فقدان الماء عبر البشرة أو TEWL ، ضع غطاء مسبار نظيف فوق طرف مسبار TEWL ، والذي سيكون ملامسا لأنسجة الجرح. قم بقياس كل جرح خمس مرات ، أولا في الوسط ، متبوعا بكل زاوية. ثم قم بتصدير جميع القراءات إلى جدول بيانات.قم بإجراء الموجات فوق الصوتية التوافقية أو رسم خرائط HUSD عن طريق مسح الجرح باستخدام مسبار الموجات فوق الصوتية من خط الوسط أو العمود الفقري ، بدءا من الجلد الطبيعي والتحرك نحو الجانب الجانبي للخنزير فوق الجروح حتى يتم الوصول إلى الجلد الطبيعي مرة أخرى. اتبع نمط المسح لكل جرح في كل من الوضع B ووضع التصوير الإلستوجرافي للأنسجة. قم بتغيير التعليق التوضيحي بعد تصوير كل جرح في كل من الوضع B ووضع elasto ، وهو تسجيلان لكل جرح.بمجرد اكتمال التصوير ، قم بتغطية جروح الحروق بشكل فردي بضمادات غشاء شفاف أو ضمادة الاختبار. ثم ضع ضمادة شفافة أكبر على منطقة الجرح بأكملها. ضع طبقة ثانية من الشاش الملفوف بشكل فضفاض حول جذع الخنزير بالكامل لامتصاص أي سائل ينضح من الجروح.غطي الشاش بشكل فضفاض بطبقة من الضمادة المرنة المرنة. قم بتغطية الضمادة المرنة بطبقة أخيرة من شريط مطاطي مقاس أربع بوصات. بعد التوقف عن استخدام غاز التخدير عند الانتهاء من الضمادات ، اترك الخنزير يبقى على الأكسجين لمدة خمس دقائق على الأقل.لتلقيح جروح الحروق في اليوم الثالث بعد الحرق ، قم بتفريق اللقاح عبر سطح الجروح المكشوفة باستخدام ماصة ، وانشرها بالتساوي باستخدام مفرشة يمكن التخلص منها. لجمع خزعات الأنسجة لتحليلها بعد التصوير ، تسلل إلى المنطقة المحيطة بالجرح بنسبة 0.5٪ بوبيفاكايين. باستخدام مشرط يمكن التخلص منه بشفرة مقاس 10 ، قم بقص شريط بعرض 3-4 ملم من حافة الجرح إلى الأخرى ، مع الحفاظ على هوامش صغيرة من الجلد الطبيعي على كلا الجانبين.قطع خزعة لكمة 6 ملم من الجرح إما من سرير الجرح أو حافة الجرح. تحقيق الارقاء بعد جمع العينات عن طريق الضغط بلطف على الجرح بشاش معقم. قم بتغطية الجرح بضمادة غير ملتصقة وضمادة كما هو موضح سابقا.أظهر تحليل عينة الخزعة بواسطة تلطيخ الهيماتوكسيلين والإيوسين تشويها ونخرا لجميع طبقات الجلد النسيجية. تم التحقق من صحة الأغشية الحيوية الراسخة في اليوم السابع بعد التلقيح بواسطة وحدة تشكيل المستعمرة. مسح التصوير المجهري الإلكتروني ، وتلطيخ المناعي.أظهرت جروح الحروق غشاء حيوي سميك على سطح الجرح بحلول اليوم السابع بعد التلقيح ، مما يؤكد العدوى وإنشاء الأغشية الحيوية. بدأت منطقة الجرح في الانكماش بحلول اليوم 14 ، ولكن لوحظ التئام غير مكتمل إلى حوالي 25٪ من حجم الجرح الأصلي بحلول اليوم 56 مما يشير إلى مزمنة الجرح. تم تأكيد مزمنة الجروح وضعف التئام الجروح بشكل أكبر من خلال TEWL الذي أظهر فقدانا عاليا للماء عبر البشرة في جميع النقاط الزمنية المقاسة.تم تأكيد ذلك أيضا من خلال قمع البروتينات الموصلية الضيقة ، ZO-1 و 2 ، وضعف استعادة وظيفة حاجز الجلد.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Procedure for Swine Burn Wounding, Burn Wound Imaging, Wound Inoculation, and Biopsy Collection

Developing a Long-Term Swine Model for Biofilm-Infected Burn Wound Studies

Studying Host-Microbe Interactions in Wound Biofilm Formation (Video) | JoVE

نموذج الخنازير لعدوى الأغشية الحيوية والجروح غير المرئية

Biofilm infection is a major contributor to wound chronicity. The establishment of clinically relevant experimental wound biofilm infection requires the ...