Uploaded: 2023-06-16T14:00:00
Duration: 4 min 46 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Procedure for Swine Burn Wounding, Burn Wound Imaging, Wound Inoculation, and Biopsy Collection at JoVE.com

procedure for swine burn wounding, burn wound imaging, wound inoculation, and biopsy collection

Swine Model of Biofilm Infection and Invisible Wounds

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돼지 화상 상처, 화상 상처 영상, 상처 접종 및 생검 수집 절차

적절하게 배치된 수술실 내에서 절차를 시작하려면 마취된 돼지를 흉골 누운 위치에 놓고 연결된 모든 라인과 튜브가 고정되었는지 확인합니다. 제모 크림을 사용하여 상처를 입도록 지정된 면도 부위의 잔여 털을 제거합니다. 상처 부위를 소독한 후 멸균 화상 템플릿과 수술용 피부 마커를 사용하여 해당 부위를 표시합니다.제어 장치의 설정값을 섭씨 150도로 조정하여 버너를 설정합니다. 낮은 설정점은 섭씨 145도이고 높은 설정점은 섭씨 155도입니다. 화상 장치에 연결된 가열된 스테인리스 스틸 블록을 사용하여 블록을 피부에 60초 동안 올려 전체 두께의 화상 상처를 만듭니다.돼지의 식별 시간과 날짜가 적힌 플래카드를 포함하여 돼지 등 전체의 디지털 사진을 찍습니다. 그런 다음 돼지 ID, 상처 ID 및 시점을 표시하는 자 및 플래카드와 함께 각 상처에 대한 이미지를 별도로 촬영합니다. 레이저 스페클 이미징 또는 LSI를 사용하여 상처 미세혈관 관류를 실시간으로 평가하려면 LASCA 혈액 관류 이미징기를 사용하여 단일 기록으로 모든 상처를 이미지화합니다.트랜스 표피 수분 손실 또는 TEWL을 측정하려면 상처 조직과 접촉할 TEWL 프로브 팁 위에 깨끗한 프로브 덮개를 놓습니다. 각 상처를 먼저 중앙에서 다섯 번 측정한 다음 각 모서리를 측정합니다. 그런 다음 모든 판독값을 스프레드시트로 내보냅니다.정중선 또는 척추에서 초음파 프로브로 상처를 스캔하여 고조파 초음파 또는 HUSD 매핑을 수행하며, 정상 피부에서 시작하여 정상 피부에 다시 도달할 때까지 상처 위의 돼지 측면으로 이동합니다. B 모드와 조직 탄성 조영술 모드 모두에서 각 상처에 대한 스캔 패턴을 따릅니다. 각 상처가 B 모드와 엘라스토 모드(상처당 두 번의 기록)로 이미지화된 후 주석을 변경합니다.모든 영상 촬영이 완료되면 화상 부위를 투명 필름 드레싱이나 테스트 드레싱으로 개별적으로 덮습니다. 그런 다음 상처 부위 전체에 더 큰 투명 필름 드레싱을 바릅니다. 돼지의 몸통 전체에 롤 거즈를 두 겹으로 느슨하게 발라 상처에서 흘러나오는 액체를 흡수합니다.유연한 탄성 붕대 층으로 거즈를 느슨하게 덮습니다. 4인치 탄성 테이프의 마지막 층으로 탄성 붕대를 덮습니다. 붕대 감기가 끝나면 마취 가스를 중단한 후 돼지가 최소 5분 동안 산소를 공급받도록 합니다.화상 후 3일째 되는 날에 화상 상처를 접종하려면 피펫을 사용하여 노출된 상처 표면에 접종물을 분산시키고 일회용 스프레더를 사용하여 골고루 펴 바릅니다. 이미징 후 분석을 위해 조직 생검을 수집하려면 0.5% 부피바카인으로 상처 주변 부위에 침투합니다. 10 사이즈의 칼날이 달린 일회용 메스를 사용하여 상처의 한쪽 가장자리에서 다른 쪽 가장자리까지 3-4mm 너비의 스트립을 자르고 양쪽에 정상 피부의 작은 여백을 유지합니다.상처 부위 또는 상처 가장자리에서 6mm 펀치 생검을 자릅니다. 검체를 채취한 후 멸균 거즈로 상처를 부드럽게 눌러 지혈을 합니다. 접착되지 않는 드레싱으로 상처를 덮고 앞에서 설명한 대로 붕대를 감습니다.헤마톡실린 및 에오신 염색에 의한 생검 샘플 분석은 모든 조직학적 피부층의 왜곡 및 괴사를 보여주었습니다. 확립된 생물막은 콜로니 형성 단위에 의해 접종 후 7일째에 추가로 검증되었습니다. 전자 현미경 이미징 및 면역 형광 염색을 스캔합니다.화상 상처는 접종 후 7일째에 상처 표면에 두꺼운 바이오제닉 멤브레인이 나타나 감염 및 바이오필름 형성을 확인했다. 14일째부터 상처 부위가 줄어들기 시작했으나, 56일째에는 원래 상처 크기의 약 25%까지 불완전하게 치유되는 것이 관찰되어 상처 만성을 나타냈다. 상처 만성 및 손상된 상처 치유는 TEWL에 의해 측정된 모든 시점에서 높은 트랜스 표피 수분 손실을 보여주면서 추가로 확인되었습니다.이는 또한 단단한 접합 단백질인 ZO-1과 2의 억제와 피부 장벽 기능의 손상된 회복에 의해 확인되었습니다.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Procedure for Swine Burn Wounding, Burn Wound Imaging, Wound Inoculation, and Biopsy Collection

Developing a Long-Term Swine Model for Biofilm-Infected Burn Wound Studies

Studying Host-Microbe Interactions in Wound Biofilm Formation (Video) | JoVE

생물막 감염 및 보이지 않는 상처의 돼지 모델

Biofilm infection is a major contributor to wound chronicity. The establishment of clinically relevant experimental wound biofilm infection requires the ...

연구

면역학 및 감염병학