Uploaded: 2023-06-16T14:00:00
Duration: 4 min 46 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Procedure for Swine Burn Wounding, Burn Wound Imaging, Wound Inoculation, and Biopsy Collection at JoVE.com

procedure for swine burn wounding, burn wound imaging, wound inoculation, and biopsy collection

Swine Model of Biofilm Infection and Invisible Wounds

Watch this Scientific Journal Video about Procedure for Swine Burn Wounding, Burn Wound Imaging, Wound Inoculation, and Biopsy Collection at JoVE.com

Domuz yanığı yarası, yanık yarası görüntüleme, yara aşılama ve biyopsi toplama prosedürü

Uygun şekilde düzenlenmiş ameliyathanede prosedüre başlamak için, anestezi uygulanmış domuzu sternal yaslanma pozisyonuna getirin ve bağlı tüm hatların ve tüplerin sabitlendiğinden emin olun. Tüy dökücü krem kullanarak yaralama için belirlenmiş traşlı alandaki kalan tüyleri alın. Yara bölgelerini sterilize ettikten sonra, steril bir yanık şablonu ve cerrahi bir cilt işaretleyici kullanarak alanı işaretleyin.Kontrol ünitesindeki ayar noktasını 150 santigrat dereceye ayarlayarak brülörü ayarlayın. Düşük ayar noktası 145 santigrat derece ve yüksek ayar noktası 155 santigrat derecedir. Yanık cihazına bağlı ısıtılmış paslanmaz çelik bloklar kullanarak, blokları 60 saniye boyunca cilt üzerine yerleştirerek tam kalınlıkta bir yanık yarası oluşturun.Domuzun kimliğini, saatini, tarihini içeren bir afiş de dahil olmak üzere domuzun tüm sırtının dijital bir fotoğrafını çekin. Ardından, bir cetvel ve domuz kimliğini, yara kimliğini ve zaman noktasını gösteren bir afiş ile birlikte her yara için ayrı ayrı görüntüler çekin. Lazer benek görüntüleme veya LSI kullanarak yara mikrovasküler perfüzyonunu gerçek zamanlı olarak değerlendirmek için, bir LASCA kan perfüzyon görüntüleyicisi kullanarak tüm yaraları tek bir kayıtta görüntüleyin.Trans epidermal su kaybını veya TEWL'yi ölçmek için, yara dokusu ile temas edecek olan TEWL prob ucunun üzerine temiz bir prob kapağı yerleştirin. Her yarayı önce merkezde, ardından her köşede olmak üzere beş kez ölçün. Ardından tüm okumaları bir elektronik tabloya aktarın.Yarayı orta hattan veya vertebral kolondan bir ultrason probu ile tarayara, normal deriden başlayarak ve normal cilde tekrar ulaşılana kadar yaraların üzerinden domuzun yan tarafına doğru ilerleyerek harmonik ultrason veya HUSD haritalaması yapın. Hem B modunda hem de doku elastografi modunda her yara için tarama modelini takip edin. Her yara hem B modunda hem de yara başına iki kayıt olan elasto modunda görüntülendikten sonra ek açıklamayı değiştirin.Tüm görüntüleme tamamlandıktan sonra, yanık yaralarını şeffaf film pansumanları veya test pansumanı ile ayrı ayrı örtün. Daha sonra tüm yara bölgesine daha büyük bir şeffaf film pansuman yerleştirin. Yaralardan sızan sıvıyı emmek için domuzun tüm gövdesinin etrafına gevşek bir şekilde ikinci bir rulo gazlı bez tabakası uygulayın.Gazlı bezi esnek elastik bir bandaj tabakası ile gevşek bir şekilde örtün. Elastik bandajı dört inçlik elastik banttan oluşan son bir katmanla örtün. Bandajlamanın tamamlanmasının ardından anestezik gazı kestikten sonra, domuzun en az beş dakika oksijende kalmasına izin verin.Yanıktan sonraki üçüncü günde yanık yaralarını aşılamak için, aşıyı bir pipet kullanarak açıkta kalan yaraların yüzeyine dağıtın ve tek kullanımlık bir yayıcı kullanarak eşit şekilde yayın. Görüntülemeyi takiben analiz için doku biyopsilerini toplamak için, yaranın etrafındaki alana% 0.5 bupivakain ile sızın. 10 numara bıçaklı tek kullanımlık bir neşter kullanarak, yaranın bir kenarından diğerine 3-4 milimetre genişliğinde bir şerit kesin, her iki tarafta da normal cildin küçük kenarlarını koruyun.Yara yatağından veya yara kenarından yaradan 6 milimetrelik bir punch biyopsisi kesin. Numuneler toplandıktan sonra yaraya steril bir gazlı bezle hafifçe bastırarak hemostaz elde edin. Yarayı yapışmayan bir pansumanla örtün ve daha önce gösterildiği gibi bandajlayın.Biyopsi örneğinin hematoksilen ve Eozin boyaması ile analizi, tüm histolojik cilt katmanlarında bozulma ve nekroz gösterdi. Oluşturulan biyofilm, koloni oluşturma ünitesi tarafından aşılamadan sonraki yedinci günde daha da doğrulandı. Elektron mikroskobu görüntülemesini ve immünofloresan boyamayı tarayın.Yanık yaraları, aşılamadan sonraki yedinci günde yara yüzeyinde kalın bir biyojenik zar gösterdi ve bu da enfeksiyonu ve biyofilm oluşumunu doğruladı. Yara alanı 14. günde küçülmeye başladı, ancak 56. günde orijinal yara boyutunun yaklaşık% 25'ine kadar eksik iyileşme gözlendi ve bu da yara kronikliğini gösterdi. Yara kronikliği ve bozulmuş yara iyileşmesi, ölçülen tüm zaman noktalarında yüksek trans epidermal su kaybı gösteren TEWL ile daha da doğrulandı.Bu aynı zamanda sıkı bağlantı proteinleri olan ZO-1 ve 2'nin baskılanması ve cilt bariyeri fonksiyonunun bozulmuş restorasyonu ile de doğrulandı.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Procedure for Swine Burn Wounding, Burn Wound Imaging, Wound Inoculation, and Biopsy Collection

Developing a Long-Term Swine Model for Biofilm-Infected Burn Wound Studies

Studying Host-Microbe Interactions in Wound Biofilm Formation (Video) | JoVE

Biyofilm Enfeksiyonu ve Görünmez Yaraların Domuz Modeli

Biofilm infection is a major contributor to wound chronicity. The establishment of clinically relevant experimental wound biofilm infection requires the ...