On-Plant Method to Deliver Dye or Biomolecules Using VACNFs in a Rigid Substrate

Pour commencer, retirez la résine photosensible des VACNF en les lavant avec de l’acétone à 100 % pendant cinq minutes, suivi d’un lavage de cinq minutes avec de l’alcool isopropylique à 100 %, puis de l’eau distillée deux fois pendant cinq minutes. Ensuite, placez le tissu végétal à empaler sur une surface dure pour le soutenir. Placez une gouttelette d’un microlitre de colorant sur la surface du tissu végétal.

Placez une puce VACNF avec un substrat rigide sur le dessus de la gouttelette, avec les fibres orientées de manière à ce qu’elles entrent en contact avec la gouttelette. À l’aide du côté plat d’une pince à épiler, tapotez la puce, marquez la zone de la plante avec laquelle la puce est entrée en contact à l’aide d’un marqueur à pointe souple. Retirez les puces VACNF après la livraison.

Répétez ces étapes pour les contrôles, tels que le placement d’un colorant sur le côté sans fibres d’un film, l’utilisation du film sans colorant et l’utilisation du côté sans fibres d’un film. Conservez les plantes intactes ou les organes végétaux excisés dans des chambres humides dans des conditions de journées longues. Pour les organes excisés, utilisez une boîte de Pétri en plastique avec du papier absorbant humide.

En utilisant cette méthode, le colorant à la fluorescéine a été administré aux feuilles d’Arabidopsis. Des images prises à différents moments ont montré que le colorant à la fluorescéine a été observé immédiatement après l’accouchement. De même, l’administration d’un plasmide contenant une protéine fluorescente jaune a été obtenue dans les feuilles d’Arabidopsis.