Siyah Hint mürekkebi ve gliserol sistemi tamponunun 1 ila 20 seyreltilmesini hazırlayarak başlayın, ardından oda sıcaklığında 15.000 g'da 10 dakika santrifüjleyin. 384 oyuklu plakanın ilk bölümüne 40 mikrolitre mürekkep çözeltisi ve gliserol sistemi tamponu ekleyin. Şimdi tüm seyreltme bir kuyucuğuna 25 mikrolitre gliserol sistemi tamponu ve tüm seyreltme iki, üç ve dört kuyucuğuna 40 mikrolitre ekleyin.
Numuneleri bire bir oranında seyreltmek için bir kuyucuğun seyreltilmesine 25 mikrolitre ekstrakte edilmiş glikan numunesi ekleyin. Seyreltme birinden 10 mikrolitreyi seyreltme iki kuyucuğuna aktararak her numuneyi dört kez seri olarak seyreltin, ardından bir pipet kullanarak hafifçe karıştırın. Numunenin 10 mikrolitresini seyreltme ikiden seyreltme üç kuyucuğuna aktararak işlemi tekrarlayın.
Seyreltme işlemini dört kuyu tekrarladıktan sonra, tüm kuyucukların nihai hacmi 40 mikrolitre olacak şekilde 10 mikrolitre atın. Son plakaya 40 mikrolitre mürekkep çözeltisi ve gliserol sistemi tamponu ekleyin. Ardından, oda sıcaklığında 3000 g'da 10 dakika santrifüjlemeden önce plakayı yapışkan bir kapakla örtün.
Numuneleri nitroselüloz membran üzerine yazdırmak için, baskı kafasını ve kılcal damarları gliserol sistem tamponu ile birden çok kez temizleyerek başlayın. Yalnızca tampon ile bir plaka yükleyerek bir test baskısı çalıştırması başlatın. Enstrümanı doğrudan temiz arabellek haznesinden yazdıracak şekilde yapılandırmak için Dosya'ya ve ardından Yeni'ye tıklayın ve ardından Yazdırma Çalıştır'ı seçin.
Mikroplaka tipini seçin ve slayt ayarlarını buna göre değiştirin. Ardından, spot özellik ayarlarını düzenlemeden önce mini dizi ayarlarını değiştirin. Plakayı görüntülemek için Genel Bakış sekmesine tıklayın.
Son olarak, Seçenekler sekmesi altında, Arabelleği kullan'ı seçin ve dosyayı kaydetmek için dosya konumlarını ayırmadan önce yazdırma süresini hesaplayın. Konumu kaydettikten sonra, çalıştırmaya devam etmek için Yazdırmayı Başlat'a basın. Ekstrakte edilen glikan örneklerini yazdırırken, sistemi daha önce olduğu gibi programlayın.
Options (Seçenekler) sekmesi altında, Using source microplates (Kaynak mikroplakaları kullanma) seçeneğine tıklayın. Son olarak, aşağı akış analizi için yazdırılan mikrodizi için oluşturulan benzersiz ızgara dosyasını kaydedin. Tanımlanmış glikan standartları da basılı mikrodizilere pozitif kontroller olarak dahil edildi.
Seçilen glikan standartları için elde edilen harita bağlanma profili, daha önce bildirilen epitop özgüllüklerine karşılık gelir.
