Transférez les grilles nettoyées avec le côté fenêtré du film vers le haut sur le papier buvard humide. Immergez les grilles hydrophobes verticalement dans l’eau pour éviter qu’elles ne se plient en raison de la tension de l’eau. Disposez les grilles immergées en un réseau carré, en les gardant proches mais sans les chevaucher.
Remplissez l’auge de revêtement de la grille avec plus d’eau déminéralisée, en veillant à ce que la surface de l’eau soit à au moins cinq millimètres au-dessus des grilles. Pour retirer le film de graphène MMA de la parabole, abaissez lentement le couvercle dans la parabole à un angle, à une certaine distance du film de graphène. Placez la lamelle de recouvrement sous la feuille de graphène MMA et alignez ses bords parallèlement à la feuille.
Ensuite, soulevez la lamelle verticalement de l’eau, en apportant le film de graphène MMA avec elle. Transférez le film de graphène MMA dans l’auge en abaissant le couvercle dans l’eau à un angle de 45 degrés afin que le film se détache du couvercle et flotte à la surface de l’eau. Positionnez le film de graphène MMA au-dessus des grilles avant que le niveau d’eau ne diminue.
À l’aide d’une pipette Pasteur dont la pointe a été fondue, manipulez soigneusement la position du film de graphène MMA. À l’aide d’une seringue, abaissez lentement le niveau d’eau de manière à ce que le film de graphène MMA atterrisse parfaitement sur les grilles et recouvre complètement leurs surfaces. À l’aide d’une pince à épiler propre et sèche, soulevez le papier buvard qui maintient les grilles dans une boîte de Pétri propre et sans poussière.
Placez la base du bloc de support de grille TEM de serrage au fond du premier plat de cristallisation contenant 200 millilitres d’acétone fraîche. Individuellement, transférez chaque grille avec le côté MMA vers le haut du papier buvard vers un puits dans le bloc de support de grille. Couvrez le plat de papier d’aluminium et secouez doucement sur un shaker orbital pendant 30 minutes.
Fixez les grilles en plaçant le couvercle métallique sur le bloc de support de grille. Ensuite, à l’aide d’une fourchette coudée ou d’une longue pince à épiler, soulevez délicatement le bloc hors du plat et placez-le au fond du deuxième plat contenant 200 millilitres d’acétone fraîche. Après avoir retiré le couvercle du bloc, secouez-le doucement sur un agitateur orbital pendant 30 minutes.
Remettez le couvercle sur le bloc porte-grille et transférez-le dans le plat contenant 200 millilitres d’alcool isopropylique. Retirez le couvercle avant de secouer doucement pendant 20 minutes. Transférez les grilles dans une petite boîte de Pétri en verre recouverte de papier buvard et séchez les grilles à l’air libre pendant 10 minutes.
Dans les modes de diffraction MET, les grilles EM recouvertes d’une monocouche de graphène montrent des pics de Bragg correspondant au réseau hexagonal du graphène. Les grilles de graphène ont un effet de concentration sur un échantillon, comme on l’observe lorsque l’on compare l’apoferritine appliquée à des grilles d’or sacré avec et sans le support de graphène. Une transformée de Fourier rapide de la micrographie cryoEM de l’apoferritine sur des grilles d’or recouvertes de graphène a également montré des pics de Bragg correspondant au réseau hexagonal de graphène.