Transfira as grades limpas com o lado da película fenestrada voltado para cima para o papel manchado úmido. Submergir as grades hidrofóbicas verticalmente na água para evitar a flexão devido à tensão da água. Organize as grades submersas em uma matriz quadrada, mantendo-as próximas, mas sem sobreposição.
Encha a calha de revestimento da grade com água mais deionizada, garantindo que a superfície da água esteja pelo menos cinco milímetros acima das grades. Para retirar o filme de grafeno MMA do prato, abaixe lentamente a tampa para dentro do prato em um ângulo, a alguma distância do filme de grafeno. Posicione a tampa por baixo da folha de grafeno MMA e alinhe suas bordas paralelamente com a folha.
Em seguida, levante a tampa verticalmente da água, trazendo consigo o filme de grafeno MMA. Transfira o filme de grafeno MMA para a calha baixando o deslizamento da tampa para a água em um ângulo de 45 graus para que o filme se desprenda do deslizamento da tampa e flutue na superfície da água. Posicione o filme de grafeno MMA acima das grades antes que o nível da água diminua.
Usando uma pipeta de Pasteur cuja ponta foi derretida fechada, manipule cuidadosamente a posição do filme de grafeno MMA. Usando uma seringa, diminua lentamente o nível da água de tal forma que o filme de grafeno MMA pouse perfeitamente nas grades e cubra completamente suas superfícies. Usando uma pinça limpa e seca, levante o papel manchado que prende as grades a uma placa de Petri limpa e sem poeira.
Coloque a base do bloco de fixação do suporte da grelha TEM no fundo da primeira placa de cristalização contendo 200 mililitros de acetona fresca. Individualmente, transfira cada grade com o lado do MMA voltado para cima do papel manchado para um poço no bloco titular do grid. Cubra o prato com papel alumínio e agite suavemente em um agitador orbital por 30 minutos.
Fixe as grades colocando a tampa metálica no bloco do suporte da grade. Em seguida, usando um garfo dobrado ou uma pinça longa, levante cuidadosamente o bloco para fora do prato e coloque-o no fundo do segundo prato contendo 200 mililitros de acetona fresca. Depois de remover a tampa do bloco, agite-a suavemente em um agitador orbital por 30 minutos.
Coloque a tampa de volta no bloco do suporte da grade e transfira-a para o prato contendo 200 mililitros de álcool isopropílico. Retire a tampa antes de agitar suavemente por 20 minutos. Transfira as grades para uma pequena placa de Petri de vidro coberta com papel mata-borrão e seque as grades ao ar por 10 minutos.
Nos modos de difração de MET, grades EM cobertas com uma monocamada de grafeno mostram picos de Bragg correspondentes à rede hexagonal do grafeno. As grades de grafeno têm um efeito concentrador em uma amostra, como observado ao comparar a apoferritina aplicada a grades de ouro sagrado com e sem o suporte de grafeno. Uma transformada rápida de Fourier da micrografia crioEM da apoferritina sobre grades de ouro cobertas de grafeno também mostrou picos de Bragg correspondentes à rede hexagonal de grafeno.
