Uploaded: 2023-10-20T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Drosophila Larval Dissection and Fixation for Microtubule Visualization at JoVE.com

drosophila larval dissection and fixation for microtubule visualization

Using Drosophila Larval Neuromuscular Junction and Muscle Cells to Visualize Microtubule Network

Watch this Scientific Journal Video about Drosophila Larval Dissection and Fixation for Microtubule Visualization at JoVE.com

Drosophila Larvale dissectie en fixatie voor visualisatie van microtubuli

Begin met het uitzoeken van een zwervende Drosophila derde instar-larve met behulp van een lange stompe pincet. Was de larve met hemolymfe-achtige zoutoplossing en droog hem vervolgens af met een doekje. Plaats de larve vervolgens dorsaal of ventraal op een dissectieschotel onder de stereomicroscoop.Afhankelijk van het te observeren weefsel, kiest u voor dorsale of ventrale dissectie. Speld de bekhaken en staart van de larve vast om een uitgebreide positionering te behouden. Voeg vervolgens een druppel van de hemolymfe-achtige zoutoplossing toe om te voorkomen dat de larve uitdroogt.Maak met een dissectieschaar een kleine dwarse incisie dicht bij het achterste uiteinde zonder deze volledig door te snijden. Ga verder met het snijden langs de ventrale middellijn en beweeg naar het voorste uiteinde. Steek nu elk vier insectenpinnen in de hoeken van de larve.Maak de nodige aanpassingen aan de insectenpinnen om het uitrekken van de larve te maximaliseren. Gebruik een pincet om de inwendige organen voorzichtig te verwijderen en schade aan de spieren te voorkomen. Om de larve te fixeren, dompelt u de karkassen onder in 100 L 4%paraformaldehyde, terwijl ze nog steeds op de snijschaal zijn aangebracht.Hierna demonteer je de pinnen. Breng het monster vervolgens over in een microcentrifugebuisje van 2 ml gevuld met 0,2% PBST. Plaats de tube 10 minuten op een shaker op 15 RPM.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Drosophila Larval Dissection and Fixation for Microtubule Visualization

Viewing Microtubule Networks in Drosophila Neuromuscular Junctions and Muscle Cells

Understanding Microtubule Network in Drosophila Neuromuscular Junctions (Video) | JoVE

Drosophila-larvale neuromusculaire junctie en spiercellen gebruiken om het netwerk van microtubuli te visualiseren

The microtubule network is an essential component of the nervous system. Mutations in many microtubules regulatory proteins are associated with ...

Immunohistochemistry of Drosophila Larva for Microtubule Visualization

Immunohistochemie van Drosophila-larve voor visualisatie van microtubuli

Mounting and Image Acquisition of Drosophila Larval Microtubules

Montage en beeldacquisitie van microtubuli van Drosophila-larven