Name: in-vivo centrifugation of drosophila embryos
Uploaded: 2010-06-23T16:55:00
Duration: 13 min 54 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos at JoVE.com

אנו מודים סוזן Gerbi, היידי סמית, דיוויד למברט לאספקת חומר למבחן ב-vivo צנטריפוגה על Sciara coprophila ו Ilyanassa obsoleta, בהתאמה. אנו מודים לחברי במעבדה Welte הערות על הטכניקה ואת כתב היד. פיתוח ועידון של assay ב-vivo צנטריפוגה נתמך על ידי מענק NIGMS GM64687 אל לוע. התמונות באיור. איור 1 ו. 5E, F פורסמו 2 והם נדפס כאן באישור.

<ol>
	<li>Wieschaus, E., N&#252;sslein-Volhard, C., Roberts, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Looking+at+embryos.">Looking at embryos.</a> Drosophila: A Practical Approach. , 179-214 (1998).</li><li>Cermelli, S., Guo, Y., Gross, S. P., Welte, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+lipid+droplet+proteome+reveals+that+droplets+are+a+protein+storage+depot.">The lipid droplet proteome reveals that droplets are a protein storage depot.</a> Curr Biol. 16, 1783-1795 (2006).</li><li>Kiehart, D. P., Crawford, J. M., Montague, R. A., Sullivan, W., Ashburner, M., Hawley, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+microinjection+of+Drosophila+embryos.">Quantitative microinjection of Drosophila embryos.</a> Drosophila Protocols. , 345-359 (2000).</li><li>LaJeunesse, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three+new+Drosophila+markers+of+intracellular+membranes.">Three new Drosophila markers of intracellular membranes.</a> Biotechniques. 36 (784-788), 790-790 (2004).</li><li>Schuh, M., Lehner, C. F., Heidmann, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incorporation+of+Drosophila+CID/CENP-A+and+CENP-C+into+centromeres+during+early+embryonic+anaphase.">Incorporation of Drosophila CID/CENP-A and CENP-C into centromeres during early embryonic anaphase.</a> Curr Biol. 17, 237-243 (2007).</li><li>Clarkson, M., Saint, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+His2AvDGFP+fusion+gene+complements+a+lethal+His2AvD+mutant+allele+and+provides+an+in+vivo+marker+for+Drosophila+chromosome+behavior.">A His2AvDGFP fusion gene complements a lethal His2AvD mutant allele and provides an in vivo marker for Drosophila chromosome behavior.</a> DNA Cell Biol. 18, 457-462 (1999).</li><li>Welte, M. A., Gross, S. P., Postner, M., Block, S. M., Wieschaus, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+regulation+of+vesicle+transport+in+Drosophila+embryos:+forces+and+kinetics.">Developmental regulation of vesicle transport in Drosophila embryos: forces and kinetics.</a> Cell. 92, 547-557 (1998).</li><li>Tran, S. L., Welte, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=unpublished+observations.">unpublished observations.</a> , .</li><li>Rothwell, W. F., Sullivan, W., Sullivan, W., Ashburner, M., Hawley, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescent+analysis+of+Drosophila+embryos.">Fluorescent analysis of Drosophila embryos.</a> Drosophila Protocols. , 141-157 (2000).</li><li>Guo, Y., Jangi, S., Welte, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organelle-specific+Control+of+Intracellular+Transport:+Distinctly+Targeted+Isoforms+of+the+Regulator+Klar.">Organelle-specific Control of Intracellular Transport: Distinctly Targeted Isoforms of the Regulator Klar.</a> Mol Biol Cell. 16, 1406-1416 (2005).</li><li>Meyer, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overlapping+Functions+of+Argonaute+Proteins+in+Patterning+and+Morphogenesis+of+Drosophila+Embryos.">Overlapping Functions of Argonaute Proteins in Patterning and Morphogenesis of Drosophila Embryos.</a> PLoS Genet. 2, 1224-1239 (2006).</li><li>Shubeita, G. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Consequences+of+motor+copy+number+on+the+intracellular+transport+of+kinesin-1-driven+lipid+droplets.">Consequences of motor copy number on the intracellular transport of kinesin-1-driven lipid droplets.</a> Cell. 135, 1098-1107 (2008).</li><li>Welte, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+lipid-droplet+transport+by+the+Perilipin+homologue+LSD2.">Regulation of lipid-droplet transport by the Perilipin homologue LSD2.</a> Curr. Biol. 15, 1266-1275 (2005).</li><li>Phadnis, N., Welte, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unpublished+Observations.">Unpublished Observations.</a> , .</li><li>Phadnis, N., Welte, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unpublished+Observations.">Unpublished Observations.</a> , .</li><li>Morgan, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+XXII:+The+redistribution+of+the+visible+materials+of+the+egg+by+centrifuging.">Chapter XXII: The redistribution of the visible materials of the egg by centrifuging.</a> Experimental Embryology. , (1927).</li><li>Welte, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unpublished+Observations.">Unpublished Observations.</a> , .</li><li>Bownes, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abnormal+oogenesis+and+embryogenesis+resulting+from+centrifuging+Drosophila+melanogaster+females.">Abnormal oogenesis and embryogenesis resulting from centrifuging Drosophila melanogaster females.</a> J Embryol Exp Morphol. 40, 65-81 (1977).</li></ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

צעדים קריטיים ודא כי ריכוז אגר גבוה מספיק. אם זה נמוך מדי, אגר יהיה להתפורר במהלך צנטריפוגה, ואת העוברים יתפוצץ או להיות מכוונת באופן אקראי. אם ריכוז אגר הוא רק מעט נמוך מדי או אם אגר הוא רטוב (הסרת יבש מספיק או לא מספיק עודף של TSS בשלב 4.3), העוברים יצוף מתוך החורים שלהם במהלך צנטריפוגה ולהיות מכוונת כראוי. אם אגר הוא שפך דק מדי, זה יהיה גם התמוטטות או סדק במהלך צנטריפוגה. ודא כי עוברי לא מתקדמים מעבר בשלבים cellularization. אחרת, ההפרדה של אברונים לא יעבוד (איור 5c) מאז האברונים יהיה מוחרם בתוך אלפי תאים בודדים. בשנת עוברים הצעיר בשלב אחד את התא, האברונים חופשיים לנדוד מרחקים גדולים ולצבור לפי צפיפות מאפיין שלהם. כדי למנוע ניתוח עוברים כי הם זקנים מדי, הקפד (i) כולל אוסף מראש כדי לאפשר לנקבות להטיל ביצים הישן (שלב 2.4), (ii) לאסוף עוברים במשך 3 שעות או פחות (שלב 2.5), (iii) ויזואלית לבחור עוברים שלבים לפני cellularization להטבעת לתוך אגר (שלב 4.2), (ד) לשמור על הטבעה זמן קצר כדי למנוע התפתחות עד סוף cellularization (שלב 4.6), ו (v) לבטל את העוברים שלא שכבת נכונה (שלב 5.6) . לא לקמץ על הזמן צנטריפוגה. למרות שחלק עוברים יראה שכבות נחמד גם אחרי 10 דקות בלבד של צנטריפוגה, ההפרדה אינה עולה בקנה אחד מעובר לעובר. 30 דק &#39;ספינים לתת תוצאות עקביות מאוד. כמו כן, עוד פעם צנטריפוגה, ככל השכבות יציבים לאחר צנטריפוגה הסתיים. זה חשוב עבור יישומים אלה שבהם זה לוקח זמן לתהליך עוברים עוד לפני השימוש (למשל, אם הם צריכים להיות מעובד לניסויים השתלה או רכוב לניתוח confocal). שינויים אפשריים אוסף ביצה הסרת סיסית פרוטוקולים שונים רבים קיימים שלבים 2 ו -3 1, 3, 9, ו יעבוד כמו גם אלה שתוארו כאן, כל עוד נעשה שימוש בעוברים צעירים, ביצה תשואה גבוהה, את החלק היחסי של אי - עוברים מבוים ממוזער. Anterior-האחורי יישור הפרוטוקול מכוונת כל כך עוברים את הקצה האחורי קבור אגר ואת הקצה הקדמי הוא מעלה (איור 3). האוריינטציה זה טוב עקביות, כך אפשר להשתמש micropyle כציון דרך אשר בסופו הצביעה במהלך צנטריפוגה (איור 1, 5). עם זאת, בפועל, קל לבחור את הכיוון של עוברי centrifuged על ידי הופעתו שונים של טיפות השומנים שכבות חלמון על ידי מיקרוסקופ שדה בהיר. לאחר מכן ניתן יהיה הר עוברים עם צד למעלה; גמישות זה מזרז את תהליך ההרכבה. צנטריפוגה Unoriented ההיבט ביותר זמן רב מאתגר מבחינה טכנית של הפרוטוקול הוא מקבע את העוברים אגר (שלב 4). זה דורש נוגעים זה עובר פעמיים (פעם אחת כדי להכניס אותו לתוך החור פעם לשחזר אותה לאחר צנטריפוגה). כחלופה, ניתן להעביר עוברים בשלב 4.1 לתוך צינורות microcentrifuge מלא TSS. כאשר אלה הם צינורות centrifuged ב microcentrifuge (13,000 סל&quot;ד, 10-30 דקות), עוברים גם בדרך כלל גם שכבת 10-13. וריאציה זו מאפשרת לתהליך מאות העוברים באותו זמן מהר מאוד. ואולם, layering אינו עקבי כמו; שבריר של עוברי לא לפתח שכבות נפרדות למרות כוחות צנטריפוגה הרבה יותר גבוה (~ 16000 ז) מאשר ליישם בפרוטוקול לעיל. מאתגר יותר היא העובדה כי הכיוון של עוברים הוא משתנה, ניתן לראות הפרדה בזוויות שונות על ציר מרכזי העובר. השתנות זו דורשת הנסיין לברר לאחר צנטריפוגה איך עובר מסוים הוסדר בצינור צנטריפוגות. עם השימוש autofluorescence החלמון כסמן החלק הכי צפופה של העובר, זה בדרך כלל אפשרי, למרות שזה דורש תרגול הרבה יותר שיקול דעת לעשות את זה אמין. אם יש עוברים מספיק במדגם, אחד עשוי להיות מסוגל למיין את אותם מקרים שבהם עוברים במקרה מסודרים כמו באיור. 1. צנטריפוגה של עוברים במעטפת ביצה שלהם אפשר להטביע עוברים אגר עבור לשלב 4 מבלי להסיר את סיסית הראשון 2. בגישה זו, עוברים על הצלחת אוסף מכוסים שמן halocarbon במקום אקונומיקה 50% בשלב 3.2 (halocarbon הופך את שקוף סיסית). עוברים שלבים המתאימים נבחרים ומועברים צלחת אגר חדש באמצעות פינצטה; על ידי תופס רק את החוטים ביצה עם פינצטה, נזקראוי העובר הוא התחמק. עוברים המוטבעים כמו בשלב 4.4 דרך 4.8, עם חוטים ביצה קדמית מזדקרת מתוך החור אגר. הפגז ביצה יוסר על ידי טיפול אקונומיקה 50% לאחר עוברים כבר centrifuged וחפרו מתוך אגר כמו בשלב 5.4. צנטריפוגה בנוכחות הקליפה ביצה עשויה לשפר את שיעור devitellinization לאחר קיבוע (שלב 6.2), אבל הבחירה של השלבים הנכונים עבור צנטריפוגה (שלב 4.2) הוא יותר מאתגר. יישומים צנטריפוגה העובר הוא שימושי במיוחד עבור ניסויים colocalization, כלומר, לבדוק אם חלבון מסוים localizes ל אברון מרכזי מסוים. לדוגמה, החלבון קלר קיים מוקדם על טיפות השומנים עובריים, אך לוקליזציה זה מאתגר להפגין עוברים ללא פגע. בחלקו, זה בגלל שתי puncta קלר ואת טיפות השומנים נמצאים בשפע בפריפריה העובר 10, מה שהופך colocalization מזויף קשה לשלול. עם זאת, צנטריפוגה מתרכז טיפות לתוך שכבת השומנים ברורה, ולכן, colocalization עם האות קלר הופך ברור 10. ניתוח דומה הוכיחה באופן חד משמעי לוקליזציה של חלבונים אחרים טיפות השומנים 8, 13-15, כולל דוגמאות מפתיע כמו ההיסטונים מסוימים 2 ו במקרים בהם החלבון נמצא בכל מקום בגוף, אך מועשר על טיפות השומנים 8. כאשר עוברים ניתן לבחור חזותית על ידי השלב ההתפתחותי (שלב 4.2), אפשר גם לזהות גיוס מוסדר מבחינה התפתחותית של חלבונים טיפות השומנים 8, 15. בדיקת colocalization עם טיפות השומנים קל במיוחד מאז טיפות השומנים מצטברים &quot;כובע&quot; מובחנת מבחינה ויזואלית, ולכן אין סמן נוסף או כתם נדרש לזהות את השכבה. למעשה, בגלל הקלות שלה והתוצאות חזותי מרשים בפוטנציה (איור 1, איור. 5 D, E), המעבדה שלנו משתמשת בטכניקה זו באופן שגרתי עכשיו מבחן ראשון האם חלבון הוא מועמד מקומי על טיפות השומנים. באופן עקרוני, מחקרים colocalization דומה צריך לעבוד על אברונים אחרים באיור. 1, וסביר עבור אחרים (כולל טפילים תאיים) אשר הפצה עוברים centrifuged טרם תועדו. מאז צנטריפוגה מתרכז האברונים לתוך להקות חזק, זה מאפשר בידוד של חלק המועשר אברונים אלה. גישה זו כבר בשימוש להתאושש טיפות השומנים להשתלה לעוברי תורם 2. זה יכול להיות גם אפשרי ביוכימית לנתח את השבר מועשר (למשל, על ידי חיתוך שכבות את העוברים לאחר קיבוע 15). השיטה המתוארת כאן יש יישומים מעבר עוברים תסיסנית, כמו צנטריפוגה ניתן להשתמש כדי לרבד את הביצים של מינים שונים (כולל צפרדעים, נמטודות, tunicates, annelids, קיפודי ים, רכיכות, צורבים ו) 16. במעבדה שלנו, השתמשנו בפרוטוקול לעיל עוברים של Musca זבוב domestica 2 יש המועסקים צנטריפוגה unoriented בניתוח של עוברים מן יתוש פטרייה Sciara coprophila 17 ועל חילזון Ilyanassa obsoleta 17. לבסוף, שיטה זו אינה מוגבלת עוברי: צנטריפוגה יכולה להיות שימושית גם כדי לרבד תאים גדולים אחרים, כגון ביציות (למשל, תסיסנית 2, 18 ו - באג פרח חלבלוב Oncopeltus fasciatus 17). עבור הדגימה שונה, התנאים צנטריפוגה המדויק צריך להיות מותאם: לדוגמה, 10 דקות ב 3000 גרם די ביעילות לרבד בעוברים של Musca domestica 2, ואם centrifuged עוד הרבה זמן, העוברים נוטים להתפרק במהלך קיבוע ו immunostaining.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>60x15 mm Petri dishes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Becton Dickinson</td>
<td>#35-1007</td>
<td>From Falcon</td>
</tr>
<tr>
<td>Wire mesh</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Small Parts</td>
<td>CX-0150</td>
<td>stainless steel type 304; mesh size #150 x150, wire diameter: 0.0026 inches</td>
</tr>
<tr>
<td>Tungsten needles</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>10130-10</td>
<td>0.25 mm</td>
</tr>
<tr>
<td>Moria Nickel Plated Pin/Needle Holder</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>26016-12</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fly Cages</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Genesee Scientific</td>
<td>59-100 or 59-101</td>
<td>For 65 mm or 100 mm diameter Petri dishes, respectively</td>
</tr>
<tr>
<td>Halocarbon Oil 27</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>H8773</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

in-vivo centrifugation of drosophila embryos

האסטרטגיה העיקרית מטהרים לבודד סוגים שונים של אברונים תאיים היא להפריד אותם זה מזה מבוסס על הבדלים בצפיפות קליל. עם זאת, כאשר התאים הם שיבשו לפני, חלבונים צנטריפוגה ואת האברונים בסביבה לא דובר זה לעתים קרובות באופן בלתי הולם לדבוק זה בזה. כאן אנו מתארים שיטה האברונים נפרד על ידי צפיפות שלם, החיים עוברים תסיסנית. עוברי מוקדם לפני cellularization נקצרים מהכלובים האוכלוסייה, ופצצות החיצוני שלהם ביצה יוסרו על ידי טיפול עם אקונומיקה 50%. העוברים מועברים לצלחת אגר קטן ונוסף, סוף האחורי הראשונה, לתוך חורים אנכיים קטנים אגר. לוחיות המכילות עוברים המוטבע centrifuged למשך 30 דקות בכל 3000g. אגר תומכת עוברים ושומר אותם בכיוון מוגדר. לאחר מכן, עוברים הם חפרו מתוך אגר עם מחט קהה. צנטריפוגה המפרידה האברונים העיקריים לתוך שכבות נפרדות, ריבוד גלוי בקלות באמצעות מיקרוסקופ שדה בהיר. מספר סמנים ניאון זמינים לאשר ריבוד מוצלח עוברים חיים. חלבונים הקשורים אברונים מסוימים יהיה מועשר בשכבה מסוימת, הוכחת colocalization. שכבות בודדת ניתן לשחזר לניתוח השתלת ביוכימית או ביצים לתוך התורם. טכניקה זו חלה על הפרדה אברון בתאים גדולים אחרים, כולל ביצים וביציות של מינים שונים.

Watch this Scientific Journal Video about In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos at JoVE.com

In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos

אנו מתארים שיטה האברונים נפרד על ידי צפיפות המגורים<em&gt; תסיסנית</em&gt; עוברים. עוברים המוטבעים אגר ו centrifuged. טכניקה זו התשואות ההפרדה לשחזור של האברונים העיקריים לאורך הציר הקדמי, האחורי את העובר. שיטה זו מקלה על ניסויים colocalization והתשואות שברים אברון לניתוח השתלת ניסויים ביוכימיים.

In-vivo צנטריפוגה של עוברים תסיסנית

A major strategy for purifying and isolating different types of intracellular organelles is to separate them from each other based on differences in ...

Research

JoVE Journal

Biology

In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos

Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos

הכנת תרבויות העצבית מ Midgastrula עוברים שלב תסיסנית

This video illustrates the procedure for making primary neuronal cultures from midgastrula stage Drosophila embryos. The methods for collecting embryos ...

The Preparation of Drosophila Embryos for Live-Imaging Using the Hanging Drop Protocol

The Preparation of Drosophila Embryos for Live-Imaging Using the Hanging Drop Protocol

הכנת תסיסנית עוברים Live-הדמיה באמצעות פרוטוקול Drop Hanging

Green fluorescent protein (GFP)-based timelapse live-imaging is a powerful technique for studying the genetic regulation of dynamic processes such as ...

Mesoscopic Fluorescence Tomography for In-vivo Imaging of Developing Drosophila

Mesoscopic Fluorescence Tomography for In-vivo Imaging of Developing Drosophila

Mesoscopic Fluorescence טומוגרפיה עבור In-vivo הדמיה של פיתוח תסיסנית</em

Visualizing  developing organ formation as well as progession and treatment of disease often  heavily relies on the ability to optically interrogate ...

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

הכנת עוברים אלקטרונים מיקרוסקופית של תסיסנית לב עוברי צינור

The morphogenesis of the Drosophila  embryonic heart tube has emerged as a valuable model system for studying cell migration, cell-cell adhesion and cell ...

Upright Imaging of Drosophila Embryos

Upright Imaging of Drosophila Embryos

הדמיה של זקופה תסיסנית עוברים

Several well-known morphogenetic gradients and cellular movements occur along the dorsal/ventral axis of the Drosophila embryo. However, the current ...

Primary Cell Cultures from Drosophila Gastrula Embryos

Primary Cell Cultures from Drosophila Gastrula Embryos

תא תרבויות ראשי מ תסיסנית Gastrula עוברים

Here we describe a method for preparing and culturing primary cells dissociated from Drosophila gastrula embryos.   In brief, a large amount of staged ...

In vivo Imaging of Intact Drosophila Larvae at Sub-cellular Resolution

In vivo Imaging of Intact Drosophila Larvae at Sub-cellular Resolution

בתחום ההדמיה vivo של הזחלים תסיסנית אינטקט ברזולוציה משנה הסלולר

Recent improvements in optical imaging, genetically encoded fluorophores and genetic tools allowing efficient establishment of desired transgenic animal ...

RNAi Interference by dsRNA Injection into Drosophila Embryos

RNAi Interference by dsRNA Injection into Drosophila Embryos

RNAi הפרעה על ידי הזרקה לתוך dsRNA תסיסנית עוברים

Genetic screening is one of the most powerful methods available for gaining insights into complex biological process 1. Over the years many improvements ...

Imaging Cell Shape Change in Living Drosophila Embryos

Imaging Cell Shape Change in Living Drosophila Embryos

צורה הדמיה תא שינוי חיים תסיסנית עוברים

The developing Drosophila melanogaster embryo undergoes a number of cell shape changes that are highly amenable to live confocal imaging.  Cell shape ...

Isolation and Purification of Kinesin from Drosophila Embryos

Isolation and Purification of Kinesin from Drosophila Embryos

בידוד וטיהור של kinesin מ תסיסנית עוברים

Motor proteins move cargos along microtubules, and transport them to specific sub-cellular locations. Because altered transport is suggested to underlie a ...