Midline Laparotomy Surgery in Donor Mice for Orthotopic Liver Transplantation

まず、麻酔をかけたドナーマウスを高倍率顕微鏡の下に置きます。はさみを使用して、剣状突起から恥骨合成までの正中開腹術を行います。次に、肋骨の下に横方向の切り込みを入れて、十字のようなパターンを作成します。

剣状突起を後退させた後、腸を内臓除去し、腹腔の左側にある濡れたガーゼスポンジの上に置きます。肝臓を動員するには、肝臓をすべての靭帯付着部から分離します。適切な肝動脈またはPHAが露出したら、湾曲した鉗子を使用して、それをスケルトン化します。

PHAを結紮した後、総胆管(CBD)の全長を解剖します。胆管ステントをCBDに挿入し、10-Oナイロン縫合糸で固定してから、CBDの遠位側を結紮します。濡れたガーゼスポンジを使用して、右肝葉を剣状突起に向かって引っ込め、下大静脈(IVC)を露出させます。

肝下大静脈(IHIVC)を後腹膜から離して動員し、右副腎静脈を焼灼します。.右腎動脈と静脈を解剖して結紮したら、両方と残りの靭帯付着部を切断します。右腎臓を摘出した後、0.5ミリリットルの冷たいヒスチジントリトファンケトグルタル酸溶液と100単位のヘパリンを門脈(PV)から注射します。1分間の注射後、脾臓および上腸間膜静脈よりも上門脈を切断します。

肝臓を灌流するには、PVからの液体が透明になるまで、冷たいヒスチジントリトファンケトグルタル酸保存液をIHIVCにゆっくりと注入します。右腎静脈のすぐ上のIHIVCにマイクロクランプまたは細い縫合糸を置き、クランプのすぐ下を切開します。CBDをステントから遠位に切断したら、10-Oナイロン縫合糸で嚢胞管を特定して結紮します。

鉗子で胆嚢のドームをつかみ、スプリングハサミを使用して縫合糸の上の嚢胞管を切断して胆嚢摘出術を完了します。肝臓を下方に引っ込めて肝上下大静脈(SHIVC)を露出させ、レシピエントマウスの吻合に十分な長さを維持して切断します。追加の靭帯アタッチメントを取り外した後。

肝臓を冷たい生理食塩水に入れます。