Для начала поместите мышь-донора под наркозом под мощный микроскоп. С помощью ножниц проведите срединную лапаротомию от мечевидного отростка к лобковому синтезу. Затем сделайте поперечный надрез ниже ребер, чтобы создать узор, похожий на крест.
После втягивания мечевидного отростка выпотрошите кишечник, и положите его на влажную марлевую губку с левой стороны брюшной полости. Чтобы мобилизовать печень, отделите ее от всех связочных прикреплений. Как только собственная печеночная артерия или ПГА обнажена, с помощью изогнутых щипцов скелетизируйте ее.
После перевязки ПГА рассеките по всей длине общий желчный проток, или КБД. Вставьте стент желчного протока в КБД и закрепите его нейлоновым швом 10-O, затем переложите дистальную часть КБД. С помощью влажной марлевой губки втяните правую долю печени в сторону мечевидного яблока и обнажите нижнюю полую вену, или НПВ.
Мобилизуйте подпеченочную нижнюю полую вену, или IHIVC, от забрюшинного пространства и прижгите правую надпочечниковую вену. После того, как правая почечная артерия и вена рассечены и перевязаны, перережьте обе и оставшиеся связочные прикрепления. После удаления правой почки введите 0,5 миллилитра холодного раствора гистидина тритофана кетоглутарата со 100 единицами гепарина через воротную вену, или ПВ. После одной минуты инъекции разрежьте воротную вену выше селезеночной и верхней брыжеечных вен.
Чтобы перфузировать печень, медленно вводите холодный раствор для консервации гистидина тритофана кетоглутарата в IHIVC до тех пор, пока жидкость, поступающая из PV, не станет прозрачной. Наложите микрозажим или тонкий шов на IHIVC чуть выше правой почечной вены и разрежьте чуть ниже зажима. После того, как КБД будет разрезан дистальнее стента, определите и перевязайте пузырный проток нейлоновым швом 10-O.
Щипцами возьмитесь за купол желчного пузыря, и с помощью пружинных ножниц разрежьте пузырный проток над швом, чтобы завершить холецистэктомию. Втяните печень вниз, чтобы обнажить надпеченочную нижнюю полую вену, или SHIVC, и разрежьте ее, сохранив достаточную длину для анастомоза у мышей-реципиентов. После удаления дополнительных связочных прикреплений.
Поместите печень в холодный солевой раствор.