Для начала поместите мышь-донора под наркозом под мощный микроскоп. С помощью ножниц выполните срединную лапаротомию от мечевидного отростка до лобкового синтеза. Затем сделайте поперечный надрез ниже ребер, чтобы создать крестообразный рисунок.
После втягивания мечевидного отростка выпотрошите кишечник, и положите его на влажную марлевую губку с левой стороны брюшной полости. Чтобы мобилизовать печень, отделите ее от всех связочных прикреплений. После того, как правильная печеночная артерия или PHA обнажена, с помощью изогнутых щипцов скелетируйте ее.
После перевязки PHA рассекают по всей длине общий желчный проток, или CBD. Вставьте стент желчного протока в КБД и закрепите его нейлоновым швом 10-O, затем перевязайте дистальную часть КБД. Используя влажную марлевую губку, втяните правую долю печени к мечевидной точке и обнажите нижнюю полую вену, или IVC.
Мобилизуйте инфрапеченочную нижнюю полую вену, или IHIVC, подальше от забрюшинного пространства и прижгите правую надпочечниковую вену. После того, как правая почечная артерия и вена будут рассечены и перевязаны, перережьте обе и оставшиеся связочные прикрепления. После удаления правой почки ввести 0,5 миллилитра холодного раствора гистидина тритофана кетоглутарата со 100 ЕД гепарина через воротную вену, или ПВ. Через одну минуту инъекции перерезать воротную вену, расположенную выше селезенки, и верхнюю брыжеечную вену.
Для перфузии печени медленно вводите холодный консервирующий раствор гистидина тритофана кетоглутарата в IHIVC до тех пор, пока жидкость, выходящая из ПВ, не станет прозрачной. Наложите микрозажим или тонкий шов на IHIVC чуть выше правой почечной вены и разрежьте чуть ниже зажима. После того, как КБД будет разрезан дистально по отношению к стенту, определите и перевязайте кистозный проток нейлоновым швом 10-O.
Щипцами захватите купол желчного пузыря и пружинными ножницами перережьте пузырный проток над швом, чтобы завершить холецистэктомию. Втяните печень вниз, чтобы обнажить надпеченочную нижнюю полую вену, или SHIVC, и разрежьте ее, сохранив достаточную длину для анастомоза у мышей-реципиентов. После удаления дополнительных связочных присадок.
Поместите печень в холодный физраствор.