Name: Thawing and Culturing Cryopreserved Blood for Cytokinesis Assay (Video) | JoVE
Uploaded: 2024-02-23T14:40:00
Duration: 1 min 53 s
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thawing and culturing cryopreserved blood for cytokinesis assay

The Micronucleus Assay on Cryopreserved Whole Blood

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Thawing and Culturing Cryopreserved Blood for Cytokinesis Assay (Video) | JoVE 

사이토키네시스 분석을 위한 냉동 보존된 혈액 해동 및 배양

배양 웰을 준비하려면 24웰 플레이트의 뚜껑에 기증자 코드 A 또는 B, 날짜 및 투여량을 표시합니다. 액체 질소에서 사람의 혈액이 들어 있는 크라이오 바이알을 제거하고 작은 얼음 결정이 보일 때까지 따뜻한 수조에서 부분적으로 해동합니다. 그런 다음 층류 후드에서 바이알을 조심스럽게 열어 기포가 튜브 내부로 쏟아지는 것을 방지합니다.바이알의 내용물을 재현탁하여 15밀리리터 원심분리 튜브로 옮깁니다. 튜브를 부드럽게 휘젓면서 한 방울 정도 예열된 PBS 1밀리리터를 추가합니다. P-1000 피펫을 사용하여 PBS와 혈액을 혼합합니다.희석하고 균일하게 세척하려면 예열된 PBS 7ml를 15밀리리터 튜브에 넣고 피펫팅으로 혼합합니다. 혈액을 180g에서 8분 동안 원심분리합니다. 한편, 24웰 플레이트의 라벨이 없는 웰에 500마이크로리터의 PBS를 채우고 플레이트를 섭씨 37도에서 예열합니다.원심분리 후 팔레트를 방해하지 않고 튜브에 약 1밀리리터를 남기고 상층액을 조심스럽게 제거합니다. 피펫을 사용하여 팔레트를 나머지 상층액에 다시 현탁시킵니다. 그런 다음 앞에서 설명한 대로 8밀리리터의 따뜻한 PBS를 튜브에 서서히 추가합니다.부유된 혈액을 원심분리합니다. 그 동안 표시된 웰에 200마이크로리터의 RPMI 배양 배지를 추가하고 그림과 같이 플레이트를 예열합니다. 원심분리 후 상층액을 제거하고 약 80마이크로리터의 상층액을 남깁니다.그런 다음 280마이크로리터의 태아 송아지 세럼을 넣고 팔레트를 다시 현탁시킵니다. 180 마이크로리터의 셀 현탁액을 표시된 웰로 옮깁니다. 섭씨 37도의 이산화탄소 인큐베이터에서 10분 동안 접시를 배양합니다.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Thawing and Culturing Cryopreserved Blood for Cytokinesis Assay

Examining Micronuclei Yields in Irradiated Whole Blood Samples

Cryopreservation of Whole Blood Samples for High Throughput Analysis (Video) | JoVE

냉동 보존된 전혈에 대한 소핵 분석

The in vitro cytokinesis-block micronucleus (CBMN) assay is a widely used technique in radiobiology research, biological dosimetry, genotoxicity studies, ...

연구

암 연구학

Cytokinesis-Block Micronucleus Assay on Irradiated Blood Cell Culture Prepared from Cryopreserved Whole Blood Samples

Cytokinesis-Block Micronucleus Assay on Irradiated Blood Cell Culture Prepared from Cryopreserved Whole Blood Samples (Video) | JoVE 

냉동 보존된 전혈 샘플에서 준비한 방사선 조사 혈액 세포 배양에 대한 Cytokinesis-Block Micronucleus 분석