Name: Isolation of CNS Cell Types Using Magnetic Beads in Naive and EAE Mice (Video) | JoVE
Uploaded: 2023-10-06T13:40:00
Duration: 1 min 32 s
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isolation of cns cell types using magnetic beads in naive and eae mice

Simultaneous Isolation of Principal Central Nervous System-Resident Cell Types from Adult Autoimmune Encephalomyelitis Mice

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Isolation of CNS Cell Types Using Magnetic Beads in Naive and EAE Mice (Video) | JoVE 

Isolamento de tipos celulares do SNC utilizando esferas magnéticas em camundongos Naive e EAE

Para começar, divida a suspensão purificada e não diluída de células do SNC de camundongos em duas frações para isolamentos adicionais de micróglia e oligodendrócitos. Em seguida, adicione microesferas magneticamente marcadas específicas para o antígeno de superfície para diferentes tipos de células do SNC à respectiva suspensão celular. Coloque a coluna no campo magnético, iguale a coluna e, em seguida, adicione a suspensão de célula resultante na coluna.As células marcadas magneticamente serão retidas dentro da coluna e as células não marcadas passarão. Depois de remover a coluna do campo magnético, libere as células marcadas magneticamente da coluna em um tubo como a fração de célula positivamente selecionada. Divida o fluxo negativo através dos oligodendrócitos em duas frações para os isolamentos posteriores de neurônios e astrócitos.A análise por citometria de fluxo usando marcadores específicos do tipo celular combinado com discriminação de células vivas ou mortas produziu micróglia, oligodendrócitos, astrócitos e neurônios. A caracterização fenotípica das diferentes populações celulares comprovou que suspensões unicelulares com aproximadamente 90% de pureza e viabilidade foram obtidas para todos os principais tipos celulares residentes no SNC.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Isolation of CNS Cell Types Using Magnetic Beads in Naive and EAE Mice

Isolating All CNS Resident Cell Types Simultaneously from Autoimmune Mice

Studying Neuroinflammatory Pathways Through Simultaneous Isolation of All Main CNS-Resident Cell Types (Video) | JoVE

Isolamento Simultâneo dos Principais Tipos Celulares Residentes no Sistema Nervoso Central de Camundongos Adultos com Encefalomielite Autoimune

Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) is the most common murine model for multiple sclerosis (MS) and is frequently used to further elucidate ...

Neurociência

Preparation of CNS Tissue for Isolating Cells in EAE Mice

Preparation of CNS Tissue for Isolating Cells in EAE Mice  (Video) | JoVE 

Preparação de Tecido do SNC para Isolamento de Células em Camundongos EAE 

Dissociation of CNS Tissue for Isolating Cells in EAE Mice

Dissociation of CNS Tissue for Isolating Cells in EAE Mice  (Video) | JoVE 

Dissociação do tecido do SNC para isolamento de células em camundongos EAE 

Removal of Debris and Red Blood Cells from CNS Cell Suspension of EAE Mice

Removal of Debris and Red Blood Cells from CNS Cell Suspension of EAE Mice (Video) | JoVE 

Remoção de Detritos e Hemácias da Suspensão de Células do SNC de Camundongos EAE