시작하려면 접종 루프를 사용하여 YPD 플레이트에서 칸디다 알비칸스의 단클론 콜로니를 선택합니다. 콜로니를 5 밀리리터의 YPD 액체 배지로 옮기고 밀리리터당 50 마이크로그램의 카베니실린을 보충합니다. 밤새 섭씨 30도에서 220RPM의 일정한 속도로 세포를 흔듭니다.
그런 다음 셀 현탁액을 400g에서 실온에서 5분 동안 원심분리합니다. 상층액을 버린 후 세포를 생리식염수에 재현탁시키고 세포 현탁액의 탁도를 0.5 McFarland 표준과 일치시켜 세포 농도를 조정합니다. 0.9% 생리식염수를 만들려면 염화나트륨 0.9g의 무게를 측정하고 탈이온수 100ml에 녹입니다.
다음으로, 사용하기 전에 121°C에서 30분 동안 티타늄 니켈 합금 와이어로 수술 기구를 고압멸균합니다. 그런 다음 30마리의 수컷 C57BL/6 마우스를 대조군 블랭크 임플란트 및 PJI 그룹으로 무작위로 나눕니다. 쥐를 마취한 후 왼쪽 뒷다리의 털을 제거하고 요오드를 사용하여 면도 부위를 소독합니다.
오른쪽 반사의 손실을 관찰하여 마취의 깊이를 확인합니다. 대조군의 마우스의 경우 어떤 치료도 시행하지 마십시오. 빈 임플란트 및 PJI 그룹의 마우스의 경우 숫자 10 블레이드를 사용하여 왼쪽 뒷다리 무릎에 5mm 세로 절개를 만들어 추가 절차를 위해 관절을 노출시킵니다.
이제 멸균 주사기 바늘을 삽입하여 대퇴골 골수내 운하에 5mm 길이의 구멍을 만듭니다. 가위로 자르기 전에 니켈 티타늄 합금 와이어를 구멍에 조심스럽게 삽입하십시오. 그런 다음 블랭크 임플란트 그룹의 마우스에 대해 니켈 티타늄 합금 와이어를 따라 2마이크로리터의 YPD 배지를 한 방울씩 투여합니다.
나일론 봉합사를 사용하여 상처를 층층이 봉합합니다. 다음으로, PJI 그룹의 니켈 티타늄 합금 와이어를 따라 마우스의 관절 공간에 칸디다 알비칸스 세포 2마이크로리터를 접종합니다. 나일론 봉합사를 사용하여 상처를 층층이 봉합합니다.
14일 동안 물과 음식을 무료로 이용할 수 있는 쥐를 사육합니다.