Сбор первичных половых клеток из донорских эмбрионов дрозофилы

Приступайте к сбору первичных половых клеток или ПГК из эмбрионов окалины. После сборки микроманипулятора системы. Во время работы под стереомикроскопом используйте щипцы для переноса эмбрионов.

Выровняйте покрытые оболочкой эмбрионы в два ряда на стекле для сбора PGC по двум опорным линиям. Ориентируйте эмбрионы передней стороной вправо и вентральной стороной вверх. Осторожно переместите кончик иглы для трансплантации к переднему концу эмбриона.

Проникните в эмбрион, перемещая предметный столик микроскопа, и слегка втяните иглу. Когда кончик достигает заднего конца. Сбросьте любое ярмо в игле внутрь слоя соматической клетки.

Переместите кончик иглы к заднему полюсу и аккуратно вставьте ПГК в иглу, не занимая много времени. Быстро вытащите иглу из эмбриона. Выводите желток и другие загрязнения из иглы, сохраняя при этом ПГК.

Загрузите в иглу чистое силиконовое масло из бассейна. Перед сбором ПГК из нового эмбриона поместите как можно больше силиконового масла внутрь слоя соматических клеток, сохраняя при этом загруженные ПГК в игле. После сбора PGC со всех эмбрионов подряд поместите PGC на поверхность эмбриона и сбросьте все игма или другие загрязнения на другой соседний эмбрион.

Аналогичным образом соберите и объедините ПГК из эмбрионов второго ряда.