Staining of Peroxidase-Positive Leukocytes in Semen Samples

首先，将收集的人类精液样本液化，并使用巴斯德移液管将其彻底均质化。然后将 100 微升精液样品转移到离心管中。向该试管中加入 900 微升染色溶液。

通过移液反复混合并彻底均质化反应物。将管子放在二维振荡器上，在室温下以200RPM连续搅拌30分钟。在等待染色反应的同时，使用CASA系统继续分析精子浓度。

打开系统后，双击SCAscope图标打开应用软件。然后，通过移液将精液样品充分混合，并在 SCA 计数室中转移多达 10 微升的样品。等待 60 秒，让精液样本停止漂移。

接下来，将 SCA 计数室放在 CASA 系统的样品架上。在应用软件中，在对话框中输入患者信息。单击开始按钮以记录精液中精子的浓度。

然后，在 30 分钟的染色反应完成后停止振荡器。在分析之前，通过移液混合离心管的内容物。将多达 10 微升的反应物转移到精子计数室中，并用专用的玻璃盖玻片盖住。

将精子计数室放在显微载物台上并打开光学显微镜。然后，等待 60 秒，让反应物样品停止漂移。在 10 倍物镜下，调整航向和微调旋钮以选择视野。

然后切换到40倍物镜，观察精子和过氧化物酶阳性白细胞。使用电子计数器系统计数至少 200 个精子和棕色过氧化物酶阳性白细胞的数量。使用这种技术，在精液样品中对过氧化物酶阳性白细胞进行染色。

过氧化物酶阳性白细胞呈现棕色色调，与未染色的普通圆形细胞形成鲜明对比。