mitochondrial function analysis in fluconazole&#45;induced petite colonies of candida glabrata

Analyse de la formation de petites colonies et de la résistance aux médicaments chez Candida glabrata

Fungal infections, particularly those caused by Candida albicans and increasingly drug-resistant Candida glabrata, pose a serious global threat1. These infections can be deadly, especially for hospitalized patients and those with weakened immune systems. Rising antifungal resistance threatens the control of invasive candidiasis, a severe fungal infection with high mortality, especially from Candida albicans2. Resistant strains hinder effective treatment, potentially increasing both complexity and death rates. In Alameda County, California, USA, C. glabrata has become the most prevalent invasive species3. This shift in the prevalence and distribution of Candida species may be influenced by local healthcare practices, patient demographics, the utilization of antifungal agents, and the prevalence of risk factors for Candida infections.
Petite mutants in Candida, lacking functional mitochondria, reveal how this organelle affects drug response, virulence, and stress resistance4,5. C. glabrata readily forms these colonies, gaining sensitivity to polyenes while losing it to azoles6. Azole sensitivity and respiratory function are intricately linked, with diminished respiration leading to resistance via mitochondrial DNA loss7. Petite colonies of C. glabrata with azole resistance have been isolated from human stool samples from a bone marrow transplant recipient undergoing fluconazole treatment8 and from blood culture bottles of patients with bloodstream infections9. Their potential implications in drug resistance, virulence, and stress response highlight their clinical significance. Additionally, their distinct properties make them valuable tools for investigating fundamental questions in mitochondrial biology5. As research into petite mutants continues, their applications in both clinical and basic research are likely to expand.
This study discovered that photodynamic therapy (PDT) can induce petite colonies in C. glabrata, expanding the range of methods beyond the traditional techniques of exposing C. glabrata to ethidium bromide or fluconazole.

Pleins feux sur l’auteur : La thérapie photodynamique comme nouvelle approche pour induire de petites colonies dans le candida résistant aux médicaments pour la recherche antifongique

Induction de petites colonies chez Candida glabrate via la thérapie photodynamique médiée par Rose Bengal

The research aims to use photodynamic therapy, also known as PDT, to fight against drug-resistant Candida infection. In this study, we are trying to answer how effectively PDT kills the fungi, and how the virulence of the fungi changes after the treatment. We found petite colonies from the after PDT.Present methods for inducing petite colonies rely on ethidium bromide or fluconazole, which may work through different pathways on drug resistance and the stress responses, compared to PDT. Recently, petite colonies of Candida have become a significant concern in the clinic because they may resist medication and increase mortality rates. Photodynamic therapy has become one of the antifungal treatments and our finding helps breach the gap between traditional methods used to study petite colonies.Our findings provide evidence that PDT can induce petite colonies in drug resistant Candida in-vitro, presenting a groundbreaking method to study petite colonies. We'll definitely delve deeper into this field. There are many questions to be answered.How and why do petite colonies form after PDT stress? Do different Candida species respond differently? I believe it's a never ending story to be explored.

Analyse de la fonction mitochondriale dans de petites colonies de Candida glabrata induites par le fluconazole

Pour commencer, placez la culture de Candida glabrata et le milieu YPD sur une plate-forme de travail. Ajustez la densité optique de la suspension des cellules de levure à 600 nanomètres à 0,1 avec un milieu YPD. Transférez un millilitre de suspension cellulaire dans un tube de cinq millilitres.Trempez un coton-tige stérile dans la suspension de cellules de levure. Écouvillonnez le coton d’avant en arrière sur la plaque de gélose Mueller Hinton, en tournant deux fois à 60 degrés. Ensuite, frottez le périmètre pour une couverture uniforme.Divisez la plaque en trois secteurs égaux à l’aide d’un marqueur. Stérilisez la pince à feu pendant une à deux secondes. Après le refroidissement, placez un disque vierge au centre de chaque secteur.Ajoutez 12,5 microlitres de bouillon de fluconazole dans chaque disque. Bien mélanger pour éviter les bulles et incuber à 37 degrés Celsius pendant 20 à 24 heures. Le lendemain, ajoutez 20 microlitres de chlorure de triphényltétrazolium à 20% directement au centre de chaque colonie.Incuber l’assiette à 37 degrés Celsius pendant 30 à 40 minutes. Numérisez la plaque à 1200 DPI à l’aide d’un scanner optique couleur 48 bits. Le traitement au fluconazole induit efficacement de petits mutants de C. glabrata.Une zone circulaire claire de non-croissance entourait le disque de fluconazole dans la culture T zéro, indiquant une moindre résistance aux médicaments chez le champignon parental. Dans la culture T trois, de nombreuses petites colonies se sont formées près du disque, suggérant une résistance aux médicaments après trois traitements de thérapie photodynamique répétés.

Research

JoVE Journal

Biology

Mitochondrial Function Analysis in Fluconazole&#45;Induced Petite Colonies of Candida glabrata

Induction of Petite Colonies in Candida glabrate via Rose Bengal-Mediated Photodynamic Therapy

Facing a 40% mortality rate in candidemia patients, drug-resistant Candida and their petite mutants remain a major treatment challenge. Antimicrobial ...

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Biologie

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