כדי להתחיל, לקבל תאי לוקמיה גדל בתנאים אופטימליים להשתלה. לאחר ספירת התאים, מטילים אותם במשקל של 300 גרם למשך חמש דקות בטמפרטורת החדר ומשליכים את הסופרנטנט. עבור צביעת CM-Dil, להשהות מחדש את התאים בתמיסת העבודה כדי לקבל פעם אחת 10 בחזקת שישה תאים ב 100 מיקרוליטר ולדגור אותם ב 37 מעלות צלזיוס במשך 10 דקות.
שטפו את התאים פעמיים עם 10 מיליליטר של 1X HBSS בטמפרטורת החדר. לאחר הטלת התאים ב 300g במשך חמש דקות, להשעות אותם PBS המכיל 1% FBS כדי להשיג צפיפות של 40, 000 תאים למיקרוליטר. לאחר מכן הפעל את מזרק המיקרו ואת המשאבה.
הגדר את לחץ ההזרקה לתשעה עד 11 פאונד לאינץ 'מרובע, ובזמן ההזרקה ל -0.5 שניות לחיתוך המחט וקיבוע הפתח. יש להעמיס כחמישה מיקרוליטרים מקו התרחיף של תאי הגידול לתוך המחט בזהירות, במעבר אחד, תוך הימנעות מהיווצרות בועות אוויר. באמצעות מלקחיים Dumont 5, חתכו את קצה המחט כדי לייצר פתח שיכול לתמוך בפליטה.
לאחר מכן בחר עוברים בריאים של דגי זברה מתחת למיקרוסקופ, ובטל כל חריגה התפתחותית. בעזרת פיפטת פסטר מזכוכית, מרימים את העוברים המורדמים ומסדרים 10 עד 15 מהם במצב רוחבי על צלחת אגרוז 1.5%. יש להסיר עודפי מים כדי להשאיר כמות מינימלית להישרדות העובר.
לאחר מכן, לאשר תחת מיקרוסקופ האור כי המחט נחתכת היטב ויש לה תאים. הזריקו 10 עד 15 ננוליטר המתאימים ל-400 עד 600 תאים לחלמון העוברים למשך 0.2 עד 0.3 שניות. לאחר הזרקת כל העוברים, לאסוף אותם במי עובר טריים.
שעה לאחר ההזרקה, עקוב אחר בולוס התאים כדי להפריד את העוברים עם צביעה אופטימלית או בולוס טוב מאלה עם כתמים נחותים או בולוס נחות. צביעת CM-Dil וסימון חלבון פלואורסצנטי אפשרו מעקב אחר התקדמות המחלה באמצעות מיקרוסקופיה. והישרדות העוברים ירדה לאחר הזריקה עם שני קווי לוקמיה שונים גנטית.
