Den inneslutna impinging jet-mixern riktar två hög-Reynolds-talsströmmar mot varandra inuti en större blandningskammare. Det linjära rörelsemängdsmomentet för varje stråle försvinner i bildandet av turbulenta virvlar i mikronskala som orsakar snabb och enhetlig blandning av lösningsmedels- och antilösningsmedelsströmmarna. För att börja formulera lipidnanopartiklarna, fyll två femmilliliterssprutor med etanol och lås in var och en i en inloppsport på den slutna påverkande strålen, eller CIJ-mixern.
Tryck snabbt ner sprutorna och samla upp mixerns avloppsvatten som avfall. Ta bort sprutorna för etanolspolning från CIJ. Blås en torr kväveström genom inloppsadaptrarna för att torka de interna kanalerna i CIJ.
Blanda lipidstamlösningarna och späd dem med etanol i ett 1,5-milliliters mikrocentrifugrör. Späd 100 millimolar pH 4-acetat buffertlager till 10 millimolar i en total volym på fyra milliliter. För att förbereda antilösningsmedelsströmmen, blanda RNA med acetatbuffert i ett 1,5 milliliters rör.
Förbered 500 mikroliter lösning i en spruta på en milliliter. Vänd sprutan upp och ner och driv ut eventuell luft från den vattenhaltiga antilösningsmedelsstrålen. På samma sätt, samla 500 mikroliter lipidlösning i en spruta på en milliliter.
Vänd sedan upp och ner på sprutan för att driva ut luft från den etanoiska lösningsmedelsströmmen. Placera den rena CIJ-mixern över flaskan med släckbad. Passa ihop de två sprutorna med inloppsportarna för CIJ-mixern.
Tryck snabbt ner båda sprutorna för att blanda lösningsmedels- och lösningsmedelsströmmarna och samla upp lipidnanopartiklar i släckbadet. Ta bort CIJ-mixern från släckbadet med sprutorna fortfarande fastsatta. Håll CIJ över en avfallsbehållare och ta bort sprutorna, så att den kvarvarande upphållande volymen kan rinna in i avfallsbehållaren.
Täck nu släckbadet som innehåller lipidnanopartikeldispersion och snurra försiktigt flaskan.
