Kapalı çarpma jet karıştırıcısı, daha büyük bir karıştırma odası içinde iki yüksek Reynolds sayı akışını birbirine yönlendirir. Her bir jetin doğrusal momentumu, çözücü ve antisolvent akışlarının hızlı ve homojen bir şekilde karışmasına neden olan mikron ölçekli türbülanslı girdapların oluşumunda dağılır. Lipid nanopartiküllerini formüle etmeye başlamak için, iki adet beş mililitrelik şırıngayı etanol ile doldurun ve her birini kapalı çarpma jetinin veya CIJ karıştırıcısının bir giriş portuna kilitleyin.
Şırıngaları hızla bastırın ve mikser atık suyunu atık olarak toplayın. Etanol yıkama şırıngalarını CIJ'den çıkarın. CIJ'in iç kanallarını kurutmak için giriş adaptörlerinden kuru bir nitrojen akışı üfleyin.
Lipid stok çözeltilerini karıştırın ve 1.5 mililitrelik bir mikrosantrifüj tüpünde etanol ile seyreltin. 100 milimolar pH 4 asetat tampon stoğunu toplam dört mililitre hacimde 10 milimolar ile seyreltin. Antisolvent akışı hazırlamak için, RNA'yı 1.5 mililitrelik bir tüpte asetat tamponu ile karıştırın.
Bir mililitrelik bir şırıngada 500 mikrolitre çözelti hazırlayın. Şırıngayı ters çevirin ve sulu antisolvent akımından herhangi bir havayı dışarı atın. Benzer şekilde, bir mililitrelik bir şırıngada 500 mikrolitre lipit çözeltisi toplayın.
Ardından, etanoik çözücü akışından havayı dışarı atmak için şırıngayı ters çevirin. Temiz CIJ mikserini söndürme banyosu şişesinin üzerine yerleştirin. İki şırıngayı CIJ mikser giriş portlarına eşleştirin.
Çözücü ve antisolvent akışlarını karıştırmak ve söndürme banyosunda lipid nanopartiküllerini toplamak için her iki şırıngayı da hızla bastırın. CIJ karıştırıcıyı, şırıngalar hala takılıyken söndürme banyosundan çıkarın. CIJ'yi bir atık kabının üzerinde tutun ve şırıngaları çıkarın, böylece kalan tutma hacminin atık kabına akmasına izin verin.
Şimdi lipid nanopartikül dispersiyonu içeren söndürme banyosunu kapatın ve şişeyi hafifçe döndürün.
