Name: preparation of mouse brain tissue for immunoelectron microscopy
Uploaded: 2010-07-20T17:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Mouse Brain Tissue for Immunoelectron Microscopy at JoVE.com

हम एक क्रमिक वृत्तों में सिकुड़नेवाला पंप और vibratome का उपयोग, के रूप में के रूप में अच्छी तरह से तकनीकी सहायता के लिए रोचेस्टर मेडिकल सेंटर के विश्वविद्यालय के इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप रिसर्च कोर सुविधा पर करेन एल बेंटले और गेल Schneider के लिए शाओ मिंग लू और हैरिस ए Gelbard धन्यवाद. इस काम एनआईएच (EY019277), व्हाइटहॉल फाउंडेशन, Burroughs Wellcome कोष, और अल्फ्रेड पी. स्लोअन फाउंडेशन AKM करने के लिए से अनुदान द्वारा वित्त पोषित किया गया था. M.-È.T. एक Fonds डी ला Recherche एन SANTE डु (FRSQ) postdoctoral प्रशिक्षण पुरस्कार क्यूबेक द्वारा वित्त पोषित है.

1. पशु छिड़काव <ol><li> छिड़काव से पहले दिन में तैयार: - फॉस्फेट बफर के 2 एल (पीबी, 100 मिमी, पीएच 7.4) और सोडियम की 1 एल फॉस्फेट buffered खारा (पीबीएस, 0.9% 50 मिमी पंजाब में NaCl, पीएच 7.4) दोहरा आसुत जल में. पीबीएस और 1L पंजाब के 4 डिग्?...

<ol>
	<li>Venable, J. H., Coggeshall, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simplified+lead+citrate+stain+for+use+in+electron+microscopy.">A simplified lead citrate stain for use in electron microscopy.</a> J Cell Biol. 25, 407-407 (1965).</li><li>Riad, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Somatodendritic+localization+of+5-HT1A+and+preterminal+axonal+localization+of+5-HT1B+serotonin+receptors+in+adult+rat+brain.">Somatodendritic localization of 5-HT1A and preterminal axonal localization of 5-HT1B serotonin receptors in adult rat brain.</a> J Comp Neurol. 417 (2), 181-181 (2000).</li><li>Tremblay, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Localization+of+EphA4+in+axon+terminals+and+dendritic+spines+of+adult+rat+hippocampus.">Localization of EphA4 in axon terminals and dendritic spines of adult rat hippocampus.</a> J Comp Neurol. 501 (5), 691-691 (2007).</li><li>Tremblay, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+course+of+EphA4+cellular+and+subcellular+localization+in+the+postnatal+rat+hippocampus.">Developmental course of EphA4 cellular and subcellular localization in the postnatal rat hippocampus.</a> J Comp Neurol. 512 (6), 798-798 (2009).</li><li>Bouvier, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pre-synaptic+and+post-synaptic+localization+of+EphA4+and+EphB2+in+adult+mouse+forebrain.">Pre-synaptic and post-synaptic localization of EphA4 and EphB2 in adult mouse forebrain.</a> J Neurochem. 106 (2), 682-682 (2008).</li><li>Bouvier, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EphA4+is+localized+in+clathrin-coated+and+synaptic+vesicles+in+adult+mouse+brain.">EphA4 is localized in clathrin-coated and synaptic vesicles in adult mouse brain.</a> J Neurochem. , (2010).</li></ol>

यहाँ हम माउस मस्तिष्क के ऊतकों के immunoelectron माइक्रोस्कोपी है कि इष्टतम ultrastructural संरक्षण और immunocytochemical पता लगाने, जब प्रक्रियाओं को कड़ाई से प्रदर्शन कर रहे हैं के बीच एक उत्कृष्ट समझौता प्रदान करता है के लिए तैय?...

एक * हमेशा एक धूआं हुड के नीचे काम करना चाहिए और जब acrolein, paraformaldehyde, आज़मियम और हैंडलिंग और भी अपने कचरे के निपटान चाहिए ठीक से nitrile दस्ताने पहनते हैं.

preparation of mouse brain tissue for immunoelectron microscopy

संचरण इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी (मंदिर) microglial, oligodendrocytic, astrocytic, और neuronal subcellular (dendrite, वृक्ष के समान रीढ़ की हड्डी, अक्षतंतु, अक्षतंतु टर्मिनल, perikaryon) डिब्बों के रूप में के रूप में अच्छी तरह से उनके intracellular organelles cytoskeleton है और दृश्यमान करने के लिए अत्यंत उपयोगी है, केंद्रीय तंत्रिका तंत्र में उच्च स्थानिक संकल्प. के रूप में प्रस्तुत, मंदिर के साथ संयुक्त, पूर्व एम्बेडिंग immunocytochemistry कुछ विशिष्ट सुविधाओं और पहचान मानदंड (जैसे, microglial perikarya और प्रक्रियाओं, जब microglia Iba1 विशिष्ट मार्कर (आयनित कैल्शियम बाध्यकारी एडाप्टर एक अणु के खिलाफ एक एंटीबॉडी का उपयोग कर के साथ सेलुलर तत्वों की भेदभाव की अनुमति देता है यहाँ)), सेलुलर तत्वों की neurotransmitter सामग्री (जैसे, serotonergic) और उनके घुलनशील या झिल्ली बाध्य प्रोटीन की ultrastructural स्थानीयकरण (जैसे, 5 HT1A और EphA4 रिसेप्टर्स) की पहचान. यहाँ, हम acrolein लगानेवाला, हटाने और मस्तिष्क के सेक्शनिंग, के रूप में के रूप में अच्छी तरह से immunoperoxidase diaminobenzidine धुंधला (थपका), राल एम्बेडिंग, और ultrathin मस्तिष्क वर्गों के सेक्शनिंग के साथ चूहों के transcardiac छिड़काव के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन. इन प्रक्रियाओं के पूरा होने पर, immunostained सामग्री मंदिर के साथ परीक्षा के लिए तैयार है. जब कड़ाई से प्रदर्शन किया, इस तकनीक का इष्टतम ultrastructural संरक्षण और immunocytochemical पता लगाने के बीच एक उत्कृष्ट समझौता प्रदान करता है.

Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Mouse Brain Tissue for Immunoelectron Microscopy at JoVE.com

Preparation of Mouse Brain Tissue for Immunoelectron Microscopy

हम चूहों, हटाने और मस्तिष्क के सेक्शनिंग, के रूप में के रूप में अच्छी तरह से immunoperoxidase धुंधला हो जाना, राल एम्बेडिंग, और ultrathin मस्तिष्क वर्गों के सेक्शनिंग के transcardiac छिड़काव के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन. इन प्रक्रियाओं के पूरा होने पर, immunostained सामग्री संचरण इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी के साथ परीक्षा के लिए तैयार है.

माउस मस्तिष्क के ऊतकों के Immunoelectron माइक्रोस्कोपी के लिए तैयार

Transmission electron microscopy (TEM) is extremely useful for visualizing microglial, oligodendrocytic, astrocytic, and neuronal subcellular compartments ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Focussed Ion Beam Milling and Scanning Electron Microscopy of Brain Tissue

ध्यान केंद्रित आयन बीम मिलिंग और मस्तिष्क के ऊतकों के इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी स्कैनिंग

This protocol describes how biological samples, like brain tissue, can be imaged in three dimensions using the focussed ion beam/scanning electron ...

Multiphoton Microscopy of Cleared Mouse Brain Expressing YFP

मंजूरी माउस YFP व्यक्त मस्तिष्क के multiphoton माइक्रोस्कोपी

Multiphoton microscopy of intrinsic fluorescence and second harmonic generation (SHG) of whole mouse organs is made possible by optically clearing the ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

कार्यात्मक न्यूरोइमेजिंग अल्ट्रासोनिक रक्त मस्तिष्क बाधा विघटन और मैंगनीज बढ़ाकर एमआरआई का उपयोग

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Micron-scale Resolution Optical Tomography of Entire Mouse Brains with Confocal Light Sheet Microscopy

Confocal लाइट शीट माइक्रोस्कोपी के साथ पूरे माउस दिमाग की माइक्रोन पैमाने संकल्प ऑप्टिकल टोमोग्राफी

Understanding the architecture of mammalian  brain at single-cell resolution is one of the key issues of neuroscience.  However, mapping neuronal soma and ...

Genetic Manipulation of Cerebellar Granule Neurons In Vitro and In Vivo to Study Neuronal Morphology and Migration

Genetic Manipulation of Cerebellar Granule Neurons In Vitro and In Vivo to Study Neuronal Morphology and Migration

अनुमस्तिष्क ग्रेन्युल न्यूरॉन्स की आनुवंशिक हेरफेर<em&gt; इन विट्रो</em&gt; और<em&gt; में Vivo</em&gt; Neuronal आकृति विज्ञान और प्रवास का अध्ययन करने के लिए

Developmental events in the brain including neuronal morphogenesis and migration are highly orchestrated processes. In vitro and in vivo analyses allow ...

The Olfactory System as a Model to Study Axonal Growth Patterns and Morphology In Vivo

The Olfactory System as a Model to Study Axonal Growth Patterns and Morphology In Vivo

एक मॉडल के रूप घ्राण प्रणाली axonal विकास पैटर्न और आकृति विज्ञान का अध्ययन करने के लिए<em&gt; Vivo</em

The olfactory system has the unusual capacity to generate new neurons throughout the lifetime of an organism. Olfactory stem cells in the basal portion of ...

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

एक अनुकूलित N-मिथाइल-D-glucamine सुरक्षात्मक वसूली विधि का उपयोग कर तीव्र मस्तिष्क स्लाइस की तैयारी

This protocol is a practical guide to the N-methyl-D-glucamine (NMDG) protective recovery method of brain slice preparation. Numerous recent studies have ...

Preparation of Non-human Primate Brain Tissue for Pre-embedding Immunohistochemistry and Electron Microscopy

पूर्व embedding Immunohistochemistry और इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी के लिए गैर मानव प्राइमेट मस्तिष्क के ऊतकों की तैयारी

Despite all the technological advances at the light microscopy&#160;level, electron microscopy remains the only tool in neuroscience to examine and ...

Preparation of Newborn Rat Brain Tissue for Ultrastructural Morphometric Analysis of Synaptic Vesicle Distribution at Nerve Terminals

तंत्रिका टर्मिनलों पर Synaptic आशय वितरण के Ultraस्ट्रक्चरल Morphometric विश्लेषण के लिए नवजात चूहे के मस्तिष्क के ऊतकों की तैयारी

Our laboratory and many others have exploited the high resolving power of transmission electron microscopy to study the morphology and spatial ...

A Hydrophobic Tissue Clearing Method for Rat Brain Tissue

चूहा मस्तिष्क ऊतक के लिए एक हाइड्रोफोबिक ऊतक समाशोधन विधि

Hydrophobic tissue clearing methods are easily adjustable, fast, and low-cost procedures that allows for the study of a molecule of interest in unaltered ...