Para iniciar o vórtice do vírus adeno-associado ou AAV amostra e centrifugue para garantir que todo o líquido permaneça no fundo do tubo. Adicione 45 microlitros de solução contendo DNase I a um tubo de tira de oito tubos de PCR de 0,2 mililitro. Transfira cinco microlitros da amostra de AAV para o tubo que contém a solução de DNase.
Após o vórtice, centrifugue a amostra brevemente para garantir que todo o líquido permaneça no fundo. Usando um termociclador, incube as amostras por uma hora a 37 graus Celsius e depois resfrie-as a quatro graus Celsius. Em seguida, prepare a diluição apropriada da amostra tratada com DNase em tampão de diluição AAV em uma nova tira de oito tubos de PCR de 0,2 mililitro.
Após a diluição em série, vórtice as amostras e centrifugue para garantir que todo o líquido permaneça no fundo. Combine os primers direto e reverso sonda ddPCR Supermix e DNase's-Free Water nos volumes necessários. Vortex a mistura principal e centrifugue brevemente o tubo.
Em seguida, transfira 19,8 microlitros da mistura principal para cada tubo em uma nova tira de oito tubos de PCR de 0,2 mililitro.
