Name: non-invasive imaging of leukocyte homing and migration in vivo
Uploaded: 2010-12-05T17:10:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo at JoVE.com

עבודה זו נתמכה על ידי NIH מענק R01-3155-53502 ו-אוניברסיטת וושינגטון פייזר הסכם Biomedical Research.

1. בעלי חיים הכנה: פרוטוקול זה משתמש הנקבה הבוגרת LysM-eGFP עכברים בוגרים, בהם נויטרופילים מקרופאגים הם שכותרתו fluorescently ידי הביטוי של eGFP 1. <ol class="lalpha" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סימון כלי הדם: כדי להמחיש את ...

<ol>
	<li>Faust, N., Varas, F., Kelly, L. M., Heck, S., Graf, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insertion+of+enhanced+green+fluorescent+protein+into+the+lysozyme+gene+creates+mice+with+green+fluorescent+granulocytes+and+macrophages.">Insertion of enhanced green fluorescent protein into the lysozyme gene creates mice with green fluorescent granulocytes and macrophages.</a> Blood. 96, 719-726 (2000).</li><li>Zinselmeyer, B. H., Lynch, J. N., Zhang, X., Aoshi, T., Miller, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Video-rate+two-photon+imaging+of+mouse+footpad+-+a+promising+model+for+studying+leukocyte+recruitment+dynamics+during+inflammation.">Video-rate two-photon imaging of mouse footpad - a promising model for studying leukocyte recruitment dynamics during inflammation.</a> Inflamm Res. 57, 93-96 (2008).</li><li>Zinselmeyer, B. H., Dempster, J., Wokosin, D. L., Cannon, J. J., Pless, R., Parker, I., Miller, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+16.+Two-photon+microscopy+and+multidimensional+analysis+of+cell+dynamics.">Chapter 16. Two-photon microscopy and multidimensional analysis of cell dynamics.</a> Methods Enzymol. 461, 349-378 (2009).</li><li>Gray, D. F., Jennings, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Allergy+in+experimental+mouse+tuberculosis.">Allergy in experimental mouse tuberculosis.</a> Am Rev Tuberc. 72, 171-195 (1955).</li><li>Lin, A., Loughman, J. A., Zinselmeyer, B. H., Miller, M. J., Caparon, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Streptolysin+S+inhibits+neutrophil+recruitment+during+the+early+stages+of+Streptococcus+pyogenes+infection.+Infect+Immun.">Streptolysin S inhibits neutrophil recruitment during the early stages of Streptococcus pyogenes infection. Infect Immun.</a> 77, 5190-5201 (2009).</li><li>Smith, C. J., Zhang, Y., Koboldt, C. M., Muhammad, J., Zweifel, B. S., Shaffer, A., Talley, J. J., Masferrer, J. L., Seibert, K., Isakson, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacological+analysis+of+cyclooxygenase-1+in+inflammation.">Pharmacological analysis of cyclooxygenase-1 in inflammation.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 95, 13313-13318 (1998).</li><li>Wipke, B. T., Allen, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Essential+role+of+neutrophils+in+the+initiation+and+progression+of+a+murine+model+of+rheumatoid+arthritis.">Essential role of neutrophils in the initiation and progression of a murine model of rheumatoid arthritis.</a> J Immunol. 167, 1601-1608 (2001).</li><li>Baez, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+open+cremaster+muscle+preparation+for+the+study+of+blood+vessels+by+in+vivo+microscopy.">An open cremaster muscle preparation for the study of blood vessels by in vivo microscopy.</a> Microvasc Res. 5, 384-394 (1973).</li><li>Mempel, T. R., Scimone, M. L., Mora, J. R., von Andrian, U. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=in+vivo+imaging+of+leukocyte+trafficking+in+blood+vessels+and+tissues.">in vivo imaging of leukocyte trafficking in blood vessels and tissues.</a> Curr Opin Immunol. 16, 406-417 (2004).</li><li>Miller, M. J., Wei, S. H., Cahalan, M. D., Parker, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autonomous+T+cell+trafficking+examined+in+vivo+with+intravital+two-photon+microscopy.">Autonomous T cell trafficking examined in vivo with intravital two-photon microscopy.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 100, 2604-2609 (2003).</li></ol>

בפרוטוקול הווידאו הזאת אנחנו מדגימים את ההליכים עבור הדמיה בלתי פולשנית 2P גיוס לויקוציטים בתגובה לדלקת. שודד הוא אתר קלאסי פיזיולוגיים לחקר דלקת כגון מחלה, אלרגיה דלקת אוטואימונית 4-7. 2P הדמיה מספק תמונה מפורטת של צעדים ברו?...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Isoflurane, USP</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Butler Animal Health Supply</td>
<td>029405</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>655nm non-targeted quantum dots</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>Q21021MP</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tetramathylrhodamine conjugated E. coli BioParticles </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>E2862</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Listeria monocytogenes (Lm)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Reference 2</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Quick gel</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Duro</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Puralube Vet Ointment </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Pharmaderm Animal Health</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Insulin syringes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD</td>
<td>08290-3284-38</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Thermo Scirntific</td>
<td>SH30256.02</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

non-invasive imaging of leukocyte homing and migration in vivo

שני הפוטונים (2P) מיקרוסקופיה היא הדמיה ברזולוציה גבוהה טכניקה הותאם באופן רחב על ידי ביולוגים. הערך של מיקרוסקופיה 2P היא שזה מספק מידע עשיר spatiotemporal לגבי התנהגויות בתוך רקמות תאים שלמים של עכברים חיים. גיוס ליקוציט משחק תפקיד משמעותי בהגנה מפני זיהומים מארח וכאשר מסומנת, יכול לתרום מחלות דלקתיות אוטואימוניות. לימוד גיוס לויקוציטים in vivo מבחינה טכנית מאתגרת מאז התאים עוברים במהירות בתוך כלי הנמצא עמוק בתוך רקמות פיזור אור. עד כה, מחקרי הדמיה intravital ביותר דורשים הכנה כירורגי כדי לחשוף את כלי הדם והרקמות. כדי למנוע נזק לרקמות ודלקת הנגרמת על ידי הניתוח עצמו, כאן, אנחנו מתארים פולשני תא בודד הדמיה הגישה כי ניתן להשתמש כדי ללמוד סחר ליקוציט ב שודד את העכבר הפלנגות. אנו דנים בהיבטים הטכניים של ההכנה שלנו 2P הדמיה ללכת את הקורא דרך בניסוי אופייני הראשונית להגדיר לאוסף ביצוע ונתונים.

Watch this Scientific Journal Video about Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo at JoVE.com

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

כאן אנו מתארים פולשני שני הפוטונים (2P) הגישה מיקרוסקופיה ללמוד ליקוציט ביות ב שודד את העכבר. אנו דנים בהיבטים הטכניים של ההכנה שלנו רקמות הדמיה ללכת את הקורא דרך בניסוי אופייני הראשונית להגדיר לאוסף ביצוע ונתונים.

לא פולשני הדמיה של ביות ליקוציט והגירה In vivo</em

Two-photon (2P) microscopy is a high resolution imaging technique that has been broadly adapted by biologists.  The value of 2P microscopy is that it ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

Competitive Homing Assays to Study Gut-tropic T Cell Migration

מבחני ביות תחרותי לחקר נדידת גוט-טרופי T Cell

In order to exert their function lymphocytes need to leave the blood and migrate into different tissues in the body. Lymphocyte adhesion to endothelial ...

Imaging Leukocyte Adhesion to the Vascular Endothelium at High Intraluminal Pressure

הדמיה הדבקה ליקוציט כדי האנדותל דם בלחץ גבוה Intraluminal

Worldwide, hypertension is reported to be in approximately a quarter of the population and is the leading biomedical risk factor for mortality worldwide. ...

Non-invasive Imaging of Disseminated Candidiasis in Zebrafish Larvae

הדמיה לא פולשנית של פטרת מופצת הזחלים דג הזברה

Disseminated candidiasis caused by the pathogen Candida albicans is a clinically important problem in hospitalized individuals and is associated with a 30 ...

Non-invasive Optical Imaging of the Lymphatic Vasculature of a Mouse

דימות אופטי לא פולשנית של כלי דם הלימפה של עכבר

The lymphatic  vascular system is an important component of the circulatory system that  maintains fluid homeostasis, provides immune surveillance, and ...

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

דגם לא פולשנית של Neuropathogenic<em&gt; Coli Escherichia</em&gt; זיהום בעכברוש הילודים

Investigation of the interactions between animal host and bacterial pathogen is only meaningful if the infection model employed replicates the principal ...

Complete Thymectomy in Adult Rats with Non-invasive Endotracheal Intubation

Thymectomy מלא בחולדות מבוגרות עם לא פולשני endotracheal אינטובציה

Thymectomy in neonatal rodents is an established and reliable procedure for immunological studies. However, in adult rats, complications of hemorrhage and ...

Non-invasive Imaging of the Innate Immune Response in a Zebrafish Larval Model of Streptococcus iniae Infection

Non-invasive Imaging of the Innate Immune Response in a Zebrafish Larval Model of Streptococcus iniae Infection

הדמיה לא פולשנית של התגובה החיסונית המולדת בדגם דג הזברה הזחל של<em&gt; Streptococcus iniae</em&gt; זיהום

The aquatic pathogen, Streptococcus iniae, is responsible for over 100 million dollars in annual losses for the aquaculture industry and is capable of ...

Intravital Microscopy of Leukocyte-endothelial and Platelet-leukocyte Interactions in Mesenterial Veins in Mice

אינטראקציות מיקרוסקופית Intravital של יקוציט-האנדותל וטסיות דם-יקוציט בMesenterial ורידים בעכברים

Intravital microscopy is a method that can be used to investigate different processes in different regions and vessels in living animals. In this ...

Imaging CD4 T Cell Interstitial Migration in the Inflamed Dermis

הדמית תא CD4 T גירת ביניים בדרמיס המוסת

The ability of CD4 T cells to carry out effector functions is dependent upon the rapid and efficient migration of these cells in inflamed peripheral ...

Non-invasive In Vivo Fluorescence Optical Imaging of Inflammatory MMP Activity Using an Activatable Fluorescent Imaging Agent

Non-invasive In Vivo Fluorescence Optical Imaging of Inflammatory MMP Activity Using an Activatable Fluorescent Imaging Agent

לא פולשני<em&gt; בויבו</em&gt; פלואורסצנטי הדמיה אופטית של פעילות MMP דלקתית באמצעות Activatable פלואורסצנטי סוכן הדמיה

This paper describes a non-invasive method for imaging matrix metalloproteinases (MMP)-activity by an activatable fluorescent probe, via in vivo ...