Name: non-invasive imaging of leukocyte homing and migration in vivo
Uploaded: 2010-12-05T17:10:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo at JoVE.com

이 작품은 NIH 그랜트 R01 - 3155-53502 워싱턴 대학 화이자 바이오 메디컬 연구 계약에 의해 지원되었다.

1. 동물 준비 : 이 프로토콜은 neutrophils과 macrophages이 찬란 eGFP 1의 표현에 의해 표시하는, 성인 여성 성인 LysM - eGFP 마우스를 사용합니다. <ol class="lalpha"><li> 혈관에 레이블 : 비 타겟 양자 도트의 15μl 혈관을 시각화하는 (655nm) PBS 100 μl에 희석 및 이미징하기 전에 마우스를 10-30 분에 정맥 주입합니다. </li><li> 마취 : <ol><li> 수의과 흡입 마취 시스템 (귀족 의료 서비...

<ol>
	<li>Faust, N., Varas, F., Kelly, L. M., Heck, S., Graf, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insertion+of+enhanced+green+fluorescent+protein+into+the+lysozyme+gene+creates+mice+with+green+fluorescent+granulocytes+and+macrophages.">Insertion of enhanced green fluorescent protein into the lysozyme gene creates mice with green fluorescent granulocytes and macrophages.</a> Blood. 96, 719-726 (2000).</li><li>Zinselmeyer, B. H., Lynch, J. N., Zhang, X., Aoshi, T., Miller, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Video-rate+two-photon+imaging+of+mouse+footpad+-+a+promising+model+for+studying+leukocyte+recruitment+dynamics+during+inflammation.">Video-rate two-photon imaging of mouse footpad - a promising model for studying leukocyte recruitment dynamics during inflammation.</a> Inflamm Res. 57, 93-96 (2008).</li><li>Zinselmeyer, B. H., Dempster, J., Wokosin, D. L., Cannon, J. J., Pless, R., Parker, I., Miller, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+16.+Two-photon+microscopy+and+multidimensional+analysis+of+cell+dynamics.">Chapter 16. Two-photon microscopy and multidimensional analysis of cell dynamics.</a> Methods Enzymol. 461, 349-378 (2009).</li><li>Gray, D. F., Jennings, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Allergy+in+experimental+mouse+tuberculosis.">Allergy in experimental mouse tuberculosis.</a> Am Rev Tuberc. 72, 171-195 (1955).</li><li>Lin, A., Loughman, J. A., Zinselmeyer, B. H., Miller, M. J., Caparon, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Streptolysin+S+inhibits+neutrophil+recruitment+during+the+early+stages+of+Streptococcus+pyogenes+infection.+Infect+Immun.">Streptolysin S inhibits neutrophil recruitment during the early stages of Streptococcus pyogenes infection. Infect Immun.</a> 77, 5190-5201 (2009).</li><li>Smith, C. J., Zhang, Y., Koboldt, C. M., Muhammad, J., Zweifel, B. S., Shaffer, A., Talley, J. J., Masferrer, J. L., Seibert, K., Isakson, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacological+analysis+of+cyclooxygenase-1+in+inflammation.">Pharmacological analysis of cyclooxygenase-1 in inflammation.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 95, 13313-13318 (1998).</li><li>Wipke, B. T., Allen, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Essential+role+of+neutrophils+in+the+initiation+and+progression+of+a+murine+model+of+rheumatoid+arthritis.">Essential role of neutrophils in the initiation and progression of a murine model of rheumatoid arthritis.</a> J Immunol. 167, 1601-1608 (2001).</li><li>Baez, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+open+cremaster+muscle+preparation+for+the+study+of+blood+vessels+by+in+vivo+microscopy.">An open cremaster muscle preparation for the study of blood vessels by in vivo microscopy.</a> Microvasc Res. 5, 384-394 (1973).</li><li>Mempel, T. R., Scimone, M. L., Mora, J. R., von Andrian, U. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=in+vivo+imaging+of+leukocyte+trafficking+in+blood+vessels+and+tissues.">in vivo imaging of leukocyte trafficking in blood vessels and tissues.</a> Curr Opin Immunol. 16, 406-417 (2004).</li><li>Miller, M. J., Wei, S. H., Cahalan, M. D., Parker, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autonomous+T+cell+trafficking+examined+in+vivo+with+intravital+two-photon+microscopy.">Autonomous T cell trafficking examined in vivo with intravital two-photon microscopy.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 100, 2604-2609 (2003).</li></ol>

이 비디오 프로토콜에서 우리는 염증에 대한 응답으로 백혈구 모집의 비침습 2P 이미징을위한 절차를 보여줍니다. 노상 강도는 알레르기, 감염 및 면역 질환 4-7로 염증을 공부에 대한 고전적인 생리적 사이트입니다. 2P 영상은 압연 및 이펙터 기능의 사이트에 chemotaxis하는 혈관에 접착에서 백혈구 매매 경로의 별개의 단계에 대한 자세한 그림을 제공합니다. 우리는 ?...

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		<div>
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		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Isoflurane, USP</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Butler Animal Health Supply</td>
<td>029405</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>655nm non-targeted quantum dots</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>Q21021MP</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tetramathylrhodamine conjugated E. coli BioParticles </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>E2862</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Listeria monocytogenes (Lm)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Reference 2</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Quick gel</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Duro</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Puralube Vet Ointment </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Pharmaderm Animal Health</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Insulin syringes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD</td>
<td>08290-3284-38</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Thermo Scirntific</td>
<td>SH30256.02</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

non-invasive imaging of leukocyte homing and migration in vivo

두 광자 (2P) 현미경은 생물학에 의해 광범위하게 적응되어 고해상도 이미징 기술이다. 2P 현미경의 가치는 그대로 조직 내에서 라이브 생쥐의 세포 행동에 관한 풍부한 spatiotemporal 정보를 제공한다는 것입니다. 백혈구 모집 호스트 감염에 대한 방어와시 선택하지에 큰 역할을, 염증 및 면역 질환에 기여하실 수 있습니다. 세포가 빛을 산란 조직 내에 깊이있는 혈관 내에 빠르게 이동되므로 생체내에서 백혈구 채용을 공부하는 것은 기술적으로 도전합니다. 지금까지 대부분의 intravital 영상 연구는 혈관과 조직을 노출 외과 준비가 필요합니다. 수술 자체 유도 조직 손상과 염증을 방지하려면 여기, 우리는 마우스 노상 강도 및 지골에서 백혈구 거래를 연구하는 데 사용할 수있는 비침습 단일 세포 이미징 방법을 설명합니다. 우리는 2P 이미징 준비의 기술적 측면을 논의하고 실행 및 데이터를 수집하도록 설정 초기의 전형적인 실험을 통해 독자를 걸어보세요.

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Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

여기, 우리는 마우스 노상 강도의 백혈구가 추적 연구 비침습 두 개의 광자 (2P) 현미경의 접근 방식을 설명합니다. 우리는 조직 이미징 준비의 기술적 측면을 논의하고 실행 및 데이터를 수집하도록 설정 초기의 전형적인 실험을 통해 독자를 걸어보세요.

백혈구 호밍 및 마이 그 레이션의 비침습 영상 생체내에</em

Two-photon (2P) microscopy is a high resolution imaging technique that has been broadly adapted by biologists.  The value of 2P microscopy is that it ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

Competitive Homing Assays to Study Gut-tropic T Cell Migration

굿 - 트로픽 T 세포의 마이 그 레이션을 공부 경쟁력 호밍 Assays

In order to exert their function lymphocytes need to leave the blood and migrate into different tissues in the body. Lymphocyte adhesion to endothelial ...

연구

면역학 및 감염병학

Imaging Leukocyte Adhesion to the Vascular Endothelium at High Intraluminal Pressure

하이 Intraluminal 압력에서 혈관 내피에 이미징 백혈구의 접착

Worldwide, hypertension is reported to be in approximately a quarter of the population and is the leading biomedical risk factor for mortality worldwide. ...

Non-invasive Imaging of Disseminated Candidiasis in Zebrafish Larvae

Zebrafish 애벌레의 분해해 칸디다 증의 비침습 이미징

Disseminated candidiasis caused by the pathogen Candida albicans is a clinically important problem in hospitalized individuals and is associated with a 30 ...

Non-invasive Optical Imaging of the Lymphatic Vasculature of a Mouse

마우스의 림프 Vasculature의 비 침습적 광학 이미징

The lymphatic  vascular system is an important component of the circulatory system that  maintains fluid homeostasis, provides immune surveillance, and ...

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

Neuropathogenic의 비 침습 모델<em&gt; 대장균</em&gt; 신생아 쥐에 감염

Investigation of the interactions between animal host and bacterial pathogen is only meaningful if the infection model employed replicates the principal ...

Complete Thymectomy in Adult Rats with Non-invasive Endotracheal Intubation

비 침습적 기관 내 삽관 성인 쥐에서 전체 흉선

Thymectomy in neonatal rodents is an established and reliable procedure for immunological studies. However, in adult rats, complications of hemorrhage and ...

Non-invasive Imaging of the Innate Immune Response in a Zebrafish Larval Model of Streptococcus iniae Infection

Non-invasive Imaging of the Innate Immune Response in a Zebrafish Larval Model of Streptococcus iniae Infection

의 Zebrafish의 애벌레 모델의 선천성 면역 반응의 비 침습적 영상<em&gt; 연쇄상 구균 iniae</em&gt; 감염

The aquatic pathogen, Streptococcus iniae, is responsible for over 100 million dollars in annual losses for the aquaculture industry and is capable of ...

Intravital Microscopy of Leukocyte-endothelial and Platelet-leukocyte Interactions in Mesenterial Veins in Mice

마우스의 Mesenterial 혈관에서의 생체 내에 현미경 백혈구 - 내피 세포와 혈소판 - 백혈구 상호 작용

Intravital microscopy is a method that can be used to investigate different processes in different regions and vessels in living animals. In this ...

Imaging CD4 T Cell Interstitial Migration in the Inflamed Dermis

염증이 진피의 이미징 CD4 T 세포 간질 마이그레이션

The ability of CD4 T cells to carry out effector functions is dependent upon the rapid and efficient migration of these cells in inflamed peripheral ...

Non-invasive In Vivo Fluorescence Optical Imaging of Inflammatory MMP Activity Using an Activatable Fluorescent Imaging Agent

Non-invasive In Vivo Fluorescence Optical Imaging of Inflammatory MMP Activity Using an Activatable Fluorescent Imaging Agent

비 침습적<em&gt; In Vivo</em&gt; 활성화 가능한 형광 이미징 에이전트를 사용한 염증성 MMP 활성의 형광 광학 이미징

This paper describes a non-invasive method for imaging matrix metalloproteinases (MMP)-activity by an activatable fluorescent probe, via in vivo ...