Name: xenotransplantation of human stem cells into the chicken embryo
Uploaded: 2010-07-11T19:00:00
Duration: 15 min 42 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Xenotransplantation of Human Stem Cells into the Chicken Embryo at JoVE.com

وأيد العمل من المنح المقدمة من Helse عوج Rehabilitering (JLB) ، ومجلس البحوث النرويجي (GH وحرس السواحل) وجامعة أوسلو (ناغورني كاراباخ وحرس السواحل).

<ol>
	<li>Wichterle, H., Lieberam, I., Porter, J. A., Jessell, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Directed+differentiation+of+embryonic+stem+cells+into+motor+neurons.">Directed differentiation of embryonic stem cells into motor neurons.</a> Cell. 110, 385-397 (2002).</li><li>Sigurjonsson, O. E., Perreault, M. C., Egeland, T., Glover, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adult+human+hematopoietic+stem+cells+produce+neurons+efficiently+in+the+regenerating+chicken+embryo+spinal.">Adult human hematopoietic stem cells produce neurons efficiently in the regenerating chicken embryo spinal.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 102, 5227-5232 (2005).</li><li>Pochampally, R. R., Neville, B. T., Schwarz, E. J., Li, M. M., Prockop, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+adult+stem+cells+(marrow+stromal+cells)+engraft+and+differentiate+in+chick+embryos+without+evidence+of+cell+fusion.">Rat adult stem cells (marrow stromal cells) engraft and differentiate in chick embryos without evidence of cell fusion.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 101, 9282-9285 (2004).</li><li>Goldstein, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+human+embryonic+stem+cells+to+the+chick+embryo.">Transplantation of human embryonic stem cells to the chick embryo.</a> Methods Mol. Biol. 331, 137-151 (2006).</li><li>Lee, H., Shamy, G. A., Elkabetz, Y., Schofield, C. M., Harrsion, N. L., Panagiotakos, G., Socci, N. D., Tabar, V., Studer, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Directed+differentiation+and+transplantation+of+human+embryonic+stem+cell-derived+motoneurons.">Directed differentiation and transplantation of human embryonic stem cell-derived motoneurons.</a> Stem Cells. 25, 1931-1939 (2007).</li><li>Wichterle, H., Peljto, M., Nedelec, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenotransplantation+of+embryonic+stem+cell-derived+motor+neurons+into+the+developing+chick+spinal+cord.">Xenotransplantation of embryonic stem cell-derived motor neurons into the developing chick spinal cord.</a> Methods Mol. Biol. 482, 171-183 (2009).</li><li>Westerlund, U., Svensson, M., Moe, M. C., Varghese, M., Gustavsson, B., Wallstedt, L., Berg-Johnsen, J., Langmoen, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endoscopically+harvested+stem+cells:+a+putative+method+in+future+autotransplantation.">Endoscopically harvested stem cells: a putative method in future autotransplantation.</a> Neurosurgery. 57, 779-784 (2005).</li><li>Boquest, A. C., Shahdadfar, A., Brinchmann, J. E., Collas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+stromal+stem+cells+from+human+adipose+tissue.">Isolation of stromal stem cells from human adipose tissue.</a> Methods Mol. Biol. 325, 35-46 (2006).</li><li>Smeland, E. B., Funderud, S., Kvalheim, G., Gaudernack, G., Rasmussen, A. M., Rusten, L., Wang, M. Y., Tindle, R. W., Blomhoff, H. K., Egeland, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+human+hematopoietic+progenitor+cells:+an+effective+method+for+positive+selection+of+CD34++cells.">Isolation and characterization of human hematopoietic progenitor cells: an effective method for positive selection of CD34+ cells.</a> Leukemia. 6, 845-852 (1992).</li><li>Zhang, X. Y., La Russa, V. F., Bao, L., Kolls, J., Schwarzenberger, P., Reiser, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lentiviral+vectors+for+sustained+transgene+expression+in+human+bone+marrow-derived+stromal+cells.">Lentiviral vectors for sustained transgene expression in human bone marrow-derived stromal cells.</a> Mol. Ther. 5, 555-565 (2002).</li><li>Hamburger, V., Hamilton, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+series+of+normal+stages+in+the+development+of+the+chick+embryo.">A series of normal stages in the development of the chick embryo.</a> J. Morph. 88 (1), 44-92 (1951).</li><li>Glover, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retrograde+and+anterograde+axonal+tracing+with+fluorescent+dextrans+in+the+embryonic+nervous+system.">Retrograde and anterograde axonal tracing with fluorescent dextrans in the embryonic nervous system.</a> Neuroscience Protocols. 30, 1-13 (1995).</li><li>O'Donovan, M. J., Bonnot, A., Mentis, G. Z., Arai, Y., Chub, N., Shneider, N. A., Wenner, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+the+spatiotemporal+organization+of+neural+activity+in+the+developing+spinal.">Imaging the spatiotemporal organization of neural activity in the developing spinal.</a> Dev. Neurobiol. 68, 788-803 (2008).</li><li>Mendelson, B., Frank, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Specific+monosynaptic+sensory-motor+connections+form+in+the+absence+of+patterned+neural+activity+and+motoneuronal+cell+death.">Specific monosynaptic sensory-motor connections form in the absence of patterned neural activity and motoneuronal cell death.</a> J. Neurosci. 11, 1390-1403 (1991).</li><li>Glover, J. C., Boulland, J. L., Halasi, G., Kasumacic, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chimeric+Animal+Models+in+Human+Stem+Cell+Biology.">Chimeric Animal Models in Human Stem Cell Biology.</a> ILAR Journal. 51, 62-73 (2009).</li><li>Lee, G., Kim, H., Elkabetz, Y., Al Shamy, G., Panagiotakos, G., Barberi, T., Tabar, V., Studer, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+directed+differentiation+of+neural+crest+stem+cells+derived+from+human+embryonic+stem+cells.">Isolation and directed differentiation of neural crest stem cells derived from human embryonic stem cells.</a> Nat. Biotechnol. 25, 1468-1475 (2007).</li><li>Jiang, X., Gwye, Y., McKeown, S. J., Bronner-Fraser, M., Lutzko, C., Lawlor, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+neural+crest+cells+derived+from+in+vitro+differentiated+human+embryonic+stem+cells.">Isolation and characterization of neural crest cells derived from in vitro differentiated human embryonic stem cells.</a> Stem Cells Dev. 18, 1059-1070 (2008).</li></ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

الجنين الدجاج هو نموذج حيواني مريحة وتنوعا للتجارب زرع الأعضاء. عدم وجود نظام المناعة وظيفية أثناء التطور الجنيني والجنين يسمح للبقاء وتنمية الخلايا من أي نوع من الأنواع التي تتحمل درجة حرارة الحضانة. وقد استخدمت أجنة الدجاج لاختبار إمكانات التجدد لأنواع مختلفة من الخلايا الجذعية (إعادة النظر في المرجع 15). الخلايا الجذعية الثدييات يمكن أن تدمج في أنسجة الجنين الدجاج بما في ذلك النظام العصبي المركزي ، حيث يمكن أن تؤدي إلى الخلايا العصبية التي محواري التوقعات ، يمكن تقييم اتصال متشابك والخصائص الكهربية في سياق وظيفي 1،2 الدارات العصبية. لأن العمليات الجراحية سهلة نسبيا ، ويتم إجراء الحقن تحت البصرية بدلا من السيطرة التجسيمي ، يمكن بسهولة أن عدد الأجنة يمكن زيادة لاستيعاب ظروف تجريبية مختلفة في تجربة واحدة. يمكن عادة يتم حقن الخلايا في الأجنة 20-30 ضمن التجربة 4 ساعة. وفيات بعد حقن الأجنة هو العامل الرئيسي الحد. يجب اتخاذ الاحتياطات اللازمة لتجنب النزف والجفاف. أن ندرك أن هناك بعض مراحل تطور حاسم في معدل وفيات الأطفال الذي يزيد الطبيعية. المكمل للجنين مع عدد قليل من مل الدافئة ، حقن معقمة الدجاج المسابقة التالية وقبل يوم واحد مراحل النمو الحرجة ، فضلا عن ضمان أن نافذة في البيض جيدا مختومة وموجهة لتفادي تسرب ، ويحسن البقاء على قيد الحياة. إذا كان التسرب من خلال ختم الشريط يجب أن تحدث ، وإزالة الشريط ، تجفيف الأسطح وإعادة الشريط. بعض المحققين استخدام الشمع والزجاج أو البلاستيك coverslips لاغلاق النافذة. يجب أن معدل وفيات لن تكون مختلفة كثيرا في حقن مقابل الشام التي تديرها الأجنة. على الرغم من أننا قد ركزت هنا على حقن الخلايا الجذعية البشرية في بدأة من الدماغ والحبل الشوكي ، ويمكن أيضا أن حقن الخلايا الجذعية في بدأة الأجهزة الأخرى (انظر على سبيل المثال المرجع 4). كل جهاز يطرح تحديات خاصة بها. على سبيل المثال ، يمكن حقنها في القلب يمكن أن يكون تحديا بسبب مقاومة ميكانيكية عالية على الاختراق وماصة بسبب الحركات ، والتي من ناحية أخرى يمكن أن تباطأ عن طريق التبريد الأجنة في درجة حرارة الغرفة قبل الحقن. ويجوز للأجهزة التي تفتقر إلى التجويف لا تستوعب كميات كافية من الحقن ، ويمكن بالتالي تتطلب آفة الجراحية لخلق وعاء. في تجربتنا ، بعد تجديد أنسجة الآفة هي ميزة لأنها تشجع على التكامل من الخلايا الجذعية البشرية في الأنسجة. ويمكن أيضا أن تكون خلايا اللحمة المتوسطة حقنها الجنينية مثل اللحمة المتوسطة في somitic تفريق أو العرف المهاجرة العصبية باعتبارها وسيلة لتحقيق إدماج المشتقات الوسيطة ، بما في ذلك قمة العقد العصبية المشتقة المحيطية 16،17.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Fluorescent microscope</td>
<td>Microscope</td>
<td>Olympus IX-81</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Stereo Investigator</td>
<td>Program</td>
<td>MicroBrightField</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>MIP-GFP mice</td>
<td>Mice</td>
<td>Jackson Laboratory</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Mathematica</td>
<td>Program</td>
<td>Wolfram</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Image J</td>
<td>Program</td>
<td>NIH</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Slidebook</td>
<td>Program</td>
<td>Olympus</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

xenotransplantation of human stem cells into the chicken embryo

الجنين الدجاج هو نموذج حيواني الكلاسيكية لدراسة التطور الجنيني الطبيعي والجنين واجراء تجارب زرع الأعضاء لدراسة سلوك الخلايا في موحد<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; البيئة. المزايا الرئيسية للجنين الدجاج تشمل التكلفة المنخفضة ، وسهولة الوصول عالية ، وسهولة التلاعب الجراحية وعدم وجود نظام المناعة تطويره بالكامل. يمكن زرع الأعضاء في أجنة الدجاج تقديم معلومات قيمة حول تكاثر الخلايا ، والتمايز والسلوك ، والاستجابات من الخلايا لإشارات محددة في الأنسجة الجنينية محاريب ، ومكون للأورام محتملة. ويمكن زرع الخلايا في أجنة الدجاج أيضا أن يكون خطوة نحو تجارب زرع في النماذج الحيوانية الأخرى. وقد تم مؤخرا استخدام الأجنة الدجاج لتقييم إمكانات عصبية من الخلايا الجذعية البشرية والسلف بعد زرع في بدأة العصبية<sup&gt; 1-6</sup&gt;. نحن في هذا الفيديو توثيق الإجراء بأكمله لزرع الخلايا الجذعية البشرية في النظام العصبي المركزي النامية الجنين الدجاج. الإجراء تبدأ حضانة البيض المخصب حتى الأجنة في العصر المرجوة التي وضعتها. ثم يتم فتح قشر البيض ، ويتناقض الجنين عن طريق حقن صبغة بين الجنين وصفار البيض و. آفات صغيرة مصنوعة في الأنبوب العصبي باستخدام الجراحة المجهرية ، وخلق موقع على التجدد لترسب الخلايا التي تعزز التكامل اللاحقة في النسيج المضيف. نظهر حقن الخلايا الجذعية البشرية في مثل هذه الآفات التي أدلي بها في جزء من الأنبوب العصبي الذي يشكل الدماغ المؤخر والنخاع الشوكي ، وداخل تجويف الجزء من الأنبوب العصبية التي تشكل المخ. وتتجلى أيضا في حقن الأوردة الجهازية خارج الجنين والشرايين وسيلة بديلة لتقديم خلايا الأنسجة أوعية دموية بما في ذلك النظام العصبي المركزي. أخيرا نبين كيفية إزالة الجنين من بويضة بعد عدة أيام لمزيد من التطوير وكيفية تشريح النخاع الشوكي مجانا لاحقة تحليلات الفسيولوجية والنسيجية أو البيوكيميائية.

Watch this Scientific Journal Video about Xenotransplantation of Human Stem Cells into the Chicken Embryo at JoVE.com

Xenotransplantation of Human Stem Cells into the Chicken Embryo

في هذه الورقة نقدم طريقة لزرع الخلايا الجذعية البشرية في مناطق مختلفة من الجهاز العصبي المركزي للجنين الدجاج. هذا يوفر<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; نموذج لتقييم انتشار والتفريق بين أنواع مختلفة من الخلايا الجذعية البشرية في بيئات الأنسجة الجنينية.

زرع الأعضاء من الخلايا الجذعية البشرية إلى الأجنة الدجاج

The chicken embryo is a classical animal model for studying normal embryonic and fetal development and for xenotransplantation experiments to study the ...

Research

JoVE Journal

Biology

Transfecting Human Neural Stem Cells with the Amaxa Nucleofector

Transfecting الإنسان الخلايا الجذعية العصبية مع Nucleofector Amaxa

Transfection of primary mammalian neural cells, such as human neural stem/precursor cells (hNSPCs), with commonly used cationic lipid transfection ...

Counting Human Neural Stem Cells

عد الخلايا الجذعية العصبية البشرية

Knowledge of the exact number of viable cells in a given volume of a cell suspension is required for many routine tissue culture manipulations, such as ...

Passaging Human Neural Stem Cells

الركض الخلايا الجذعية العصبية البشرية

The ability to manipulate human neural stem/precursor cells (hNSPCs) in vitro provides a means to investigate their utility as cell transplants for ...

Immunocytochemistry: Human Neural Stem Cells

كيمياء سيتولوجية مناعية : الخلايا الجذعية العصبية البشرية

Immunocytochemistry is a very powerful and fairly straightforward method for determining the presence, subcellular localization, and relative abundance of ...

In Ovo Electroporations of HH Stage 10 Chicken Embryos

Electroporations OVO في مرحلة الجنين سمو الدجاج 10

Large size and external development of the chicken embryo have long made it a valuable tool in the study of developmental biology.  With the advent of ...

Differentiation of Embryonic Stem Cells into Oligodendrocyte Precursors

تمايز الخلايا الجذعية الجنينية في السلائف Oligodendrocyte

Oligodendrocytes are the myelinating cells of the central nervous system. For regenerative cell therapy in demyelinating diseases, there is significant ...

Lentiviral-mediated Knockdown During Ex Vivo Erythropoiesis of Human Hematopoietic Stem Cells

Lentiviral-mediated Knockdown During Ex Vivo Erythropoiesis of Human Hematopoietic Stem Cells

Lentiviral بوساطة خلال ضربة قاضية السابقين فيفو تكون الكريات الحمر في الإنسان خلايا الجذعية المكونة للدم

Erythropoiesis is a commonly used model system to study cell differentiation. During erythropoiesis, pluripotent adult human hematopoietic stem cells ...

Reprogramming Human Somatic Cells into Induced Pluripotent Stem Cells (iPSCs) Using Retroviral Vector with GFP

Reprogramming Human Somatic Cells into Induced Pluripotent Stem Cells iPSCs Using Retroviral Vector with GFP

إعادة برمجة الخلايا الجسدية البشرية المستحثة إلى الخلايا الجذعية المحفزة (iPSCs) استخدام ناقلات فيروسات الرجعية مع GFP

Human embryonic stem cells (hESCs) are pluripotent and an invaluable cellular sources for in vitro disease modeling and regenerative medicine1. It has ...

Differentiation of Newborn Mouse Skin Derived Stem Cells into Germ-like Cells In vitro

Differentiation of Newborn Mouse Skin Derived Stem Cells into Germ-like Cells In vitro

التفريق بين الأطفال حديثي الولادة ماوس خلايا الجلد الجذعية المشتقة في مثل جرثومة خلايا<em&gt; في المختبر</em

Studying  germ cell formation and differentiation has traditionally been very difficult  due to low cell numbers and their location deep within developing ...

Generation of Transgenic Hydra by Embryo Microinjection

Generation of Transgenic Hydra by Embryo Microinjection

جيل المعدلة وراثيا<em&gt; حيدرة</em&gt; من جانب الأجنة حقن مكروي

As a member of the phylum Cnidaria, the sister group to all bilaterians, Hydra can shed light on fundamental biological processes shared among ...