Name: xenotransplantation of human stem cells into the chicken embryo
Uploaded: 2010-07-11T19:00:00
Duration: 15 min 42 s
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काम Helse ओग (JLB) Rehabilitering, नार्वे अनुसंधान परिषद (GH और JCG) और ओस्लो विश्वविद्यालय (एन.के. और JCG) से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था.

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	<li>Wichterle, H., Lieberam, I., Porter, J. A., Jessell, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Directed+differentiation+of+embryonic+stem+cells+into+motor+neurons.">Directed differentiation of embryonic stem cells into motor neurons.</a> Cell. 110, 385-397 (2002).</li><li>Sigurjonsson, O. E., Perreault, M. C., Egeland, T., Glover, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adult+human+hematopoietic+stem+cells+produce+neurons+efficiently+in+the+regenerating+chicken+embryo+spinal.">Adult human hematopoietic stem cells produce neurons efficiently in the regenerating chicken embryo spinal.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 102, 5227-5232 (2005).</li><li>Pochampally, R. R., Neville, B. T., Schwarz, E. J., Li, M. M., Prockop, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+adult+stem+cells+(marrow+stromal+cells)+engraft+and+differentiate+in+chick+embryos+without+evidence+of+cell+fusion.">Rat adult stem cells (marrow stromal cells) engraft and differentiate in chick embryos without evidence of cell fusion.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 101, 9282-9285 (2004).</li><li>Goldstein, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+human+embryonic+stem+cells+to+the+chick+embryo.">Transplantation of human embryonic stem cells to the chick embryo.</a> Methods Mol. Biol. 331, 137-151 (2006).</li><li>Lee, H., Shamy, G. A., Elkabetz, Y., Schofield, C. M., Harrsion, N. L., Panagiotakos, G., Socci, N. D., Tabar, V., Studer, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Directed+differentiation+and+transplantation+of+human+embryonic+stem+cell-derived+motoneurons.">Directed differentiation and transplantation of human embryonic stem cell-derived motoneurons.</a> Stem Cells. 25, 1931-1939 (2007).</li><li>Wichterle, H., Peljto, M., Nedelec, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenotransplantation+of+embryonic+stem+cell-derived+motor+neurons+into+the+developing+chick+spinal+cord.">Xenotransplantation of embryonic stem cell-derived motor neurons into the developing chick spinal cord.</a> Methods Mol. Biol. 482, 171-183 (2009).</li><li>Westerlund, U., Svensson, M., Moe, M. C., Varghese, M., Gustavsson, B., Wallstedt, L., Berg-Johnsen, J., Langmoen, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endoscopically+harvested+stem+cells:+a+putative+method+in+future+autotransplantation.">Endoscopically harvested stem cells: a putative method in future autotransplantation.</a> Neurosurgery. 57, 779-784 (2005).</li><li>Boquest, A. C., Shahdadfar, A., Brinchmann, J. E., Collas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+stromal+stem+cells+from+human+adipose+tissue.">Isolation of stromal stem cells from human adipose tissue.</a> Methods Mol. Biol. 325, 35-46 (2006).</li><li>Smeland, E. B., Funderud, S., Kvalheim, G., Gaudernack, G., Rasmussen, A. M., Rusten, L., Wang, M. Y., Tindle, R. W., Blomhoff, H. K., Egeland, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+human+hematopoietic+progenitor+cells:+an+effective+method+for+positive+selection+of+CD34++cells.">Isolation and characterization of human hematopoietic progenitor cells: an effective method for positive selection of CD34+ cells.</a> Leukemia. 6, 845-852 (1992).</li><li>Zhang, X. Y., La Russa, V. F., Bao, L., Kolls, J., Schwarzenberger, P., Reiser, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lentiviral+vectors+for+sustained+transgene+expression+in+human+bone+marrow-derived+stromal+cells.">Lentiviral vectors for sustained transgene expression in human bone marrow-derived stromal cells.</a> Mol. Ther. 5, 555-565 (2002).</li><li>Hamburger, V., Hamilton, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+series+of+normal+stages+in+the+development+of+the+chick+embryo.">A series of normal stages in the development of the chick embryo.</a> J. Morph. 88 (1), 44-92 (1951).</li><li>Glover, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retrograde+and+anterograde+axonal+tracing+with+fluorescent+dextrans+in+the+embryonic+nervous+system.">Retrograde and anterograde axonal tracing with fluorescent dextrans in the embryonic nervous system.</a> Neuroscience Protocols. 30, 1-13 (1995).</li><li>O'Donovan, M. J., Bonnot, A., Mentis, G. Z., Arai, Y., Chub, N., Shneider, N. A., Wenner, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+the+spatiotemporal+organization+of+neural+activity+in+the+developing+spinal.">Imaging the spatiotemporal organization of neural activity in the developing spinal.</a> Dev. Neurobiol. 68, 788-803 (2008).</li><li>Mendelson, B., Frank, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Specific+monosynaptic+sensory-motor+connections+form+in+the+absence+of+patterned+neural+activity+and+motoneuronal+cell+death.">Specific monosynaptic sensory-motor connections form in the absence of patterned neural activity and motoneuronal cell death.</a> J. Neurosci. 11, 1390-1403 (1991).</li><li>Glover, J. C., Boulland, J. L., Halasi, G., Kasumacic, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chimeric+Animal+Models+in+Human+Stem+Cell+Biology.">Chimeric Animal Models in Human Stem Cell Biology.</a> ILAR Journal. 51, 62-73 (2009).</li><li>Lee, G., Kim, H., Elkabetz, Y., Al Shamy, G., Panagiotakos, G., Barberi, T., Tabar, V., Studer, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+directed+differentiation+of+neural+crest+stem+cells+derived+from+human+embryonic+stem+cells.">Isolation and directed differentiation of neural crest stem cells derived from human embryonic stem cells.</a> Nat. Biotechnol. 25, 1468-1475 (2007).</li><li>Jiang, X., Gwye, Y., McKeown, S. J., Bronner-Fraser, M., Lutzko, C., Lawlor, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+neural+crest+cells+derived+from+in+vitro+differentiated+human+embryonic+stem+cells.">Isolation and characterization of neural crest cells derived from in vitro differentiated human embryonic stem cells.</a> Stem Cells Dev. 18, 1059-1070 (2008).</li></ol>

ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.

चिकन भ्रूण xenotransplantation प्रयोगों के लिए एक सुविधाजनक और बहुमुखी पशु मॉडल है. भ्रूण और भ्रूण के विकास के दौरान एक कार्यात्मक प्रतिरक्षा प्रणाली की कमी है और किसी भी प्रजाति है कि ऊष्मायन तापमान बर्दाश्त से कोशिकाओं के अस्तित्व और विकास परमिट. चिकन भ्रूण स्टेम कोशिकाओं (रेफरी में समीक्षा 15.) के विभिन्न प्रकार के पुनर्योजी क्षमता का परीक्षण करने के लिए इस्तेमाल किया गया है. स्तनधारी स्टेम कोशिकाओं को केंद्रीय तंत्रिका तंत्र, जहां वे न्यूरॉन्स जिसका axonal अनुमानों को जन्म दे सकते हैं सहित चिकन भ्रूण के ऊतकों में एकीकृत कर सकते हैं, synaptic कनेक्टिविटी और electrophysiological गुण कार्यात्मक तंत्रिका सर्किट 1,2 के संदर्भ में मूल्यांकन किया जा सकता है. क्योंकि शल्यचिकित्सा की प्रक्रियाओं अपेक्षाकृत आसान है, और इंजेक्शन दृश्य अधीन किए गए हैं stereotaxic नियंत्रण के बजाय, भ्रूण की संख्या आसानी से एक ही प्रयोग के भीतर विभिन्न प्रयोगात्मक शर्तों को समायोजित वृद्धि हुई किया जा सकता है. आमतौर पर कोशिकाओं को एक 4 घंटे प्रयोग के भीतर 20-30 भ्रूण में इंजेक्ट किया जा सकता है है. भ्रूण की मृत्यु के बाद इंजेक्शन के प्रमुख सीमित कारक है. ख़ून का बहाव और निर्जलीकरण से बचने के सावधानियों लिया जाना चाहिए. पता है कि वहाँ पर जो कुछ प्राकृतिक मृत्यु दर बढ़ जाती है महत्वपूर्ण विकास के चरणों रहे हैं. गर्म, निष्फल चिकन घंटी निम्नलिखित इंजेक्शन और महत्वपूर्ण विकास के चरणों से पहले दिन के कुछ एमएल के साथ भ्रूण सप्लीमेंट, के रूप में के रूप में अच्छी तरह से सुनिश्चित करना है कि अंडे में खिड़की के रिसाव से बचने अच्छी तरह से सील और उन्मुख है, अस्तित्व में सुधार. यदि टेप सील के माध्यम से रिसाव हो जाना चाहिए, टेप को निकालने के लिए, सूखी सतहों और फिर टेप. कुछ जांचकर्ताओं मोम और कांच या प्लास्टिक coverslips का उपयोग करने के लिए खिड़की मुहर. मृत्यु दर काफी दिखावा संचालित भ्रूण बनाम इंजेक्शन में अलग नहीं होना चाहिए. हालांकि हम यहाँ मस्तिष्क और रीढ़ की हड्डी के anlage में मानव स्टेम सेल का इंजेक्शन पर ध्यान केंद्रित किया है, स्टेम कोशिकाओं को भी अन्य अंगों की anlage (उदाहरण रेफरी को देखने के लिए 4.) में इंजेक्शन जा सकता है. प्रत्येक अंग की अपनी चुनौतियों poses. उदाहरण के लिए, दिल में इंजेक्शन उच्च यांत्रिक प्रतिरोध करने के लिए पैठ विंदुक के कारण और क्योंकि आंदोलनों, जो दूसरे हाथ पर इंजेक्शन के लिए पहले कमरे के तापमान के लिए भ्रूण ठंडा करके धीमा किया जा सकता है चुनौतीपूर्ण हो सकता है है. अंग है कि एक लुमेन कमी पर्याप्त मात्रा के इंजेक्शन को समायोजित नहीं है और इसलिए शल्य चिकित्सा घाव के लिए एक गोदाम बनाने की आवश्यकता हो सकती है हो सकता है. हमारे अनुभव में, के बाद घाव ऊतक पुनर्जनन एक फायदा है क्योंकि यह ऊतक में मानव स्टेम कोशिकाओं के एकीकरण को बढ़ावा देता है. कक्ष भी dispersing somitic mesenchyme या तंत्रिका शिखा व्युत्पन्न परिधीय ganglia 16,17 सहित mesenchymal डेरिवेटिव, में शामिल प्राप्त करने के तरीके के रूप में पलायन तंत्रिका शिखा जैसे भ्रूण mesenchyme में इंजेक्शन जा सकता है.

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		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
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		<tbody>
		
<tr>
<td>Fluorescent microscope</td>
<td>Microscope</td>
<td>Olympus IX-81</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Stereo Investigator</td>
<td>Program</td>
<td>MicroBrightField</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>MIP-GFP mice</td>
<td>Mice</td>
<td>Jackson Laboratory</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Mathematica</td>
<td>Program</td>
<td>Wolfram</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Image J</td>
<td>Program</td>
<td>NIH</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Slidebook</td>
<td>Program</td>
<td>Olympus</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

xenotransplantation of human stem cells into the chicken embryo

चिकन भ्रूण सामान्य भ्रूण और भ्रूण के विकास के अध्ययन के लिए और xenotransplantation प्रयोगों के लिए एक शास्त्रीय पशु मॉडल के लिए एक मानकीकृत में कोशिकाओं के व्यवहार का अध्ययन है<em&gt; Vivo में</em&gt; पर्यावरण. चिकन भ्रूण के मुख्य लाभ कम लागत, उच्च पहुंच, शल्य चिकित्सा में गड़बड़ी की आसानी और एक पूरी तरह से विकसित प्रतिरक्षा प्रणाली की कमी शामिल हैं. चिकन भ्रूण में Xenotransplantation सेल प्रसार, भेदभाव और व्यवहार, परिभाषित भ्रूण ऊतक niches में संकेत करने के लिए कोशिकाओं की प्रतिक्रियाओं, और tumorigenic क्षमता के बारे में बहुमूल्य जानकारी प्रदान कर सकते हैं. चिकन भ्रूण कोशिकाओं में रोपाई भी अन्य पशु मॉडल में प्रत्यारोपण के प्रयोगों की दिशा में एक कदम हो सकता है. हाल ही में चिकन भ्रूण तंत्रिका anlage में आरोपण के बाद मानव स्टेम और पूर्वपुस्र्ष कोशिकाओं की तंत्रिकाजन्य क्षमता का मूल्यांकन इस्तेमाल किया गया है<sup1-6&gt;</sup&gt;. इस वीडियो में हम विकासशील चिकन भ्रूण के केंद्रीय तंत्रिका तंत्र में मानव स्टेम सेल प्रत्यारोपण के लिए पूरी प्रक्रिया का दस्तावेज़. निषेचित अंडे की ऊष्मायन प्रक्रिया के साथ शुरू होता है जब तक वांछित उम्र के भ्रूण को विकसित किया है. eggshell खोला है, तो है और भ्रूण भ्रूण और जर्दी बीच डाई के इंजेक्शन लगाने के द्वारा विपरीत. छोटे घावों न्यूरल ट्यूब का उपयोग microsurgery में बना रहे हैं, सेल बयान है कि मेजबान ऊतक में बाद के एकीकरण को बढ़ावा देता है के लिए एक पुनर्योजी साइट बनाने. हम न्यूरल ट्यूब है कि hindbrain और रीढ़ की हड्डी रूपों, और न्यूरल ट्यूब है कि मस्तिष्क रूपों के भाग के लुमेन में के भाग में बने ऐसे घावों में मानव स्टेम कोशिकाओं के इंजेक्शन प्रदर्शित करता है. Extraembryonic नसों और धमनियों में प्रणालीगत इंजेक्शन भी केंद्रीय तंत्रिका तंत्र सहित vascularized ऊतकों कोशिकाओं को देने के लिए एक वैकल्पिक रास्ते के रूप में प्रदर्शन कर रहे हैं. अंत में हम बताएंगे कि कैसे अंडे से भ्रूण को हटाने के लिए और आगे विकास के कई दिनों के बाद कैसे बाद शारीरिक histological, या जैव रासायनिक विश्लेषण के लिए रीढ़ की हड्डी की हड्डी मुक्त टुकड़े करना करने के लिए.

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Xenotransplantation of Human Stem Cells into the Chicken Embryo

इस पत्र में हम चिकन भ्रूण के केंद्रीय तंत्रिका तंत्र के विभिन्न क्षेत्रों में मानव स्टेम सेल के प्रत्यारोपण के लिए एक विधि प्रस्तुत करते हैं. यह एक प्रदान करता है<em&gt; Vivo में</em&gt; प्रसार और भ्रूण ऊतक के वातावरण में मानव स्टेम कोशिकाओं के विभिन्न प्रकार के भेदभाव का आकलन करने के लिए मॉडल.

मानव स्टेम सेल का चिकन भ्रूण में Xenotransplantation

The chicken embryo is a classical animal model for studying normal embryonic and fetal development and for xenotransplantation experiments to study the ...

Research

JoVE Journal

Biology

Transfecting Human Neural Stem Cells with the Amaxa Nucleofector

Amaxa Nucleofector के साथ मानव तंत्रिका स्टेम सेल Transfecting

Transfection of primary mammalian neural cells, such as human neural stem/precursor cells (hNSPCs), with commonly used cationic lipid transfection ...

Counting Human Neural Stem Cells

मानव तंत्रिका स्टेम सेल की गिनती

Knowledge of the exact number of viable cells in a given volume of a cell suspension is required for many routine tissue culture manipulations, such as ...

Passaging Human Neural Stem Cells

मानव तंत्रिका स्टेम कोशिकाओं passaging

The ability to manipulate human neural stem/precursor cells (hNSPCs) in vitro provides a means to investigate their utility as cell transplants for ...

Immunocytochemistry: Human Neural Stem Cells

Immunocytochemistry: मानव तंत्रिका स्टेम सेल

Immunocytochemistry is a very powerful and fairly straightforward method for determining the presence, subcellular localization, and relative abundance of ...

In Ovo Electroporations of HH Stage 10 Chicken Embryos

एचएच स्टेज 10 चिकन भ्रूण के ओवो Electroporations में

Large size and external development of the chicken embryo have long made it a valuable tool in the study of developmental biology.  With the advent of ...

Differentiation of Embryonic Stem Cells into Oligodendrocyte Precursors

भ्रूण स्टेम कोशिकाओं के Oligodendrocyte व्यापारियों में भेदभाव

Oligodendrocytes are the myelinating cells of the central nervous system. For regenerative cell therapy in demyelinating diseases, there is significant ...

Lentiviral-mediated Knockdown During Ex Vivo Erythropoiesis of Human Hematopoietic Stem Cells

Lentiviral-mediated Knockdown During Ex Vivo Erythropoiesis of Human Hematopoietic Stem Cells

Lentiviral - मध्यस्थता नॉकडाउन के दौरान पूर्व vivo</emमानव hematopoietic स्टेम सेल के> erythropoiesis

Erythropoiesis is a commonly used model system to study cell differentiation. During erythropoiesis, pluripotent adult human hematopoietic stem cells ...

Reprogramming Human Somatic Cells into Induced Pluripotent Stem Cells (iPSCs) Using Retroviral Vector with GFP

Reprogramming Human Somatic Cells into Induced Pluripotent Stem Cells iPSCs Using Retroviral Vector with GFP

मानव प्रेरित pluripotent स्टेम सेल (IPSCs) GFP साथ रेट्रोवायरल वैक्टर का उपयोग में दैहिक कोशिकाओं reprogramming

Human embryonic stem cells (hESCs) are pluripotent and an invaluable cellular sources for in vitro disease modeling and regenerative medicine1. It has ...

Differentiation of Newborn Mouse Skin Derived Stem Cells into Germ-like Cells In vitro

Differentiation of Newborn Mouse Skin Derived Stem Cells into Germ-like Cells In vitro

रोगाणु की तरह कोशिकाओं में नवजात माउस त्वचा प्राप्त स्टेम कोशिकाओं के भेदभाव<em&gt; इन विट्रो में</em

Studying  germ cell formation and differentiation has traditionally been very difficult  due to low cell numbers and their location deep within developing ...

Generation of Transgenic Hydra by Embryo Microinjection

Generation of Transgenic Hydra by Embryo Microinjection

ट्रांसजेनिक का सृजन<em&gt; हाइड्रा</em&gt; भ्रूण Microinjection द्वारा

As a member of the phylum Cnidaria, the sister group to all bilaterians, Hydra can shed light on fundamental biological processes shared among ...