Name: xenotransplantation of human stem cells into the chicken embryo
Uploaded: 2010-07-11T19:00:00
Duration: 15 min 42 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Xenotransplantation of Human Stem Cells into the Chicken Embryo at JoVE.com

Работа выполнена при поддержке грантов от HELSE ог Rehabilitering (JLB), Норвежский исследовательский совет (GH и СКГ) и Университета Осло (НК и СКГ).

<ol>
	<li>Wichterle, H., Lieberam, I., Porter, J. A., Jessell, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Directed+differentiation+of+embryonic+stem+cells+into+motor+neurons.">Directed differentiation of embryonic stem cells into motor neurons.</a> Cell. 110, 385-397 (2002).</li><li>Sigurjonsson, O. E., Perreault, M. C., Egeland, T., Glover, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adult+human+hematopoietic+stem+cells+produce+neurons+efficiently+in+the+regenerating+chicken+embryo+spinal.">Adult human hematopoietic stem cells produce neurons efficiently in the regenerating chicken embryo spinal.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 102, 5227-5232 (2005).</li><li>Pochampally, R. R., Neville, B. T., Schwarz, E. J., Li, M. M., Prockop, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+adult+stem+cells+(marrow+stromal+cells)+engraft+and+differentiate+in+chick+embryos+without+evidence+of+cell+fusion.">Rat adult stem cells (marrow stromal cells) engraft and differentiate in chick embryos without evidence of cell fusion.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 101, 9282-9285 (2004).</li><li>Goldstein, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+human+embryonic+stem+cells+to+the+chick+embryo.">Transplantation of human embryonic stem cells to the chick embryo.</a> Methods Mol. Biol. 331, 137-151 (2006).</li><li>Lee, H., Shamy, G. A., Elkabetz, Y., Schofield, C. M., Harrsion, N. L., Panagiotakos, G., Socci, N. D., Tabar, V., Studer, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Directed+differentiation+and+transplantation+of+human+embryonic+stem+cell-derived+motoneurons.">Directed differentiation and transplantation of human embryonic stem cell-derived motoneurons.</a> Stem Cells. 25, 1931-1939 (2007).</li><li>Wichterle, H., Peljto, M., Nedelec, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenotransplantation+of+embryonic+stem+cell-derived+motor+neurons+into+the+developing+chick+spinal+cord.">Xenotransplantation of embryonic stem cell-derived motor neurons into the developing chick spinal cord.</a> Methods Mol. Biol. 482, 171-183 (2009).</li><li>Westerlund, U., Svensson, M., Moe, M. C., Varghese, M., Gustavsson, B., Wallstedt, L., Berg-Johnsen, J., Langmoen, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endoscopically+harvested+stem+cells:+a+putative+method+in+future+autotransplantation.">Endoscopically harvested stem cells: a putative method in future autotransplantation.</a> Neurosurgery. 57, 779-784 (2005).</li><li>Boquest, A. C., Shahdadfar, A., Brinchmann, J. E., Collas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+stromal+stem+cells+from+human+adipose+tissue.">Isolation of stromal stem cells from human adipose tissue.</a> Methods Mol. Biol. 325, 35-46 (2006).</li><li>Smeland, E. B., Funderud, S., Kvalheim, G., Gaudernack, G., Rasmussen, A. M., Rusten, L., Wang, M. Y., Tindle, R. W., Blomhoff, H. K., Egeland, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+human+hematopoietic+progenitor+cells:+an+effective+method+for+positive+selection+of+CD34++cells.">Isolation and characterization of human hematopoietic progenitor cells: an effective method for positive selection of CD34+ cells.</a> Leukemia. 6, 845-852 (1992).</li><li>Zhang, X. Y., La Russa, V. F., Bao, L., Kolls, J., Schwarzenberger, P., Reiser, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lentiviral+vectors+for+sustained+transgene+expression+in+human+bone+marrow-derived+stromal+cells.">Lentiviral vectors for sustained transgene expression in human bone marrow-derived stromal cells.</a> Mol. Ther. 5, 555-565 (2002).</li><li>Hamburger, V., Hamilton, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+series+of+normal+stages+in+the+development+of+the+chick+embryo.">A series of normal stages in the development of the chick embryo.</a> J. Morph. 88 (1), 44-92 (1951).</li><li>Glover, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retrograde+and+anterograde+axonal+tracing+with+fluorescent+dextrans+in+the+embryonic+nervous+system.">Retrograde and anterograde axonal tracing with fluorescent dextrans in the embryonic nervous system.</a> Neuroscience Protocols. 30, 1-13 (1995).</li><li>O'Donovan, M. J., Bonnot, A., Mentis, G. Z., Arai, Y., Chub, N., Shneider, N. A., Wenner, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+the+spatiotemporal+organization+of+neural+activity+in+the+developing+spinal.">Imaging the spatiotemporal organization of neural activity in the developing spinal.</a> Dev. Neurobiol. 68, 788-803 (2008).</li><li>Mendelson, B., Frank, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Specific+monosynaptic+sensory-motor+connections+form+in+the+absence+of+patterned+neural+activity+and+motoneuronal+cell+death.">Specific monosynaptic sensory-motor connections form in the absence of patterned neural activity and motoneuronal cell death.</a> J. Neurosci. 11, 1390-1403 (1991).</li><li>Glover, J. C., Boulland, J. L., Halasi, G., Kasumacic, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chimeric+Animal+Models+in+Human+Stem+Cell+Biology.">Chimeric Animal Models in Human Stem Cell Biology.</a> ILAR Journal. 51, 62-73 (2009).</li><li>Lee, G., Kim, H., Elkabetz, Y., Al Shamy, G., Panagiotakos, G., Barberi, T., Tabar, V., Studer, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+directed+differentiation+of+neural+crest+stem+cells+derived+from+human+embryonic+stem+cells.">Isolation and directed differentiation of neural crest stem cells derived from human embryonic stem cells.</a> Nat. Biotechnol. 25, 1468-1475 (2007).</li><li>Jiang, X., Gwye, Y., McKeown, S. J., Bronner-Fraser, M., Lutzko, C., Lawlor, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+neural+crest+cells+derived+from+in+vitro+differentiated+human+embryonic+stem+cells.">Isolation and characterization of neural crest cells derived from in vitro differentiated human embryonic stem cells.</a> Stem Cells Dev. 18, 1059-1070 (2008).</li></ol>

Нет конфликта интересов объявлены.

Куриный эмбрион удобной и универсальной модели животных для ксенотрансплантации экспериментов. Отсутствие функциональной иммунной системы во время эмбрионального развития плода и позволяет выживание и развитие клеток от любого вида, что терпит температуры инкубации. Куриные эмбрионы были использованы для тестирования регенеративный потенциал различных типов стволовых клеток (см. обзор в работе. 15). Млекопитающих стволовые клетки могут интегрироваться в куриных эмбрионов тканей, включая центральную нервную систему, где они могут привести к нейронов, аксонального прогнозы, синаптические связи и электрофизиологические свойства могут быть оценены в контексте функциональных нейронных 1,2 схем. Потому что хирургические процедуры могут быть сравнительно легко, и инъекции делаются под визуальным вместо стереотаксической контроля, количество эмбрионов может быть легко увеличивать для размещения различных экспериментальных условиях в рамках одного эксперимента. Обычно клетки могут быть введены в 20-30 эмбрионов в течение 4-часового эксперимента. После инъекции смертности эмбрионов является основным ограничивающим фактором. Меры предосторожности должны быть приняты, чтобы избежать кровотечения и обезвоживание. Имейте в виду, что Есть некоторой критической стадии развития, на которой естественного прироста смертности. Дополнение эмбриона с несколькими мл теплой, стерилизовать куриные звонка после инъекции и за день до критической стадии развития, а также обеспечение того, чтобы окна в яйцо, хорошо запечатанных и ориентированы, чтобы избежать утечки, улучшает выживаемость. Если утечки через уплотнение ленты должно происходить, удалите ленту, сухой поверхности и вновь ленты. Некоторые исследователи используют воск и стеклянные или пластиковые покровные для герметизации окна. Смертность не должна существенно отличаться в вводили против ложнооперированных эмбрионов. Хотя мы были сосредоточены здесь на инъекции стволовых клеток человека в зачаток головного и спинного мозга, стволовые клетки могут также быть введены в закладки других органов (см., например, ссылка 4). Каждый орган представляет свои собственные проблемы. Например, инъекции в сердце может оказаться непростой задачей из-за высокой механической устойчивостью к проникновению пипетки и из-за движения, с другой стороны может быть замедлен путем охлаждения эмбрионов до комнатной температуры перед инъекцией. Органы, что отсутствие просвета не может разместиться инъекции достаточных объемах и поэтому может потребоваться хирургическое поражения создать сосуд. По нашему опыту, после поражения регенерации тканей является преимуществом, поскольку она способствует интеграции человеческих стволовых клеток в тканях. Клетки могут также быть введены в эмбриональной мезенхимы, такие как диспергирующие somitic мезенхимы или нервного гребня мигрируют как способ добиться включения в мезенхимальных производных, в том числе нервного гребня полученных периферических ганглиев 16,17.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Fluorescent microscope</td>
<td>Microscope</td>
<td>Olympus IX-81</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Stereo Investigator</td>
<td>Program</td>
<td>MicroBrightField</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>MIP-GFP mice</td>
<td>Mice</td>
<td>Jackson Laboratory</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Mathematica</td>
<td>Program</td>
<td>Wolfram</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Image J</td>
<td>Program</td>
<td>NIH</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Slidebook</td>
<td>Program</td>
<td>Olympus</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

xenotransplantation of human stem cells into the chicken embryo

Куриный эмбрион классической модели животных для изучения нормального эмбрионального и развитие плода и для ксенотрансплантации эксперименты по изучению поведения клеток в стандартизированных<em&gt; В естественных условиях</em&gt; Окружающей среды. Основные преимущества куриного эмбриона включают низкую стоимость, высокую доступность, простота хирургических манипуляций и отсутствие развитой иммунной системы. Ксенотрансплантация в куриные эмбрионы могут дать ценную информацию о клеточной пролиферации, дифференцировки и поведения, ответов клеток на сигналы в определенных нишах эмбриональной ткани, и онкогенными потенциал. Пересадка клеток в куриных эмбрионах также может быть шагом на пути экспериментов трансплантации и в других моделях животных. Недавно куриный эмбрион был использован для оценки нейрогенного потенциал человеческих стволовых и прогениторных клеток после имплантации в нервной закладки<sup&gt; 1-6</sup&gt;. В этом видео мы документе всю процедуру пересадки стволовых клеток человека в развивающихся центральную нервную систему куриных эмбрионов. Процедура начинается с инкубации оплодотворенной икры до эмбрионы желаемого возраста разработали. Яичной скорлупы, затем открылась, и эмбрион контрастируют с инъекционным красителя между эмбрионом и желток. Малые повреждения, сделанные в нервной трубки использованием микрохирургии, создания регенеративной сайта для мобильных отложения, что способствует последующей интеграции в ткани хозяина. Мы показываем, инъекции стволовых клеток человека в такие повреждения, сделанные в части нервной трубки, которая образует задний мозг и спинной мозг, и в просвет часть нервной трубки, которая формирует мозг. Системная вливаний в экстраэмбриональных вен и артерий, также продемонстрировали, как альтернативный способ доставки клеткам васкуляризированной тканей, включая центральную нервную систему. Наконец, мы покажем, как удалить эмбрион из яйца через несколько дней дальнейшего развития и, как вскрыть спинного мозга свободными для последующих физиологических, гистологических и биохимических анализов.

Watch this Scientific Journal Video about Xenotransplantation of Human Stem Cells into the Chicken Embryo at JoVE.com

Xenotransplantation of Human Stem Cells into the Chicken Embryo

В этой статье мы представляем метод пересадки стволовых клеток человека в различных регионах центральной нервной системы куриного эмбриона. Это обеспечивает<em&gt; В естественных условиях</em&gt; Модель для оценки пролиферации и дифференцировки различных типов стволовых клеток человека в эмбриональном средах тканей.

Ксенотрансплантация из стволовых клеток человека в куриный эмбрион

The chicken embryo is a classical animal model for studying normal embryonic and fetal development and for xenotransplantation experiments to study the ...

Research

JoVE Journal

Biology

Transfecting Human Neural Stem Cells with the Amaxa Nucleofector

Трансфекции правам нервные стволовые клетки с Amaxa Nucleofector

Transfection of primary mammalian neural cells, such as human neural stem/precursor cells (hNSPCs), with commonly used cationic lipid transfection ...

Counting Human Neural Stem Cells

Подсчет правам нервные стволовые клетки

Knowledge of the exact number of viable cells in a given volume of a cell suspension is required for many routine tissue culture manipulations, such as ...

Passaging Human Neural Stem Cells

Пассирования правам нервные стволовые клетки

The ability to manipulate human neural stem/precursor cells (hNSPCs) in vitro provides a means to investigate their utility as cell transplants for ...

Immunocytochemistry: Human Neural Stem Cells

Иммуноцитохимическая: Человеческие нервные стволовые клетки

Immunocytochemistry is a very powerful and fairly straightforward method for determining the presence, subcellular localization, and relative abundance of ...

In Ovo Electroporations of HH Stage 10 Chicken Embryos

В Ovo Electroporations Его Святейшества Стадия 10 эмбрионов куриного

Large size and external development of the chicken embryo have long made it a valuable tool in the study of developmental biology.  With the advent of ...

Differentiation of Embryonic Stem Cells into Oligodendrocyte Precursors

Дифференциация эмбриональных стволовых клеток в олигодендроцитов прекурсоров

Oligodendrocytes are the myelinating cells of the central nervous system. For regenerative cell therapy in demyelinating diseases, there is significant ...

Lentiviral-mediated Knockdown During Ex Vivo Erythropoiesis of Human Hematopoietic Stem Cells

Lentiviral-mediated Knockdown During Ex Vivo Erythropoiesis of Human Hematopoietic Stem Cells

Лентивирусов-опосредованной Нокдаун В Ex Vivo Эритропоэз прав гемопоэтических стволовых клеток

Erythropoiesis is a commonly used model system to study cell differentiation. During erythropoiesis, pluripotent adult human hematopoietic stem cells ...

Reprogramming Human Somatic Cells into Induced Pluripotent Stem Cells (iPSCs) Using Retroviral Vector with GFP

Reprogramming Human Somatic Cells into Induced Pluripotent Stem Cells iPSCs Using Retroviral Vector with GFP

Перепрограммирование соматических клеток человека в индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (иПСК) Использование ретровирусных вектор с GFP

Human embryonic stem cells (hESCs) are pluripotent and an invaluable cellular sources for in vitro disease modeling and regenerative medicine1. It has ...

Differentiation of Newborn Mouse Skin Derived Stem Cells into Germ-like Cells In vitro

Differentiation of Newborn Mouse Skin Derived Stem Cells into Germ-like Cells In vitro

Дифференциация новорожденных кожи мышей стволовые клетки в зародышевые-подобных клеток<em&gt; В пробирке</em

Studying  germ cell formation and differentiation has traditionally been very difficult  due to low cell numbers and their location deep within developing ...

Generation of Transgenic Hydra by Embryo Microinjection

Generation of Transgenic Hydra by Embryo Microinjection

Создание трансгенных<em&gt; Hydra</em&gt; По эмбрионов микроинъекции

As a member of the phylum Cnidaria, the sister group to all bilaterians, Hydra can shed light on fundamental biological processes shared among ...