Name: axoplasm isolation from rat sciatic nerve
Uploaded: 2010-09-24T17:00:00
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इस प्रोटोकॉल glial और संवहनी ऊतक संदूषण के न्यूनतम के साथ axoplasm अलगाव की अनुमति देता है. विधि एक 8-10 सप्ताह पुराने Wistar चूहे के अनुसार लगभग 70-100 μg कुल axoplasm प्रोटीन पैदावार. 1. Sciatic नसों काटना <ol><li> सीओ 2 ग्र?...

<ol>
	<li>Hanz, S., Perlson, E., Willis, D., Zheng, J. Q., Massarwa, R., Huerta, J. J., Koltzenburg, M., Kohler, M., van-Minnen, J., Twiss, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axoplasmic+importins+enable+retrograde+injury+signaling+in+lesioned+nerve.">Axoplasmic importins enable retrograde injury signaling in lesioned nerve.</a> Neuron. 40, 1095-1104 (2003).</li><li>Michaelevski, I., Medzihradszky, K. F., Lynn, A., Burlingame, A. L., Fainzilber, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axonal+transport+proteomics+reveals+mobilization+of+translation+machinery+to+the+lesion+site+in+injured+sciatic+nerve.">Axonal transport proteomics reveals mobilization of translation machinery to the lesion site in injured sciatic nerve.</a> Mol Cell Proteomics. 9 (5), 976-987 (2010).</li><li>Rishal, I., Michaelevski, I., Rozenbaum, M., Shinder, V., Medzihradszky, K. F., Burlingame, A. L., Fainzilber, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axoplasm+isolation+from+peripheral+nerve.">Axoplasm isolation from peripheral nerve.</a> Dev Neurobiol. 70, 126-133 (2010).</li><li>Twiss, J. L., Fainzilber, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ribosomes+in+axons--scrounging+from+the+neighbors.">Ribosomes in axons--scrounging from the neighbors.</a> Trends Cell Biol. 19, 236-243 (2009).</li></ol>

बायोकेमिकल और प्रोटिओमिक विश्लेषण की पुष्टि की है कि इस प्रक्रिया सीरम और glial सेल संदूषण 3 को कम कर देता है के रूप में यांत्रिक 1 निचोड़ द्वारा पहले वर्णित axoplasm अलगाव के लिए तरीकों की तुलना में. हम इ...

<ul><li> पुरुष Wistar चूहों (पुराने 8-10 सप्ताह) </li><li> पीबीएस 0.2X और पीबीएस 1X 50 मिलीलीटर प्रति protease inhibitors (Roshe) 2 गोलियाँ युक्त समाधान </li><li> 1.5 मिलीलीटर के लिए Eppendorfs </li><li> प्लास्टिक के बर्तन 35 मिमी निष्फल </li><li> कैंची और ठीक संदंश: सहित विदारक उपकरण </li><li> द्विनेत्री और मेज प्रकाश </li></ul> एंटीबॉडी माउस विरोधी GFAP क्लोन GA 5 सिग्मा (G6171) से किया गया था. विरोधी albumin खरगोश Cedarlane (CLAG5140) से किया गया था. माउस विरोधी ट्यूबिलिन β3 और विरोधी gERK खरगोश सिग्मा (क्रमश: T2200 और M5670) से थे.

axoplasm isolation from rat sciatic nerve

परिधीय तंत्रिका से शुद्ध axonal cytoplasm (axoplasm) के अलगाव कई जैविक प्रक्रियाओं के जैव रासायनिक अध्ययन के लिए महत्वपूर्ण है. इस अनुच्छेद में, हम प्रदर्शन और वयस्क चूहे sciatic तंत्रिका निम्न चरणों का पालन पर आधारित से axoplasm अलगाव के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन: (1) तंत्रिका fascicles और संयोजी ऊतक की जुदाई के विच्छेदन, (2) hypotonic मध्यम में तंत्रिका fascicles के छोटे क्षेत्रों की ऊष्मायन myelin की रिहाई और गैर - axonal संरचनाओं lyse, और (3) शेष सामग्री अक्षतंतु समृद्ध की निकासी. इस तैयारी के प्रोटिओमिक और जैव रासायनिक लक्षण वर्णन axonal घटकों के लिए एक संवर्धन के उच्च डिग्री पुष्टि की है.

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Axoplasm Isolation from Rat Sciatic Nerve

हम वयस्क चूहे sciatic तंत्रिका तंत्रिका hypotonic मध्यम और fascicles ऊष्मायन के विच्छेदन माइलिन रिलीज और गैर - axonal संरचनाओं, शेष सामग्री अक्षतंतु समृद्ध निकासी के बाद lyse पर आधारित से axoplasm अलगाव के लिए एक प्रोटोकॉल प्रदर्शित करता है.

चूहा sciatic तंत्रिका से Axoplasm अलगाव

Isolation of pure axonal cytoplasm (axoplasm) from peripheral nerve is crucial for biochemical studies of many biological processes. In this article, we ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Reproducible Mouse Sciatic Nerve Crush and Subsequent Assessment of Regeneration by Whole Mount Muscle Analysis

प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य माउस sciatic तंत्रिका और पूरे पर्वत स्नायु विश्लेषण द्वारा पुनर्जनन के बाद आकलन क्रश

Regeneration in the peripheral nervous system (PNS) is widely studied both for its relevance to human disease and to understand the robust regenerative ...

In Vivo Electrophysiological Measurements on Mouse Sciatic Nerves

In Vivo Electrophysiological Measurements on Mouse Sciatic Nerves

माउस sciatic नसों पर विवो electrophysiological माप में

Electrophysiological studies allow a rational classification of various neuromuscular diseases and are of help, together with neuropathological ...

Minimally-invasive Technique for Injection into Rat Optic Nerve

चूहा ऑप्टिक तंत्रिका में इंजेक्शन के लिए न्यूनतम इनवेसिव तकनीक

The rat optic nerve is a useful model for stem cell regeneration research. Direct injection into the rat optic nerve allows delivery into the central ...

Visual Evoked Potential Recording in a Rat Model of Experimental Optic Nerve Demyelination

प्रायोगिक ऑप्टिक तंत्रिका Demyelination की एक चूहे मॉडल में दृश्य पैदा संभावित रिकॉर्डिंग

The visual evoked potential (VEP) recording is widely used in clinical practice to assess the severity of optic neuritis in its acute phase, and to ...

In Vivo Gene Transfer to Schwann Cells in the Rodent Sciatic Nerve by Electroporation

In Vivo Gene Transfer to Schwann Cells in the Rodent Sciatic Nerve by Electroporation

Electroporation द्वारा कृंतक Sciatic तंत्रिका में श्वान कोशिकाओं को विवो जीन स्थानांतरण में

The formation of the myelin sheath by Schwann cells (SCs) is essential for rapid conduction of nerve impulses along axons in the peripheral nervous ...

In Vivo Electrophysiological Measurement of the Rat Ulnar Nerve with Axonal Excitability Testing

In Vivo Electrophysiological Measurement of the Rat Ulnar Nerve with Axonal Excitability Testing

Vivo में Axonal उत्तेजक परीक्षण के साथ चूहे Ulnar तंत्रिका की Electrophysiological माप

Electrophysiology enables the objective assessment of peripheral nerve function in vivo. Traditional nerve conduction measures such as amplitude and ...

Analysis of Immune Cells in Single Sciatic Nerves and Dorsal Root Ganglion from a Single Mouse Using Flow Cytometry

एकल Sciatic नसों में प्रतिरक्षा कोशिकाओं का विश्लेषण और एक एकल माउस से पृष्ठीय रूट नाड़ीग्रंथि प्रवाह का उपयोग कर Cytometry

Nerve-resident immune cells in the peripheral nervous system (PNS) are essential to maintaining neuronal integrity in a healthy nerve. The immune cells of ...

Facial Nerve Surgery in the Rat Model to Study Axonal Inhibition and Regeneration

एक्सोनल अवरोध और उत्थान का अध्ययन करने के लिए चूहा मॉडल में चेहरे तंत्रिका सर्जरी

This protocol describes consistent and reproducible methods to study axonal regeneration and inhibition in a rat facial nerve injury model. The facial ...

Use of In Vivo Single-fiber Recording and Intact Dorsal Root Ganglion with Attached Sciatic Nerve to Examine the Mechanism of Conduction Failure

विवो सिंगल-फाइबर रिकॉर्डिंग और अक्षत डोर्सल रूट गुच्छिका में संलग्न Sciatic तंत्रिका के साथ का उपयोग आचार विफलता के तंत्र की जांच करने के लिए

Single-fiber recording has been a classical and effective electrophysiological technique over the last few decades because of its specific application for ...

3D Kinematic Analysis for the Functional Evaluation in the Rat Model of Sciatic Nerve Crush Injury

सिस्टिक तंत्रिका क्रश चोट के चूहे मॉडल में कार्यात्मक मूल्यांकन के लिए 3 डी काइनेमेटिक विश्लेषण

Compared to the Sciatic Functional Index (SFI), kinematic analysis is a more reliable and sensitive method for performing functional evaluations of ...