Name: axoplasm isolation from rat sciatic nerve
Uploaded: 2010-09-24T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Axoplasm Isolation from Rat Sciatic Nerve at JoVE.com

Этот протокол позволяет аксоплазме изоляция с минимизацией глиальных и сосудистых тканей загрязнения. Метод дает примерно 70-100 мкг общего белка аксоплазме на одну неделю 8-10 старых крыс линии Вистар. 1. Рассеките седалищного нерва <ol><li> Усыпить двух крыс СО 2 ингаля...

<ol>
	<li>Hanz, S., Perlson, E., Willis, D., Zheng, J. Q., Massarwa, R., Huerta, J. J., Koltzenburg, M., Kohler, M., van-Minnen, J., Twiss, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axoplasmic+importins+enable+retrograde+injury+signaling+in+lesioned+nerve.">Axoplasmic importins enable retrograde injury signaling in lesioned nerve.</a> Neuron. 40, 1095-1104 (2003).</li><li>Michaelevski, I., Medzihradszky, K. F., Lynn, A., Burlingame, A. L., Fainzilber, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axonal+transport+proteomics+reveals+mobilization+of+translation+machinery+to+the+lesion+site+in+injured+sciatic+nerve.">Axonal transport proteomics reveals mobilization of translation machinery to the lesion site in injured sciatic nerve.</a> Mol Cell Proteomics. 9 (5), 976-987 (2010).</li><li>Rishal, I., Michaelevski, I., Rozenbaum, M., Shinder, V., Medzihradszky, K. F., Burlingame, A. L., Fainzilber, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axoplasm+isolation+from+peripheral+nerve.">Axoplasm isolation from peripheral nerve.</a> Dev Neurobiol. 70, 126-133 (2010).</li><li>Twiss, J. L., Fainzilber, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ribosomes+in+axons--scrounging+from+the+neighbors.">Ribosomes in axons--scrounging from the neighbors.</a> Trends Cell Biol. 19, 236-243 (2009).</li></ol>

Биохимические и протеомных анализов подтвердили, что эта процедура сокращает сыворотку и глиальных клеток загрязнения 3 по сравнению с ранее описанных методов аксоплазме изоляции механического сжатия 1. Мы использовали этот протокол аксоплазме изоляции для изучения дине?...

<ul><li> Мужской крыс линии Вистар (8-10 недель) </li><li> PBS 0,2 x и PBS 1X растворами, содержащими ингибиторы протеазы (Роше) 2 таблетки на 50 мл </li><li> Eppendorfs по 1,5 мл </li><li> Стерилизованное пластиковой посуды 35 мм </li><li> Пройдя инструментов, включая: ножницы и тонкие щипцы </li><li> Бинокулярный и настольный свет </li></ul> Антитела Мышь против GFAP клон GA-5 было от Sigma (G6171). Кролик против Альбумин был из Cedarlane (CLAG5140). Мышь против тубулина β3 и кролика анти-Герк были от Sigma (T2200 и M5670 соответственно).

axoplasm isolation from rat sciatic nerve

Выделение чистой аксонального цитоплазмы (аксоплазме) из периферических нервов имеет решающее значение для биохимических исследований многих биологических процессов. В этой статье мы покажем и описать протокол для аксоплазме изоляции от взрослой крысы седалищного нерва основано на следующие этапы: (1) рассечение нервных пучков и разделения соединительной ткани; (2) инкубация коротких сегментов нервных пучков в гипотонической среде освободить миелина и лизировать не-аксонального структур, а также (3) извлечение из оставшихся аксон обогащенного материала. Протеомных и биохимические характеристики этого препарата подтвердили высокую степень обогащения аксонального компонентов.

Watch this Scientific Journal Video about Axoplasm Isolation from Rat Sciatic Nerve at JoVE.com

Axoplasm Isolation from Rat Sciatic Nerve

Мы демонстрируем протокол для аксоплазме изоляции от взрослой крысы седалищного нерва на основе рассечение нервных пучков и инкубации в гипотонической среде, чтобы освободить миелина и лизировать не-аксонального структур с последующим извлечением оставшейся аксон обогащенного материала.

Аксоплазме Изоляция от седалищного нерва крысы

Isolation of pure axonal cytoplasm (axoplasm) from peripheral nerve is crucial for biochemical studies of many biological processes. In this article, we ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Reproducible Mouse Sciatic Nerve Crush and Subsequent Assessment of Regeneration by Whole Mount Muscle Analysis

Воспроизводимые мыши седалищного нерва и Давка Последующие оценки регенерации полного анализа горы мышц

Regeneration in the peripheral nervous system (PNS) is widely studied both for its relevance to human disease and to understand the robust regenerative ...

In Vivo Electrophysiological Measurements on Mouse Sciatic Nerves

In Vivo Electrophysiological Measurements on Mouse Sciatic Nerves

В Vivo Электрофизиологические измерения на мышь седалищного нервов

Electrophysiological studies allow a rational classification of various neuromuscular diseases and are of help, together with neuropathological ...

Minimally-invasive Technique for Injection into Rat Optic Nerve

Минимально инвазивная техника для инъекций в Крыса зрительного нерва

The rat optic nerve is a useful model for stem cell regeneration research. Direct injection into the rat optic nerve allows delivery into the central ...

Visual Evoked Potential Recording in a Rat Model of Experimental Optic Nerve Demyelination

Визуальный вызванных потенциалов Запись в крысиной модели экспериментальной зрительного нерва демиелинизация

The visual evoked potential (VEP) recording is widely used in clinical practice to assess the severity of optic neuritis in its acute phase, and to ...

In Vivo Gene Transfer to Schwann Cells in the Rodent Sciatic Nerve by Electroporation

In Vivo Gene Transfer to Schwann Cells in the Rodent Sciatic Nerve by Electroporation

В естественных условиях переноса гена к шванновских клеток в нерве Грызун седалищного путем электропорации

The formation of the myelin sheath by Schwann cells (SCs) is essential for rapid conduction of nerve impulses along axons in the peripheral nervous ...

In Vivo Electrophysiological Measurement of the Rat Ulnar Nerve with Axonal Excitability Testing

In Vivo Electrophysiological Measurement of the Rat Ulnar Nerve with Axonal Excitability Testing

В естественных условиях Электрофизиологические измерения крыса локтевого нерва с аксональное возбудимости тестирование

Electrophysiology enables the objective assessment of peripheral nerve function in vivo. Traditional nerve conduction measures such as amplitude and ...

Analysis of Immune Cells in Single Sciatic Nerves and Dorsal Root Ganglion from a Single Mouse Using Flow Cytometry

Анализ иммунокомпетентных клеток в одном седалищного нервов и спинной корень ганглия от одной мыши с помощью проточной цитометрии

Nerve-resident immune cells in the peripheral nervous system (PNS) are essential to maintaining neuronal integrity in a healthy nerve. The immune cells of ...

Facial Nerve Surgery in the Rat Model to Study Axonal Inhibition and Regeneration

Лицевая хирургия нерва в модели крыс для изучения аксоналинизм и регенерации

This protocol describes consistent and reproducible methods to study axonal regeneration and inhibition in a rat facial nerve injury model. The facial ...

Use of In Vivo Single-fiber Recording and Intact Dorsal Root Ganglion with Attached Sciatic Nerve to Examine the Mechanism of Conduction Failure

Использование In Vivo одноволоконной записи и Intact Dorsal Root Ganglion с прикрепленным седалиальным нервом для изучения механизма отказа от проводимости

Single-fiber recording has been a classical and effective electrophysiological technique over the last few decades because of its specific application for ...

3D Kinematic Analysis for the Functional Evaluation in the Rat Model of Sciatic Nerve Crush Injury

3D кинематический анализ для функциональной оценки в Крыса Модель Сиатический нерв Давка травмы

Compared to the Sciatic Functional Index (SFI), kinematic analysis is a more reliable and sensitive method for performing functional evaluations of ...