Name: generation of transgenic c. elegans by biolistic transformation
Uploaded: 2010-08-23T17:00:00
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यह काम पिट्सबर्ग और NIH अनुदान AG028977 के ALF विश्वविद्यालय से बीज फंडों द्वारा समर्थित किया गया था

अवलोकन परंपरागत ट्रांसजेनिक कीड़े सी. में transgene डीएनए microinjecting द्वारा उत्पन्न किया गया एलिगेंस germline 1,2,3,4. जबकि सफल, इस दृष्टिकोण विशेष उपकरण और कीड़ा शरीर रचना विज्ञान और microinjection तकनीक के स?...

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	<li>Evans, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Wormbook. , 1-15 (2006).</li><li>Berkowitz, L. A., Knight, A. L., Caldwell, G. A., Caldwell, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+stable+transgenic+C.+elegans+using+microinjection.">Generation of stable transgenic C. elegans using microinjection.</a> J Vis Exp. , (2008).</li><li>Mello, C., Fire, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA+transformation.">DNA transformation.</a> Methods Cell Biol. 48, 451-482 (1995).</li><li>Mello, C. C., Kramer, J. 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Biolistic बमबारी सी. सहित कई जीवों में विदेशी डीएनए परिचय के लिए एक सरल तरीका है, 1,5,6,7,16 एलिगेंस. यह सोने 2 CaCl की उपस्थिति में डीएनए के साथ एक जटिल बनाने के कणों पर निर्भर करता है . Spermidine जैसे cationic polyamines, vivo म...

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Erratum: Generation of Transgenic C. elegans by Biolistic Transformation

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		<div>
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		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Gold particles</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Inbio gold</td>
<td>BD021</td>
<td>1micron</td>
</tr>
<tr>
<td>Midiprep kit</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Qiagen</td>
<td>12143</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Spermidine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>S4139</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Protamine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma </td>
<td> P4505</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Macrocarriers</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Biorad</td>
<td>165-2335</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PDS-1000/He Hepta System</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Biorad</td>
<td>165-2257</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Rupture disk</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Biorad</td>
<td>165-2330</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Nystatin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>N1638</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Streptomycin </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>MP</td>
<td>100556</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

generation of transgenic c. elegans by biolistic transformation

मुक्त रहने निमेटोड सी का उपयोग प्रयोगशालाओं की संख्या एलिगेंस तेजी से बढ़ रहा है. इस जैविक मॉडल की लोकप्रियता एक तेजी पीढ़ी समय और कम जीवन अवधि, आसान और सस्ता रखरखाव, पूरी तरह से अनुक्रम जीनोम, और आरएनएआई संसाधनों और उत्परिवर्ती पशुओं की सरणी के लिए जिम्मेदार ठहराया है. इसके अलावा सी. के विश्लेषण, एलिगेंस जीनोम कीड़े और उच्च रीढ़ के बीच एक महान समानता है, जो पता चलता है कि कीड़े में अनुसंधान पूरी चूहों या संवर्धित कोशिकाओं में प्रदर्शन के अध्ययन के लिए एक महत्वपूर्ण सहायक हो सकता है पता चला. कीड़ा अनुसंधान के एक शक्तिशाली और महत्वपूर्ण हिस्सा ट्रांसजेनिक जानवर का उपयोग करने के लिए जीन स्थानीयकरण और समारोह का अध्ययन करने की क्षमता है. ट्रांसजेनिक जानवर कीड़ा germline के microinjection के माध्यम से या biolistic बमबारी के प्रयोग के माध्यम से बनाया जा सकता है. बमबारी एक नई तकनीक है और कम प्रयोगशालाओं के एक नंबर के लिए परिचित है. यहाँ हम एक सरल प्रोटोकॉल का वर्णन करने के लिए सोने के कणों के साथ जैव रेड पीडीएस 1000 प्रणाली का उपयोग biolistic बमबारी द्वारा ट्रांसजेनिक कीड़े उत्पन्न. द्विलिंग में डीएनए microinjection germline के साथ तुलना में, इस प्रोटोकॉल कीड़ा शरीर रचना की पहचान करने या microinjection प्रदर्शन करने का संबंध है के साथ ऑपरेटर से नहीं विशेष कौशल की आवश्यकता का लाभ है. इसके अलावा कई ट्रांसजेनिक लाइनों आमतौर पर एक एकल बमबारी से प्राप्त कर रहे हैं. इसके अलावा microinjection के विपरीत, biolistic बमबारी दोनों extrachromosomal सरणियों और एकीकृत transgenes के साथ ट्रांसजेनिक जानवर पैदा करता है. एकीकृत ट्रांसजेनिक लाइनों को प्राप्त करने की क्षमता mutagenic प्रोटोकॉल के उपयोग से बचने के लिए विदेशी डीएनए को एकीकृत कर सकते हैं. अंत में, biolistic बमबारी ट्रांसजेनिक जानवर की पीढ़ी के लिए एक आकर्षक तरीका विशेष रूप से समय और प्रयास microinjection में कुशल बनने के की जरूरत निवेश करने में दिलचस्पी नहीं जांचकर्ताओं के लिए किया जा सकता है.

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Generation of Transgenic C. elegans by Biolistic Transformation (Video) | JoVE

ट्रांसजेनिक कीड़े सामान्यतः में उपयोग किया जाता है<em&gt; सी. एलिगेंस</em&gt; अनुसंधान. वर्णित एक सरल, अभी तक प्रभावी, डीएनए लेपित सोने के कणों के साथ biolistic बमबारी का उपयोग कीड़े में transgenes परिचय प्रोटोकॉल है. शामिल प्रयास और बमबारी के परिणामों ट्रांसजेनिक जानवर की पीढ़ी के लिए microinjection के साथ तुलना कृपापूर्वक.

ट्रांसजेनिक का सृजन सी. एलिगेंस Biolistic परिवर्तन द्वारा

The number of laboratories using the free living nematode C. elegans is rapidly growing. The popularity of this biological model is attributed to a rapid ...

Research

JoVE Journal

Biology

Generation of Transgenic C. elegans by Biolistic Transformation

Generation of Stable Transgenic C. elegans Using Microinjection

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स्थिर ट्रांसजेनिक सी. Microinjection का उपयोग एलिगेंस पीढ़ी

Transgenic Caenorhabditis elegans can be readily created via microinjection of a DNA plasmid solution into the gonad 1.  The plasmid DNA rearranges to ...

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संवर्धन भ्रूण के लिए एक विधि<em&gt; सी. एलिगेंस</em&gt; कक्ष

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Antibody Staining in C. Elegans Using "Freeze-Cracking" (Video) | JoVE

एंटीबॉडी धुंधला में<em&gt; सी. एलिगेंस</em&gt; &quot;रुक क्रैकिंग&quot; का प्रयोग

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An Anoxia-starvation Model for Ischemia/Reperfusion in C. elegans (Video) | JoVE

Ischemia / reperfusion में के लिए एक अनॉक्सिता भुखमरी मॉडल<em&gt; सी. एलिगेंस</em

Protocols for anoxia/starvation in the genetic model organism C. elegans simulate ischemia/reperfusion. Worms are separated from bacterial food and placed ...

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Culturing Caenorhabditis elegans in Axenic Liquid Media and Creation of Transgenic Worms by Microparticle Bombardment (Video) | JoVE

संवर्धन<em&gt; Caenorhabditis एलिगेंस</em &gt; Microparticle बमबारी से axenic तरल मीडिया और ट्रांसजेनिक कीड़े के निर्माण में

In this protocol, we present the required materials, and the procedure for making modified&#160;C. elegans&#160;Habituation and Reproduction media ...

Generation of Transgenic Hydra by Embryo Microinjection

Generation of Transgenic Hydra by Embryo Microinjection (Video) | JoVE

ट्रांसजेनिक का सृजन<em&gt; हाइड्रा</em&gt; भ्रूण Microinjection द्वारा

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