Name: patch clamp recordings from mouse retinal neurons in a dark-adapted slice preparation
Uploaded: 2010-09-12T19:00:00
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Questo lavoro è stato sostenuto da NIH di Grant EY17606 (APS).

1. Elettrodi preparazione <ol><li> Preparare gli elettrodi di registrazione e di riferimento per immersione entrambi in 1M NaCl e guida 15V tra di loro utilizzando un 1 sinusoide Hz per ~ 20 s. </li><li> Rendere gli elettrodi di registrazione con un estrattore micropipetta (Sutter Instruments P-97). Per le patch-pipette utilizzare un vetro borosilicato con un diametro esterno di 1,2 mm e un diametro interno di 0,69 mm (Sutter Instruments, Cat # B120-69-10). Misurare la resistenza serie attraverso la punta dell&#39;ele...

<ol>
	<li>Weblin, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transmission+along+and+between+rods+in+the+tiger+salamander+retina.">Transmission along and between rods in the tiger salamander retina.</a> J Physiol. 280, 449-470 (1978).</li><li>Wu, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+connections+among+retina+neurons+in+living+slices.">Synaptic connections among retina neurons in living slices.</a> J Neurosci Methods. 20, 139-149 (1987).</li><li>Rieke, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+contrast+adaptation+in+salamander+bipolar+cell.">Temporal contrast adaptation in salamander bipolar cell.</a> J Neurosci. 21, 9445-9454 (2001).</li><li>Armstrong-Gold, C., &amp;amp, R. i. e. k. e., F, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bandpass+filtering+at+the+rod+to+second-order+cell+synapse+in+salamander+(Ambystoma+tigrinum)+retina.">Bandpass filtering at the rod to second-order cell synapse in salamander (Ambystoma tigrinum) retina.</a> J Neurosci. 23, 3796-3806 (2003).</li><li>Masland, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+fundamental+plan+of+the+retina.">The fundamental plan of the retina.</a> Nat Neurosci. 4, 877-886 (2001).</li><li>Wassle, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parallel+processing+in+the+mammalian+retina.">Parallel processing in the mammalian retina.</a> Nat Rev Neurosci. 5, 747-757 (2004).</li></ol>

Registrazione fetta di retina dei vertebrati sono state fatte per decenni 1,2, e sono stati molto efficaci nel fornire una comprensione più profonda di come i circuiti della retina codifica luce incidente. I vantaggi del taglio con un microtomo vibrante, piuttosto che direttamente con una lama di rasoio è che le fette della retina incorrere meno danni in superficie. Con una pipetta di aspirazione è facile da rimuovere questi danni e le cellule bersaglio sane appena sotto la superficie che conservano la lor...

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		<div>
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		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Micropipette Puller</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sutter Instruments</td>
<td>P-97</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Borosilicate glass</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sutter Instruments</td>
<td>B120-69-10</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Polyethylene tubing</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Intramedic</td>
<td>PE205</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Agar</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>A7002</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Low gelling temp agarose</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>A0701</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ames' Medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>A1420</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Penicillin-Streptomycin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P0781</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

patch clamp recordings from mouse retinal neurons in a dark-adapted slice preparation

La nostra esperienza visiva è iniziata quando il pigmento visivo nel nostro fotorecettori della retina assorbe i fotoni di energia luminosa e avvia una cascata di eventi intracellulari che portano alla chiusura del ciclico-nucleotide-gated canali nella membrana cellulare. Conseguente cambiamento di potenziale di membrana porta a sua volta alla riduzione della quantità del rilascio di neurotrasmettitore da entrambi i terminali asta e cono sinaptica. Per misurare come il cambiamento di luce evocati del potenziale di membrana dei fotorecettori porta ad attività a valle nella retina, gli scienziati hanno effettuato registrazioni elettrofisiologiche da preparazioni fetta della retina per 1,2 decenni. In passato queste fette sono state tagliate manualmente con una lama di rasoio sul tessuto retinico che è collegato a carta da filtro, in questi ultimi anni un altro metodo di taglio è stato sviluppato per cui tessuto retinico è incorporato in agar a bassa temperatura di gelificazione e affettati in soluzione fredda con un vibrante microtomo 3,4. Questa preparazione produce fette della retina con danni superficiali e meno risposte luce evocata molto robusto. Qui documentare come questa procedura può essere fatta sotto la luce a infrarossi per evitare lo sbiancamento del pigmento visivo.

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Patch Clamp Recordings from Mouse Retinal Neurons in a Dark-adapted Slice Preparation

Qui si descrive una procedura per la generazione di dark-adattato fette della retina del mouse per le registrazioni elettrofisiologiche.

Bloccare Registrazioni patch da neuroni della retina del mouse in un Dark-adattato Preparazione Slice

Our visual experience is initiated when the visual pigment in our retinal photoreceptors absorbs photons of light energy and initiates a cascade of ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Paired Patch Clamp Recordings from Motor-neuron and Target Skeletal Muscle in Zebrafish

Accoppiato a pinza registrazioni patch da Motor-neurone e muscolo scheletrico bersaglio in Zebrafish

Larval zebrafish represent the first vertebrate model system to allow simultaneous patch clamp recording from a spinal motor-neuron and target muscle.  ...

Ricerca

Neuroscienze

Patch Clamp Recordings in Inner Ear Hair Cells Isolated from Zebrafish

Registrazioni patch clamp in cellule interne dell&#39;orecchio Capelli Isolato da Zebrafish

Patch  clamp analyses of the voltage-gated channels in sensory hair cells isolated  from a variety of species have been described previously1-4 but this  ...

F1FO ATPase Vesicle Preparation and Technique for Performing Patch Clamp Recordings of Submitochondrial Vesicle Membranes

F1FO ATPase Vesicle Preparation and Technique for Performing Patch Clamp Recordings of Submitochondrial Vesicle Membranes

<sub&gt; 1</sub&gt; F<sub&gt; O</sub&gt; ATPasi Vesicle Preparazione e tecnica per permettere Bloccare Registrazioni patch di membrane delle vescicole submitocondriali

Mitochondria are involved in many important cellular  functions including metabolism, survival1, development and, calcium signaling2. Two of the most ...

Simultaneous Whole-cell Recordings from Photoreceptors and Second-order Neurons in an Amphibian Retinal Slice Preparation

Registrazioni simultanee a cellule di fotorecettori e dei neuroni di secondo ordine in un anfibio Retinal Fetta Preparazione

One of the central tasks in retinal neuroscience  is to understand the circuitry of retinal neurons and how those connections are  responsible for shaping ...

Isolation of Sensory Neurons of Aplysia californica for Patch Clamp Recordings of Glutamatergic Currents

Isolation of Sensory Neurons of Aplysia californica for Patch Clamp Recordings of Glutamatergic Currents

Isolamento dei neuroni sensoriali<em&gt; Aplysia californica</em&gt; Per Bloccare Registrazioni patch di correnti glutamatergico

The marine gastropod mollusk Aplysia californica has a venerable  history as a model of nervous system function, with particular significance in  studies ...

Patch Clamp Recordings from Embryonic Zebrafish Mauthner Cells

Bloccare Registrazioni patch da cellule embrionali Zebrafish Mauthner

Mauthner cells (M-cells) are large  reticulospinal neurons located in the hindbrain of teleost fish. They are key  neurons involved in a characteristic ...

Whole-cell Patch-clamp Recordings from Morphologically- and Neurochemically-identified Hippocampal Interneurons

Whole-cell patch-clamp registrazioni da Morphologically- e neurochimico-identificati interneuroni dell&#39;ippocampo

GABAergic inhibitory interneurons play a central role within neuronal circuits of the brain. Interneurons comprise a small subset of the neuronal ...

Recording Light-evoked Postsynaptic Responses in Neurons in Dark-adapted, Mouse Retinal Slice Preparations Using Patch Clamp Techniques

Registrazione Light-evocato Risposte postsinaptica nei neuroni in Dark-adattati, i preparativi della retina del mouse Slice Utilizzando tecniche di patch clamp

The retina is the gateway to the visual system. To understand visual signal processing mechanisms, we investigate retinal neural network functions. ...

Whole-cell Patch-clamp Recordings in Brain Slices

Registrazioni Whole-cell patch-clamp nel cervello fette

Whole-cell patch-clamp recording is an electrophysiological technique that allows the study of the&#160;electrical properties of a substantial part of the ...

Subcellular Patch-clamp Recordings from the Somatodendritic Domain of Nigral Dopamine Neurons

Subcellulari patch-clamp dal dominio Somatodendritic di nigral dopamina neuroni

Dendrites of dopaminergic neurons receive and convey synaptic input, support action potential back-propagation and neurotransmitter release. Understanding ...