Name: study glial cell heterogeneity influence on axon growth using a new coculture method
Uploaded: 2010-09-06T17:00:00
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Questo studio è stato supportato da nuovi FMMU trovando fondazione e in parte fondi NIH.

1. Glia colture cellulari Cellule gliali possono essere coltivate provenienti da diverse regioni del sistema nervoso centrale. L&#39;intero processo è mostrato in figura processo. <img src="/files/ftp_upload/2111/2111process.jpg" alt="Processo 1" /> Giorno 1 cultura piastra di rivestimento e coprioggetto <ol><li> Sterilizzati a secco tondo microscopio vetro coprioggetto in autoclave. </li><li> Targhetta del coprioggetto sterilizzati ste...

<ol>
	<li>Rossignol, S., Schwab, M., Schwartz, M., Fehlings, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+cord+injury:+time+to+move?.">Spinal cord injury: time to move?.</a> J Neurosci. 27 (44), 11782-11792 (2007).</li><li>Yiu, G., He, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glial+inhibition+of+CNS+axon+regeneration.">Glial inhibition of CNS axon regeneration.</a> Nat Rev Neurosci. 7 (8), 617-627 (2006).</li><li>Barres, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mystery+and+magic+of+glia:+a+perspective+on+their+roles+in+health+and+disease.">The mystery and magic of glia: a perspective on their roles in health and disease.</a> Neuron. 60 (3), 430-440 (2008).</li><li>Matyash, V., Kettenmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterogeneity+in+astrocyte+morphology+and+physiology.">Heterogeneity in astrocyte morphology and physiology.</a> Brain Res Rev. , (2009).</li><li>Wanner, I. B., Deik, A., Torres, M., Rosendahl, A., Neary, J. T., Lemmon, V. P., Bixby, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+in+vitro+model+of+the+glial+scar+inhibits+axon+growth.+Glia.">A new in vitro model of the glial scar inhibits axon growth. Glia.</a> 56 (15), 1691-1709 (2008).</li><li>Kuffler, D. P., Sosa, I. J., Reyes, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Schwann+cell+chondroitin+sulfate+proteoglycan+inhibits+dorsal+root+ganglion+neuron+neurite+outgrowth+and+substrate+specificity+via+a+soma+and+not+a+growth+cone+mechanism.">Schwann cell chondroitin sulfate proteoglycan inhibits dorsal root ganglion neuron neurite outgrowth and substrate specificity via a soma and not a growth cone mechanism.</a> J Neurosci Res. 87 (13), 2863-2871 (2009).</li><li>Kleitman, N., Wood, P. M., Bunge, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+culture+method+for+the+study+of+myelination.">Tissue culture method for the study of myelination.</a> Culturing nerve cells. , P559-P559 (1998).</li></ol>

Questo protocollo esperimento è stato progettato per raggiungere due obiettivi per studiare le cellule gliali, l&#39;influenza di eterogeneità soprattutto astrociti sulla adesione dei neuroni e la crescita dei neuriti. Il primo obiettivo era quello di mantenere l&#39;eterogeneità astrociti il ​​più possibile, in questo esperimento, la confluenza delle cellule gliali cultura astrociti arricchito è stato mixato cultura primaria senza alcun trattamento chimico e la propagazione digestione, che possono ulteriorment...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>DMEM(high glucose)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>10313-039</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>L15 medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>11415-114</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>FBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>10437-077</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Neurobasal Medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>21103-049</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>poly-lysine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P4832</td>
<td>culture grade</td>
</tr>
<tr>
<td>NGF(2.5S)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>13257-019</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>B27 supplyment</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>17504-044</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>0.25% trypsin-EDTA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>25200-056</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>FUDR</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>F0503</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>neurofilament antibody</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Abcam</td>
<td>ab24575</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

study glial cell heterogeneity influence on axon growth using a new coculture method

Nel sistema nervoso centrale di tutti i mammiferi, gli assoni interrotto dopo l&#39;infortunio non sono in grado di rigenerare i propri obiettivi di originale e di recupero funzionale è molto povera 1. Il fallimento della rigenerazione assonale è il risultato combinato di diversi fattori tra cui l&#39;ambiente ostile di cellule gliali, inibitori delle molecole legate mielina dei neuroni e una diminuzione intrinseca capacità rigenerativa 2. Astrociti sono il tipo più predominante delle cellule gliali nel sistema nervoso centrale e svolgono un ruolo importante nelle funzioni dell&#39;assone in fisiologia e le condizioni di patologia 3. Contrasto con l&#39;omologo oligodendrociti, gli astrociti sono una popolazione cellulare eterogenea composta da diverse sottopopolazioni astrociti con morfologie diverse e l&#39;espressione genica 4. Il significato funzionale di questa eterogeneità, come ad esempio le loro influenze sulla crescita degli assoni, è in gran parte sconosciuto. Per studiare le cellule gliali, in particolare la funzione di eterogeneità astrociti nel comportamento dei neuroni, abbiamo stabilito un nuovo metodo di co-colture di neuroni alta radice purificata gangli dorsali con le cellule gliali ottenuto dalla corteccia di ratto. Con questa tecnica, siamo stati in grado di confrontare direttamente l&#39;adesione e la crescita degli assoni dei neuroni in diverse sottopopolazioni astrociti nelle stesse condizioni. In questo rapporto, diamo il protocollo dettagliato di questo metodo per l&#39;isolamento astrociti e la cultura, i neuroni dei gangli dorsali isolamento e la purificazione, e la co-coltura di neuroni DRG con astrociti. Questo metodo potrebbe essere esteso anche ad altre regioni del cervello per studiare cellulare o regionali specifici di interazione tra i neuroni e cellule gliali.

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Study Glial Cell Heterogeneity Influence on Axon Growth Using a New Coculture Method

In questo protocollo, abbiamo descritto un nuovo metodo per studiare l&#39;influenza delle eterogeneità delle cellule gliali sulla crescita degli assoni con un<em&gt; In vitro</em&gt; Di co-cultura di sistema. Rat cellule corticali gliali sono state coltivate a confluenza e cocultured con altamente purificato topo neuroni dei gangli dorsali. Diversi influenza delle cellule gliali sull&#39;adesione neuroni e la crescita degli assoni è stato confrontato direttamente nella stessa cultura. Questo metodo fornisce un nuovo modo di studiare direttamente la eterogeneità delle cellule gliali influenza sulla adesione dei neuroni e la crescita degli assoni.

Studio gliali eterogeneità Influenza sulla crescita cellulare Axon Utilizzando un nuovo metodo co-coltura

In the central nervous system of all mammals, severed axons after injury are unable to regenerate to their original targets and functional recovery is ...

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