Name: study glial cell heterogeneity influence on axon growth using a new coculture method
Uploaded: 2010-09-06T17:00:00
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이 연구는 FMMU 새로운 재단과 부분적으로 NIH의 기금을 찾는 의해 지원되었다.

1. Glia 세포 문화 Glial 세포는 중추 신경계의 다른 지역에서 교양 수 있습니다. 전체 프로세스는 프로세스 그림에 표시됩니다. <img src="/files/ftp_upload/2111/2111process.jpg" alt="프로세스 1" /> 1 일 코팅 문화 플레이트와 coverslips <ol><li> 건조 멸균 유리 현미경의 원형은 압력솥에 coverslips. </li><li> 멸균 24 웰 플레이트에 문화 플레이트 살균 coverslip...

<ol>
	<li>Rossignol, S., Schwab, M., Schwartz, M., Fehlings, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+cord+injury:+time+to+move?.">Spinal cord injury: time to move?.</a> J Neurosci. 27 (44), 11782-11792 (2007).</li><li>Yiu, G., He, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glial+inhibition+of+CNS+axon+regeneration.">Glial inhibition of CNS axon regeneration.</a> Nat Rev Neurosci. 7 (8), 617-627 (2006).</li><li>Barres, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mystery+and+magic+of+glia:+a+perspective+on+their+roles+in+health+and+disease.">The mystery and magic of glia: a perspective on their roles in health and disease.</a> Neuron. 60 (3), 430-440 (2008).</li><li>Matyash, V., Kettenmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterogeneity+in+astrocyte+morphology+and+physiology.">Heterogeneity in astrocyte morphology and physiology.</a> Brain Res Rev. , (2009).</li><li>Wanner, I. B., Deik, A., Torres, M., Rosendahl, A., Neary, J. T., Lemmon, V. P., Bixby, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+in+vitro+model+of+the+glial+scar+inhibits+axon+growth.+Glia.">A new in vitro model of the glial scar inhibits axon growth. Glia.</a> 56 (15), 1691-1709 (2008).</li><li>Kuffler, D. P., Sosa, I. J., Reyes, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Schwann+cell+chondroitin+sulfate+proteoglycan+inhibits+dorsal+root+ganglion+neuron+neurite+outgrowth+and+substrate+specificity+via+a+soma+and+not+a+growth+cone+mechanism.">Schwann cell chondroitin sulfate proteoglycan inhibits dorsal root ganglion neuron neurite outgrowth and substrate specificity via a soma and not a growth cone mechanism.</a> J Neurosci Res. 87 (13), 2863-2871 (2009).</li><li>Kleitman, N., Wood, P. M., Bunge, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+culture+method+for+the+study+of+myelination.">Tissue culture method for the study of myelination.</a> Culturing nerve cells. , P559-P559 (1998).</li></ol>

이 실험 프로토콜은 glial 세포, 신경 세포의 부착 및 neurite 성장에 특히 astrocyte 이질의 영향을 연구하는 두 목표를 달성하도록 설계되었습니다. 첫 번째 목표는이 실험에서 astrocyte 이질 최대한을 유지하는 것이었다, 합류 glial 세포 배양 농축 astrocytes는 더욱 세포를 손상 astrocytes의 부상 반응을 유발 수있는 화학 치료 및 소화 전파없이 기본 문화를 혼합했다. 최종 astrocyte 순도가 fibrobasts FN 의해 검?...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>DMEM(high glucose)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>10313-039</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>L15 medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>11415-114</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>FBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>10437-077</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Neurobasal Medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>21103-049</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>poly-lysine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P4832</td>
<td>culture grade</td>
</tr>
<tr>
<td>NGF(2.5S)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>13257-019</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>B27 supplyment</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>17504-044</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>0.25% trypsin-EDTA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>25200-056</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>FUDR</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>F0503</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>neurofilament antibody</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Abcam</td>
<td>ab24575</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

study glial cell heterogeneity influence on axon growth using a new coculture method

모든 포유 동물의 중추 신경계에 부상 후 절단 axons 1 매우 가난 원래의 목표와 기능 회복에 재생 수 없습니다. 축삭 재생의 실패는 적대적 glial 세포 환경 억제 myelin 관련 분자 및 내장 신경 세포 재생 능력이 감소 등 여러 가지 요인의 복합 결과입니다. Astrocytes는 중추 신경계에서 가장 지배 glial 세포 유형이며, 생리학 및 병리 조건 3 아래의 축삭 기능에 중요한 역할을한다. 동종 oligodendrocytes에 대비, astrocytes는 다양한 morphologies 및 유전자 발현 4 가지 astrocyte subpopulations로 구성된 이종 세포 인구입니다. 같은 축삭의 성장에 대한 자신의 영향으로이 이질의 기능적 의미는, 대부분 알 수 있습니다. 특히 glial 세포, 신경 세포의 동작 astrocyte 이질의 기능을 연구하기 위해, 우리는 쥐의 피질에서 얻은 glial 세포와 공동 culturing 높은 정화 등의 루트 신경의 신경에 의해 새로운 방법을 만들었습니다. 이 기법으로, 우리는 직접적으로 동일한 조건하에 다른 astrocytes의 subpopulations에서 신경 세포의 부착 및 축삭의 성장을 비교할 수 있었다. 이 보고서에서 우리는 astrocytes 절연 및 문화 등의 루트 신경 뉴런의 절연 및 정화하고, astrocytes와 뉴런을 DRG의 공동 문화에 대해이 방법의 상세한 프로토콜을 제공합니다. 이 방법은 뉴런과 glial 세포 사이의 세포 또는 지역 특정 상호 작용을 연구하는 다른 뇌 영역 확장 수 있습니다.

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Study Glial Cell Heterogeneity Influence on Axon Growth Using a New Coculture Method

이 프로토콜에서는, 우리는 함께 축삭의 성장에 glial 세포 이질의 영향을 연구하는 새로운 방법을 설명<em&gt; 체외에서</em&gt; 공동 문화 시스템. 쥐 대뇌 피질의 glial 세포가 합류하는 교양과 고도의 쥐 등의 루트 신경의 신경을 정화와 cocultured되었습니다. 뉴런의 부착 및 축삭의 성장에 다른 glial 세포에 영향을 같은 문화에 직접적으로 비교했다. 이 방법은 직접적으로 신경 세포의 부착 및 축삭의 성장에 glial 세포 이질의 영향을 연구하는 새로운 방법을 제공합니다.

새 Coculture 방법을 사용 액슨 성장에 대한 연구 Glial 세포 이질 영향

In the central nervous system of all mammals, severed axons after injury are unable to regenerate to their original targets and functional recovery is ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

A Caenorhabditis elegans Model System for Amylopathy Study

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<em&gt; Caenorhabditis의 엘레</emAmylopathy 연구에 대한&gt; 모델 시스템

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연구

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모터 축 삭 탐색 및 빛 시트 형광 현미경 검사 법을 사용 하 여 마우스 배아에서 축 삭 Arborization의 정량화의 시각화

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