Name: study glial cell heterogeneity influence on axon growth using a new coculture method
Uploaded: 2010-09-06T17:00:00
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Este estudo foi apoiado por FMMU nova descoberta fundação e financiando parte do NIH.

1. Cultura de Células da glia Células gliais podem ser cultivadas em diferentes regiões do sistema nervoso central. Todo o processo é mostrado na figura processo. <img src="/files/ftp_upload/2111/2111process.jpg" alt="Processo 1" /> Dia 1 placa de cultura de revestimento e lamínulas <ol><li> Rodada microscópio seco esterilizado de vidro lamínulas em autoclave. </li><li> Placa as lamelas esterilizados em placa de cultura esteriliza...

<ol>
	<li>Rossignol, S., Schwab, M., Schwartz, M., Fehlings, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+cord+injury:+time+to+move?.">Spinal cord injury: time to move?.</a> J Neurosci. 27 (44), 11782-11792 (2007).</li><li>Yiu, G., He, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glial+inhibition+of+CNS+axon+regeneration.">Glial inhibition of CNS axon regeneration.</a> Nat Rev Neurosci. 7 (8), 617-627 (2006).</li><li>Barres, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mystery+and+magic+of+glia:+a+perspective+on+their+roles+in+health+and+disease.">The mystery and magic of glia: a perspective on their roles in health and disease.</a> Neuron. 60 (3), 430-440 (2008).</li><li>Matyash, V., Kettenmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterogeneity+in+astrocyte+morphology+and+physiology.">Heterogeneity in astrocyte morphology and physiology.</a> Brain Res Rev. , (2009).</li><li>Wanner, I. B., Deik, A., Torres, M., Rosendahl, A., Neary, J. T., Lemmon, V. P., Bixby, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+in+vitro+model+of+the+glial+scar+inhibits+axon+growth.+Glia.">A new in vitro model of the glial scar inhibits axon growth. Glia.</a> 56 (15), 1691-1709 (2008).</li><li>Kuffler, D. P., Sosa, I. J., Reyes, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Schwann+cell+chondroitin+sulfate+proteoglycan+inhibits+dorsal+root+ganglion+neuron+neurite+outgrowth+and+substrate+specificity+via+a+soma+and+not+a+growth+cone+mechanism.">Schwann cell chondroitin sulfate proteoglycan inhibits dorsal root ganglion neuron neurite outgrowth and substrate specificity via a soma and not a growth cone mechanism.</a> J Neurosci Res. 87 (13), 2863-2871 (2009).</li><li>Kleitman, N., Wood, P. M., Bunge, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+culture+method+for+the+study+of+myelination.">Tissue culture method for the study of myelination.</a> Culturing nerve cells. , P559-P559 (1998).</li></ol>

Este protocolo experimento foi projetado para atingir dois objetivos de estudar as células da glia, astrócitos influência heterogeneidade especialmente sobre neurônio adesão e crescimento neurite. O primeiro objetivo era manter a heterogeneidade astrócitos, tanto quanto possível, neste experimento, a célula glial confluentes astrócitos cultura enriquecida foi misturado cultura primária, sem qualquer tratamento químico e propagação de digestão, o que pode prejudicar ainda mais a célula e induzir a resposta...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>DMEM(high glucose)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>10313-039</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>L15 medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>11415-114</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>FBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>10437-077</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Neurobasal Medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>21103-049</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>poly-lysine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P4832</td>
<td>culture grade</td>
</tr>
<tr>
<td>NGF(2.5S)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>13257-019</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>B27 supplyment</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>17504-044</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>0.25% trypsin-EDTA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>25200-056</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>FUDR</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>F0503</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>neurofilament antibody</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Abcam</td>
<td>ab24575</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

study glial cell heterogeneity influence on axon growth using a new coculture method

No sistema nervoso central de todos os mamíferos, os axônios cortados após a lesão não são capazes de regenerar as suas metas originais e recuperação funcional é muito pobre 1. O fracasso do axônio regeneração é um resultado combinado de vários fatores, incluindo o ambiente hostil de células gliais, as moléculas inibidoras de mielina relacionadas e diminuição da capacidade de regeneração intrínseca neurônio 2. Astrócitos são o tipo de célula glial predominante no sistema nervoso central e desempenham papel importante nas funções do axônio em fisiologia e patologia condições 3. Contraste com os oligodendrócitos homólogos, os astrócitos são uma população heterogênea de células compostas por diferentes subpopulações de astrócitos com morfologias diferentes e expressão do gene 4. O significado funcional dessa heterogeneidade, tais como suas influências sobre o crescimento do axônio, é largamente desconhecida. Para o estudo da célula glial, especialmente a função da heterogeneidade de astrócitos no comportamento dos neurônios, foi estabelecido um novo método de co-cultura purificada de alta neurônios gânglios da raiz dorsal com células gliais obtidos a partir do córtex de ratos. Por esta técnica, nós fomos capazes de comparar diretamente adesão neurônio e crescimento do axônio em diferentes subpopulações astrócitos sob a mesma condição. Neste relatório, nós damos o protocolo detalhada deste método para astrócitos isolamento e cultura, gânglios da raiz dorsal de isolamento e purificação neurônios, e os co-cultura de neurônios DRG com astrócitos. Este método também pode ser estendido para outras regiões do cérebro para estudar celular ou regionais específicos de interacção entre os neurônios e células gliais.

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Study Glial Cell Heterogeneity Influence on Axon Growth Using a New Coculture Method

Neste protocolo, descrevemos um novo método para estudar a influência da heterogeneidade das células gliais no crescimento do axônio com uma<em&gt; In vitro</em&gt; Sistema de co-cultura. Rat cortical células gliais foram cultivadas a confluência e cocultured altamente purificado com ratos neurônios do gânglio dorsal da raiz. Influência das células gliais em diferentes neurônios adesão e crescimento do axônio foi comparado diretamente na mesma cultura. Este método oferece uma nova forma de estudar diretamente a influência heterogeneidade glial células em neurônios de adesão e crescimento do axônio.

Estudo Influência Heterogeneidade células gliais no crescimento Axon Usando um método de co-cultura New

In the central nervous system of all mammals, severed axons after injury are unable to regenerate to their original targets and functional recovery is ...

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