Name: oral administration of rotenone using a gavage and image analysis of alpha-synuclein inclusions in the enteric nervous system
Uploaded: 2010-10-26T17:00:00
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El Pedro Barrie de la Maza Fundación apoya este trabajo.

1) la administración intragástrica de la rotenona <ol><li> Pesa el animal. </li><li> Calcular el volumen total de la solución de rotenona / vehículo necesario. En este caso, 0,01 ml por gramo de peso del animal. </li><li> Cobro de una jeringa de 1 ml con el volumen calculado previamente de la solución de rotenona (0,625 mg / mL rotenona, el 4% y el 1,25 carboximetilcelulosa cloroformo%) o solución vehículo (4% carboximetilcelulosa y 1,25% cloroformo). En este caso corresponde a una dosis de rotenona 5 mg / kg. ...

<ol>
	<li>Braak, H., de Vos, R. A., Bohl, J., Del Tredici, K., K, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gastric+alpha-synuclein+immunoreactive+inclusions+in+Meissner's+and+Auerbach's+plexuses+in+cases+staged+for+Parkinson's+disease-related+brain+pathology.">Gastric alpha-synuclein immunoreactive inclusions in Meissner's and Auerbach's plexuses in cases staged for Parkinson's disease-related brain pathology.</a> Neurosci Lett. 396, 67-72 (2006).</li><li>Wakabayashi, K., Takahashi, H., Ohama, E., Ikuta, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parkinson's+disease:+an+immunohistochemical+study+of+Lewy+body-containing+neurons+in+the+enteric+nervous+system.">Parkinson's disease: an immunohistochemical study of Lewy body-containing neurons in the enteric nervous system.</a> Acta Neuropathol. 79, 581-583 (1990).</li><li>Wakabayashi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restricted+occurrence+of+Lewy+bodies+in+the+dorsal+vagal+nucleus+in+a+patient+with+late-onset+parkinsonism.">Restricted occurrence of Lewy bodies in the dorsal vagal nucleus in a patient with late-onset parkinsonism.</a> J Neurol Sci. 165, 188-191 (1999).</li><li>Braak, H., Sastre, M., Bohl, J. R., de Vos, R. A., Del Tredici, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parkinson's+disease:+lesions+in+dorsal+horn+layer+I,+involvement+of+parasympathetic+and+sympathetic+pre-+and+postganglionic+neurons.">Parkinson's disease: lesions in dorsal horn layer I, involvement of parasympathetic and sympathetic pre- and postganglionic neurons.</a> Acta Neuropathol. 113, 421-429 (2007).</li><li>Braak, H., Ghebremedhin, E., Rub, U., Bratzke, H., Del Tredici, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stages+in+the+development+of+Parkinson's+disease-related+pathology.">Stages in the development of Parkinson's disease-related pathology.</a> Cell Tissue Res. 318, 121-134 (2004).</li><li>Gorell, J. M., Johnson, C. C., Rybicki, B. A., Peterson, E. L., Richardson, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+risk+of+Parkinson's+disease+with+exposure+to+pesticides,+farming,+well+water,+and+rural+living.">The risk of Parkinson's disease with exposure to pesticides, farming, well water, and rural living.</a> Neurology. 50, 1346-1350 (1998).</li><li>Semchuk, K. M., Love, E. J., Lee, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parkinson's+disease+and+exposure+to+agricultural+work+and+pesticide+chemicals.">Parkinson's disease and exposure to agricultural work and pesticide chemicals.</a> Neurology. 42, 1328-1335 (1992).</li><li>Butterfield, P. G., Valanis, B. G., Spencer, P. S., Lindeman, C. A., Nutt, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Environmental+antecedents+of+young-onset+Parkinson's+disease.">Environmental antecedents of young-onset Parkinson's disease.</a> Neurology. 43, 1150-1158 (1993).</li><li>Pan-Montojo, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progression+of+Parkinson's+disease+pathology+is+reproduced+by+intragastric+administration+of+rotenone+in+mice.">Progression of Parkinson's disease pathology is reproduced by intragastric administration of rotenone in mice.</a> PLoS One. 5, e8762-e8762 (2010).</li><li>Sherer, T. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+toxicity+in+rotenone+models+of+Parkinson's+disease.">Mechanism of toxicity in rotenone models of Parkinson's disease.</a> J Neurosci. 23, 10756-10764 (2003).</li><li>Bove, J., Prou, D., Perier, C., Przedborski, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toxin-induced+models+of+Parkinson's+disease.">Toxin-induced models of Parkinson's disease.</a> NeuroRx. 2, 484-494 (2005).</li><li>Inden, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurodegeneration+of+mouse+nigrostriatal+dopaminergic+system+induced+by+repeated+oral+administration+of+rotenone+is+prevented+by+4-phenylbutyrate,+a+chemical+chaperone.">Neurodegeneration of mouse nigrostriatal dopaminergic system induced by repeated oral administration of rotenone is prevented by 4-phenylbutyrate, a chemical chaperone.</a> J Neurochem. 101, 1491-1504 (2007).</li></ol>

La administración intragástrica se ha realizado previamente 12. Sin embargo, según el manuscrito de Inden, rotenona se administró la sal disuelta en carboximetilcelulosa 0,5% de sodio (CMSS) por sí sola. La rotenona es una sustancia liphophylic alta. Por lo tanto, la rotenona no puede ser disuelto en el CMSS 0,5% solo y se precipitará si se hace así. El uso de cloroformo crea una suspensión rotenona uniformemente distribuida para evitar la precipitación. Además, debido a las mayores concentraciones ...

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		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Rotenone</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>SIGMA-Aldrich</td>
<td>R8875</td>
<td>Germany</td>
</tr>
<tr>
<td>Chloroform</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Carl Roth</td>
<td>3313.1</td>
<td>Germany</td>
</tr>
<tr>
<td>Carboxymethylcellulose</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>SIGMA-Aldrich</td>
<td>C5678</td>
<td>Germany</td>
</tr>
<tr>
<td>Gavage 1,2 mm x 60 mm</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Unimed</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Switzerland</td>
</tr>
<tr>
<td>LSM 510</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Zeiss Microscopes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>FIJI</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>http://pacific.mpi-cbg.de</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

oral administration of rotenone using a gavage and image analysis of alpha-synuclein inclusions in the enteric nervous system

En la enfermedad de Parkinson (EP) de los pacientes, la patología asociada sigue un patrón característico implican entre otras cosas, el sistema nervioso entérico (SNE) 1,2, el bulbo olfatorio (OB), el núcleo motor dorsal del vago (DMV) 3, la intermediolateral núcleo de las 4 de la médula espinal y la sustancia negra, proporcionando la base para la puesta en escena neuropatológicos de la enfermedad 4,5. La ENS y OB son las estructuras más expuestas nervioso y los primeros en verse afectados. Curiosamente, PD se ha relacionado con la exposición a plaguicidas 6-8. Aquí se muestra en detalle dos métodos utilizados en nuestro estudio anterior 9. Con el fin de analizar los efectos de la rotenona actúa localmente en el ENS, se administró utilizando una sonda rotenona a un año de edad C57/BL6 ratones. La rotenona es un pesticida muy utilizado que inhibe fuertemente complejo I mitocondrial 10. Es muy lipofílicos y absorbe mal en el tracto gastrointestinal 11. Nuestros resultados mostraron que la administración de 5 mg / kg de la rotenona no inhibió la actividad de complejo I mitocondrial en el músculo o en el cerebro. Por lo tanto, lo que sugiere que el uso de rotenona nuestro método de administración no cruzó el sistema hepatoportal y se actúa solamente en la ENS. Aquí se muestra un método para administrar los pesticidas con una alimentación por sonda y el protocolo de análisis de imágenes para analizar los efectos de los plaguicidas en la acumulación de alfa-sinucleína en la ENS. La primera parte muestra un método que permite la administración intragástrica de plaguicidas (rotenona) a una concentración deseada precisión. El segundo método muestra la imagen de un protocolo semi-automático de análisis para analizar la acumulación de alfa-sinucleína en la ENS utilizando un software de análisis de imagen.

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Oral Administration of Rotenone using a Gavage and Image Analysis of Alpha-synuclein Inclusions in the Enteric Nervous System

La enfermedad de Parkinson se ha relacionado con la exposición a plaguicidas. Aquí se muestra un método para entregar los pesticidas mediante un tubo gástrico a la concentración deseada y un método para analizar su efecto en la acumulación de alfa-sinucleína en el sistema nervioso entérico.

La administración oral de la rotenona con una sonda y Análisis de Imágenes de la alfa-sinucleína inclusiones en el sistema nervioso entérico

In Parkinson's disease (PD) patients, the associated pathology follows a characteristic pattern involving inter alia the enteric nervous system (ENS) 1,2, ...

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