Name: intracranial injection of adeno-associated viral vectors
Uploaded: 2010-11-17T18:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Intracranial Injection of Adeno-associated Viral Vectors at JoVE.com

<p class="jove_content"> यह काम (EY012977) एनआईएच, Burroughs Wellcome कोष, व्हाइटहॉल फाउंडेशन, और स्लोअन फाउंडेशन (AKM) से जैव चिकित्सा विज्ञान में एक कैरियर पुरस्कार से अनुदान द्वारा संभव बनाया गया था. </p>

<p class="jove_title"> 1. वायरस हैंडलिंग और भंडारण </p><ol><li> उचित संरक्षण और हैंडलिंग तकनीकों के लिए इस्तेमाल किया जा वायरस की जैव सुरक्षा स्तर पर आधारित चुना जाना चाहिए. इन पद्धतियों सूक्ष्मजीवविज्ञानी और बायोमेडिकल लेबोरेटरी?...

<ol>
	<li>Kaplitt, M. G., Leone, P., Samulski, R. J., Xiao, X., Pfaff, D. W., O'Malley, K. L., During, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+gene+expression+and+phenotypic+correction+using+adeno-associated+virus+vectors+in+the+mammalian+brain.">Long-term gene expression and phenotypic correction using adeno-associated virus vectors in the mammalian brain.</a> <em style='font-style: italic'>Nat Genet</em>. <b>8</b>, 148-154 (1994).</li><li>Harding, T. C., Dickinson, P. J., Roberts, B. N., Yendluri, S., Gonzalez-Edick, M., Lecouteur, R. A., Jooss, K. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+gene+transfer+efficiency+in+the+murine+striatum+and+an+orthotopic+glioblastoma+tumor+model,+using+AAV-7-+and+AAV-8-pseudotyped+vectors.">Enhanced gene transfer efficiency in the murine striatum and an orthotopic glioblastoma tumor model, using AAV-7- and AAV-8-pseudotyped vectors.</a> <em style='font-style: italic'>Hum Gene Ther</em>. <b>17</b>, 807-820 (2006).</li><li>Lo, W. D., Qu, G., Sferra, T. J., Clark, R., Chen, R., Johnson, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adeno-associated+virus-mediated+gene+transfer+to+the+brain:+duration+and+modulation+of+expression.">Adeno-associated virus-mediated gene transfer to the brain: duration and modulation of expression.</a> <em style='font-style: italic'>Hum Gene Ther</em>. <b>10</b>, 201-213 (1999).</li><li>Lowery, R. L., Zhang, Y., Kelly, E. A., Lamantia, C. E., Harvey, B. K., Majewska, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+long-term+labeling+of+cells+in+the+developing+and+adult+rodent+visual+cortex+using+double-stranded+adeno-associated+viral+vectors.">Rapid long-term labeling of cells in the developing and adult rodent visual cortex using double-stranded adeno-associated viral vectors.</a> <em style='font-style: italic'>Dev Neurobiol</em>. <b>69</b>, 674-688 (2009).</li></ol>

<p class="jove_content"> Virally की मध्यस्थता जीन डिलीवरी स्नायविक प्रक्रियाओं और मस्तिष्क <sup>1,2,3</sup> विकारों के उपचार के अध्ययन के लिए महान क्षमता रखती है . इस तकनीक के महान बहुमुखी प्रतिभा भी fluorescently दोनों <em>इन विट्रो में</em> और <em>vivo में</em> ...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Stoelting Mouse and Neonatal Rat Adaptor</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Stoelting</td>
<td>51625</td>
<td>Regular stereotax for securing animals for surgery may be substituted</td>
</tr>
<tr>
<td>Extra Fine Bonn Scissors, 8.5cm, straight tip, cutting edge 13mm</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>14084-08</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Eye Dressing Forceps, 10cm, tip width 0.5mm, curved</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>11152-10</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dumont #5/45 Forceps- Dumoxel Standard Tip, 11cm, angled</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>11251-35</td>
<td>Extra-fine tipped forceps for performing craniotomy</td>
</tr>
<tr>
<td>Standard Pattern Forceps, straight, 2.5mmx1.35mmtip, 12cm</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>11000-12</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Microtorque Control Box and Tech2000 handpiece</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Ram Products, Inc.</td>
<td>TECH2000ON/OFF</td>
<td>Dental drill</td>
</tr>
<tr>
<td>Micro Drill Stainless Steel Burrs 1.4mm tip diameter</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>19008-14</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Wiretrol micropipettes, to deliver 1-5 Ul</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR International/ Drummond</td>
<td>5-000-1001 or 53480-287</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Mineral oil</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR International</td>
<td>29447-338</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Manual Micromanipulator and Tilting Base (right-handed)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>World Precision Instruments, Inc.</td>
<td>M3301-M3-R</td>
<td>Used for determining stereotaxic co-ordinates</td>
</tr>
<tr>
<td>UltraMicroPump (UMP3) (one) with SYS-Micro4 Controller</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>World Precision Instruments, Inc.</td>
<td>UMP3-1</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sutures</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR International</td>
<td>95056-952</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>P-97 Flaming/Brown Micropipette Puller</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sutter Instruments</td>
<td>P-97</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tobradex</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Available from your institution&#x2019;s veterinary services</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

intracranial injection of adeno-associated viral vectors

<p class="jove_content"> वायरल के लिए एक फ्लोरोसेंट प्रोटीन व्यक्त इंजीनियर वैक्टर intracranial इंजेक्शन दोनों <em>vivo में</em> और मस्तिष्क वर्गों में अलग मस्तिष्क क्षेत्रों में कोशिकाओं के विशिष्ट सबसेट के दृश्य के लिए एक बहुमुखी लेबलिंग तकनीक है. फ्लोरोसेंट रंजक के इंजेक्शन के विपरीत, वायरल लेबलिंग अलग - अलग सेल प्रकार का लक्ष्य प्रदान करता है और कम खर्चीला और समय ट्रांसजेनिक माउस लाइनों की स्थापना की तुलना में काफ़ी है. इस तकनीक में एक एडिनो जुड़े वायरल सदिश (AAV) intracranially आसपास के ऊतकों को न्यूनतम क्षति के साथ वांछित क्षेत्र में stereotaxic निर्देशांक, एक micropipette और AAV की सटीक प्रसव के लिए एक स्वचालित पंप का उपयोग करने के लिए अंतःक्षिप्त है. इंजेक्शन मापदंडों इंजेक्शन के इंजेक्शन, इंजेक्शन स्थान, इंजेक्शन की मात्रा, दर, AAV सीरोटाइप और जीन अभिव्यक्ति ड्राइविंग प्रमोटर जानवरों की उम्र का समायोजन करके अलग - अलग प्रयोगों के लिए सिलवाया किया जा सकता है. चुना शर्तों पर निर्भर करता है, virally प्रेरित transgene अभिव्यक्ति कोशिकाओं, व्यक्तिगत कोशिकाओं या ठीक सेलुलर प्रक्रियाओं के समूहों के दृश्य, वृक्ष के समान spines के स्तर के नीचे की अनुमति कर सकते हैं. यहाँ दिखाया प्रयोग डबल असहाय AAV माउस प्राथमिक दृश्य प्रांतस्था में न्यूरॉन्स और glia की लेबलिंग के लिए हरे रंग का फ्लोरोसेंट प्रोटीन व्यक्त का एक इंजेक्शन दर्शाया गया है. </p>

Watch this Scientific Journal Video about Intracranial Injection of Adeno-associated Viral Vectors at JoVE.com

Intracranial Injection of Adeno-associated Viral Vectors

<p class="jove_content">यहाँ हम दृश्य प्रांतस्था में न्यूरॉन्स और glia के फ्लोरोसेंट लेबलिंग के लिए AAV वैक्टर intracranial इंजेक्शन उपस्थित थे.</p>

एडिनो - जुड़े वायरल vectors के intracranial इंजेक्शन

Intracranial injection of viral vectors engineered to express a fluorescent protein is a versatile labeling technique for visualization of specific ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Targeting of Deep Brain Structures with Microinjections for Delivery of Drugs, Viral Vectors, or Cell Transplants

ड्रग्स, वायरल वैक्टर, या सेल प्रत्यारोपण की डिलिवरी के लिए Microinjections के साथ डीप ब्रेन संरचनाओं के लक्ष्य निर्धारण

Microinjections into the brain parenchyma are important procedures to deliver drugs, viral vectors or cell transplants.  The brain lesion that an ...

Limbal Approach-Subretinal Injection of Viral Vectors for Gene Therapy in Mice Retinal Pigment Epithelium

चूहे रेटिना वर्णक उपकला में जीन थेरेपी के लिए वायरल वाहक के Limbal दृष्टिकोण subretinal इंजेक्शन

The eye is a small and enclosed organ which makes it an ideal target for gene therapy. Recently various strategies have been applied to gene therapy in ...

Intracerebroventricular and Intravascular Injection of Viral Particles and Fluorescent Microbeads into the Neonatal Brain

नवजात मस्तिष्क में वायरल कणों और फ्लोरोसेंट microbeads की Intracerebroventricular और Intravascular इंजेक्शन

In the study on the pathogenesis of viral encephalitis, the infection method is critical. The first of the two main infectious routes to the brain is the ...

Subpial Adeno-associated Virus 9 (AAV9) Vector Delivery in Adult Mice

Subpial Adeno-associated Virus 9 AAV9 Vector Delivery in Adult Mice

उपशोषक एडोनो-संबंधित वायरस 9 (एएवी 9) वयस्क चूहे में वेक्टर डिलिवरी

The successful development of a subpial adeno-associated virus 9 (AAV9) vector delivery technique in adult rats and pigs has been reported on previously. ...

Methods and Tips for Intravenous Administration of Adeno-associated Virus to Rats and Evaluation of Central Nervous System Transduction

तरीकों और Adeno के नसों में प्रशासन के लिए युक्तियां-चूहों और केंद्रीय तंत्रिका तंत्र Transduction के मूल्यांकन से जुड़े वायरस

Adeno-associated virus (AAV) vectors are a key reagent in the neurosciences for clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR), ...

Adeno-associated Virus-mediated Transgene Expression in Genetically Defined Neurons of the Spinal Cord

Adeno-संबद्ध वायरस-रीढ़ की हड्डी की आनुवंशिक रूप से परिभाषित न्यूरॉन्स में मध्यस्थता Transgene अभिव्यक्ति

Selective manipulation of spinal neuronal subpopulations has mainly been achieved by two different methods: 1) Intersectional genetics, whereby double or ...

Direct Intrathecal Injection of Recombinant Adeno-associated Viruses in Adult Mice

रिकॉमबिनेंट Adeno-वयस्क चूहों में जुड़े वायरस के प्रत्यक्ष Intrathecal इंजेक्शन

Intrathecal (IT) injection of adeno-associated virus (AAV) has drawn considerable interest in CNS gene therapy by virtue of its safety, noninvasiveness, ...

Production, Purification, and Quality Control for Adeno-associated Virus-based Vectors

Adeno-जुड़े वायरस आधारित वैक्टर के लिए उत्पादन, शुद्धिकरण, और गुणवत्ता नियंत्रण

Gene delivery tools based on adeno-associated viruses (AAVs) are a popular choice for the delivery of transgenes to the central nervous system (CNS), ...

Convection Enhanced Delivery of Optogenetic Adeno-associated Viral Vector to the Cortex of Rhesus Macaque Under Guidance of Online MRI Images

ऑनलाइन एमआरआई छवियों के मार्गदर्शन के तहत Rhesus Macakue के कोर्टेक्स के लिए Optogenetic Adeno-संबद्ध वायरल वेक्टर की Convection बढ़ी डिलीवरी

In non-human primate (NHP) optogenetics, infecting large cortical areas with viral vectors is often a difficult and time-consuming task. Here, we ...

In Vivo Direct Reprogramming of Resident Glial Cells into Interneurons by Intracerebral Injection of Viral Vectors

वायरल वेक्टर्स के इंट्रासेरेब्रल इंजेक्शन द्वारा इंटरन्यूरॉन्स में निवासी ग्लिल सेल के विवो डायरेक्ट रीप्रोग्रामिंग में

Converting resident glia in the brain into functional and subtype-specific neurons in vivo provides a step forward towards the development of alternative ...