MRSへの補助金によって部分的なサポートはカナダ自然科学工学研究評議会（NSERC）、神経科学研究のためのハリーBotterell財団、ARC、およびガーフィールドケリー循環器の研究開発基金からのものです。 SRAは、クイーンズ大学の研究賞とロバートJ.ウィルソンフェローシップの受賞者です。 PJは、女王の大学院賞、ロバートJ.ウィルソンフェローシップの受賞者です。 AGとSAは、女王の大学院賞の受賞者です。 SFは科学技術（OGSST）のオンタリオ大学院奨学金の受け手だった。 AGは、女王のフランクリンブラッケン大学院奨学金の受取人です。 SAは、女王のRS McLaughlinは大学院奨学金の受取人です。

1。復活冷凍マクロファージ細胞<ol><li> -80℃冷凍庫から凍結細胞を復活させる前に、人は10％ウシ胎児血清（FBS）とplasmocin 5μg/ mLのを補充した滅菌濾過したダルベッコ変法イーグル培地（DMEM）を用いて培養液を準備する必要があります。 Plasmocinは、細胞培養のマイコプラズマ汚染を排除し、防止するために私たちの研究で使用される抗生物質溶液です。 </li><li>凍結細胞の1バイアルの場合、...

<ol>
	<li>Amith, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neu1+desialylation+of+sialyl+alpha-2,3-linked+beta-galactosyl+residues+of+TOLL-like+receptor+4+is+essential+for+receptor+activation+and+cellular+signaling.">Neu1 desialylation of sialyl alpha-2,3-linked beta-galactosyl residues of TOLL-like receptor 4 is essential for receptor activation and cellular signaling.</a> Cell Signal. 22, 314-324 (2010).</li><li>Amith, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dependence+of+pathogen+molecule-induced+Toll-like+receptor+activation+and+cell+function+on+Neu1+sialidase.">Dependence of pathogen molecule-induced Toll-like receptor activation and cell function on Neu1 sialidase.</a> Glycoconjugate Journal. 26, 1197-1212 (2009).</li><li>Woronowicz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dependence+of+neurotrophic+factor+activation+of+Trk+tyrosine+kinase+receptors+on+cellular+sialidase.">Dependence of neurotrophic factor activation of Trk tyrosine kinase receptors on cellular sialidase.</a> Glycobiology. 17, 10-24 (2007).</li><li>Jayanth, P., Amith, S. R., Gee, K., Szewczuk, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neu1+Sialidase+and+Matrix+Metalloproteinase-9+Cross-talk+is+Essential+for+Neurotrophin+Activation+of+Trk+Receptors+and+Cellular+Signaling.">Neu1 Sialidase and Matrix Metalloproteinase-9 Cross-talk is Essential for Neurotrophin Activation of Trk Receptors and Cellular Signaling.</a> Cell. Signal. 22, 1193-1205 (2010).</li><li>Finlay, T. M., Jayanth, P., Amith, S. R., Glimour, A., Guzzo, C., Gee, K., Beyaert, R., Szewczuk, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thymoquinone+from+nutraceutical+black+cumin+oil+activates+Neu4+sialidase+in+live+macrophage,+dendritic,+and+normal+and+type+I+sialidosis+human+fibroblast+cells+via+GPCR+G&#945;i+proteins+and+matrix+metalloproteinase-9.">Thymoquinone from nutraceutical black cumin oil activates Neu4 sialidase in live macrophage, dendritic, and normal and type I sialidosis human fibroblast cells via GPCR G&#945;i proteins and matrix metalloproteinase-9.</a> Glycoconj J. 27, 329-348 (2010).</li><li>Seyrantepe, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+Phagocytosis+in+Macrophages+by+Neuraminidase+1.">Regulation of Phagocytosis in Macrophages by Neuraminidase 1.</a> Journal of Biological Chemistry. 285, 206-215 (2010).</li></ol>

ライブマクロファージ細胞2でシアリダーゼ活性を検出するために新しく開発されたアッセイを使用して、我々としても、ライブDC - 2.4樹状細胞の用量依存的にライブBMC - 2マクロファージ細胞におけるリガンド誘発性シアリダーゼ活性のシアリダーゼ活性を検出するためにこの技術を使用し、HEK-TLR4/MD2、HEK293、SP1乳腺腺癌細胞、ヒトWTおよび1140F01とWG0544 I型sialidosis線維芽細胞。タミフ?...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>DMEM</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco, Rockville, MD</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>4-MUNANA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Biosynth International Inc., Itasca, IL, USA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fetal calf serum</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>HyClone, Logan, Utah, USA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>DakoCytomation, Fluorescent Mounting Media</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>DAKO North America, Inc., Carpintenia, CA</td>
<td>S3023</td>
<td>15 mL</td>
</tr>
<tr>
<td>Tamiflu (Oseltamivir Phosphate)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Hoffman La Roche</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

detection of  neu1 sialidase activity in regulating toll-like receptor activation

哺乳類のToll様受容体（TLR）は病原体関連分子パターンを認識する受容体ファミリーです。だけでなく、TLRは微生物の重要なセンサー（例えば、ウイルス、細菌および寄生虫）感染症である、彼らはまた、おそらく自己免疫疾患で感染症、炎症性疾患、との病態生理に重要な役割を果たす。このように、感染症に対するTLR応答の強度と持続時間は厳密に管理する必要があります。それはセンサーの受容体の構造的完全性を理解すること、次の、そのリガンドの相互作用とシグナル伝達成分は、その後の免疫学的防御のために不可欠です。また、センサーの操作による疾患修飾のための重要な機会を提供するであろう。 TLRのセンサーのシグナル伝達経路はよく特徴付けされていますが、センサーとそのリガンドとの相互作用を制御するパラメータは、まだ明らかにされないままである。我々は最近、以前に1,2を観察されていない、その天然のリガンドによるTLRの活性化の新たなメカニズムを同定した。それは、リガンド誘導TLRの活性化が密接にNeu1シアリダーゼの活性化によって制御されていることを示唆している。我々はまたNeu1がしっかりNeu1とマトリックスメタロプロテイナーゼ-9（MMP - 9）受容体4との複合体におけるクロストークを含むであるTrkAとTrkB 3などのニューロトロフィン受容体に、調節していることを報告している。シアリダーゼのアッセイは、最初はGPCRGαiタンパク質およびMMP - 9の5を介してマクロファージ、樹状細胞と線維芽細胞の細胞表面上Neu4シアリダーゼの活性化で、小説リガンド、thymoquinoneを見つけるために使用されています。 TLR受容体のために、我々のデータはNeu1シアリダーゼはTLR - 2、-3および-4受容体との複合体に既に存在し、いずれかの受容体へのリガンドの結合によって誘導されることを示している。 TLR - 4量体化、MyD88/TLR4複​​雑な募集、NFkBの活性化​​および炎症誘発性細胞応答に立体障害を除去するために結合するリガンドから遠いNeu1シアリダーゼ加水分解シアリルα- 2、3 - リンクされているβ-ガラクトシル残基を活性化。共同報告書では、Neu1シアリダーゼはマクロファージの細胞6食作用を調節することが示されている。一緒になって、シアリダーゼのアッセイは、リガンド誘導性受容体の活性化の分子メカニズムへの強力な洞察を提供してくれました。 Neu1シアリダーゼとTLRの活性化との間の正確な関係は、TRK受容体がまだ完全に解明されているものの、それは細胞調節経路に新しいまたは先駆的なアプローチを表すことになります。

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Detection of  Neu1 Sialidase Activity in Regulating TOLL-like Receptor Activation

シアリダーゼのアッセイは、微生物感染と生マクロファージの細胞表面の受容体レベルでの炎症性疾患への関与のTLRセンサの新しい分子機構（s）を解明する簡単な技術的なアプローチです。

Toll様受容体の活性化を調節するのNeu1シアリダーゼ活性の検出

Mammalian Toll-like receptors (TLRs) are a family of receptors that recognize pathogen-associated molecular patterns. Not only are TLRs crucial sensors of ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Combination of Adhesive-tape-based Sampling and Fluorescence in situ Hybridization for Rapid Detection of Salmonella on Fresh Produce

Combination of Adhesive-tape-based Sampling and Fluorescence in situ Hybridization for Rapid Detection of Salmonella on Fresh Produce

粘着テープベースのサンプリングと蛍光の組み合わせその場で</emの迅速検出のための>ハイブリダイゼーションサルモネラ生鮮食品について

This protocol describes a simple approach for adhesive-tape-based sampling of tomato and other fresh produce surfaces, followed by on-tape fluorescence in ...

Quantitative Imaging of Lineage-specific Toll-like Receptor-mediated Signaling in Monocytes and Dendritic Cells from Small Samples of Human Blood

ヒト血液の小さなサンプルから単球および樹状細胞のlineage特異的Toll様受容体を介するシグナル伝達の定量的イメージング

Individual variations in immune status determine responses to infection and contribute to disease severity and outcome.  Aging is associated with an ...

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

マダニScapularisダニの唾液、唾液腺、および体液コレクション

Ticks are found worldwide and afflict humans with many tick-borne illnesses. Ticks are vectors for pathogens that cause Lyme disease and tick-borne ...

Methods for Quantitative Detection of Antibody-induced Complement Activation on Red Blood Cells

赤血球上の抗体誘導性補体活性化の定量的検出のための方法

Antibodies against red blood cells (RBCs) can lead to complement activation resulting in an accelerated clearance via complement receptors in the liver ...

Activation and Measurement of NLRP3 Inflammasome Activity Using IL-1&#946; in Human Monocyte-derived Dendritic Cells

Activation and Measurement of NLRP3 Inflammasome Activity Using IL-1ÃƒÅ½Ã‚Â² in Human Monocyte-derived Dendritic Cells

ヒト単球由来樹状細胞におけるIL-1βを用いて活性化し、NLRP3ソーム活性の測定

Inflammatory processes resulting from the secretion of Interleukin (IL)-1 family cytokines by immune cells lead to local or systemic inflammation, tissue ...

Isolation of Murine Peritoneal Macrophages to Carry Out Gene Expression Analysis Upon Toll-like Receptors Stimulation

Toll様受容体刺激時の遺伝子発現解析を行うためにマウス腹腔マクロファージの単離

During infection and inflammation, circulating monocytes leave the bloodstream and migrate into tissues, where they differentiate into macrophages. ...

Isolation and Activation of Murine Lymphocytes

単離とマウスリンパ球の活性化

B and T cells, with their extremely diverse antigen-receptor repertoires, have the ability to mount specific immune responses against almost any invading ...

Flow Cytometric Analysis of Natural Killer Cell Lytic Activity in Human Whole Blood

ヒト全血中のナチュラルキラー細胞溶解活性のフローサイトメトリー分析

NK cell cytotoxicity is a widely used measure to determine the effect of outside intervention on NK cell function. However, the accuracy and ...

Detection of Inflammasome Activation and Pyroptotic Cell Death in Murine Bone Marrow-derived Macrophages

インフラマソーム活性化とマウス骨髄由来マクロファージにおける Pyroptotic の細胞死の検出

Inflammasomes are innate immune signaling platforms that are required for the successful control of many pathogenic organisms, but also promote ...

A High-throughput Platform for the Screening of Salmonella spp./Shigella spp.

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サルモネラ属菌のスクリーニングのための高スループット プラットフォーム/赤痢菌属

Fecal-oral transmission of acute gastroenteritis occurs from time to time, especially when people who handled food and water are infected by Salmonella ...