MRS hibe Kısmi destek Doğa Bilimleri ve Mühendisliği Araştırma Konseyi (NSERC) Kanada, Nöroloji Araştırma, ARC Harry Botterell Vakfı ve Garfield Kara Kardiyovasküler Araştırma ve Geliştirme Fonu. SRA Kraliçe Üniversitesi Araştırma Ödülü ve Robert J. Wilson Bursu bir alıcı. PJ Kraliçe Lisansüstü Ödülü ve Robert J. Wilson Bursu, bir alıcı. AG ve SA Kraliçe Lisansüstü Ödülü alıcıları. SF Bilim ve Teknoloji (OGSST) Ontario Yüksek Lisans Bursu layık görüldü. AG Kraliçe Franklin Bracken Lisansüstü Bursu almıştır. SA Kraliçe RS McLaughlin Yüksek Lisans Bursu almıştır.

1. Dondurulmuş Makrofaj Hücreler kurtarılıyor <ol><li> -80 Donmuş hücreleri diriltmeyi önce ° C derin dondurucu, bir ihtiyacı% 10 fetal sığır serumu (FBS) ve 5 mg / plasmocin ml ile desteklenmiş filtrelenmiş steril Dulbecco&#39;nun Modifiye Kartal Orta (DMEM) ile kültür ortamı hazırlamak için. Plasmocin araştırma hücre kültürlerinin mycoplasma kirlenme ortadan kaldırmak ve önlemek için kullanılan bir antibiyotik çözümdür. </li><li> Donmuş hücreleri bir flakon için, bir 4 ml, 1 ml ste...

<ol>
	<li>Amith, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neu1+desialylation+of+sialyl+alpha-2,3-linked+beta-galactosyl+residues+of+TOLL-like+receptor+4+is+essential+for+receptor+activation+and+cellular+signaling.">Neu1 desialylation of sialyl alpha-2,3-linked beta-galactosyl residues of TOLL-like receptor 4 is essential for receptor activation and cellular signaling.</a> Cell Signal. 22, 314-324 (2010).</li><li>Amith, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dependence+of+pathogen+molecule-induced+Toll-like+receptor+activation+and+cell+function+on+Neu1+sialidase.">Dependence of pathogen molecule-induced Toll-like receptor activation and cell function on Neu1 sialidase.</a> Glycoconjugate Journal. 26, 1197-1212 (2009).</li><li>Woronowicz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dependence+of+neurotrophic+factor+activation+of+Trk+tyrosine+kinase+receptors+on+cellular+sialidase.">Dependence of neurotrophic factor activation of Trk tyrosine kinase receptors on cellular sialidase.</a> Glycobiology. 17, 10-24 (2007).</li><li>Jayanth, P., Amith, S. R., Gee, K., Szewczuk, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neu1+Sialidase+and+Matrix+Metalloproteinase-9+Cross-talk+is+Essential+for+Neurotrophin+Activation+of+Trk+Receptors+and+Cellular+Signaling.">Neu1 Sialidase and Matrix Metalloproteinase-9 Cross-talk is Essential for Neurotrophin Activation of Trk Receptors and Cellular Signaling.</a> Cell. Signal. 22, 1193-1205 (2010).</li><li>Finlay, T. M., Jayanth, P., Amith, S. R., Glimour, A., Guzzo, C., Gee, K., Beyaert, R., Szewczuk, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thymoquinone+from+nutraceutical+black+cumin+oil+activates+Neu4+sialidase+in+live+macrophage,+dendritic,+and+normal+and+type+I+sialidosis+human+fibroblast+cells+via+GPCR+G&#945;i+proteins+and+matrix+metalloproteinase-9.">Thymoquinone from nutraceutical black cumin oil activates Neu4 sialidase in live macrophage, dendritic, and normal and type I sialidosis human fibroblast cells via GPCR G&#945;i proteins and matrix metalloproteinase-9.</a> Glycoconj J. 27, 329-348 (2010).</li><li>Seyrantepe, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+Phagocytosis+in+Macrophages+by+Neuraminidase+1.">Regulation of Phagocytosis in Macrophages by Neuraminidase 1.</a> Journal of Biological Chemistry. 285, 206-215 (2010).</li></ol>

Canlı makrofaj hücreleri 2 sialidase faaliyet algılamak için yeni geliştirilen testi kullanılarak, BMC-2 de canlı doza bağlı olarak makrofaj hücreleri DC-2.4 dendritik hücreler canlı ligand bağlı sialidase faaliyet sialidase aktivite tespit etmek için bu teknolojiyi kullandı HEK-TLR4/MD2, HEK293 SP1 meme adenokarsinom hücreleri, insan WT ve 1140F01 ve WG0544 tip I sialidosis fibroblast hücreleri. Tamiflu gibi nöraminidaz inhibitörleri (oseltamivir fosfat) bir IC 50 0,0194 mcM BM...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>DMEM</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco, Rockville, MD</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>4-MUNANA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Biosynth International Inc., Itasca, IL, USA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fetal calf serum</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>HyClone, Logan, Utah, USA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>DakoCytomation, Fluorescent Mounting Media</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>DAKO North America, Inc., Carpintenia, CA</td>
<td>S3023</td>
<td>15 mL</td>
</tr>
<tr>
<td>Tamiflu (Oseltamivir Phosphate)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Hoffman La Roche</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

detection of  neu1 sialidase activity in regulating toll-like receptor activation

Memeli Toll-like reseptörler (TLR), patojen ilişkili moleküler desenleri tanımaya reseptörlerinin bir aile. Sadece TLR mikrobiyal önemli sensörler (örneğin, virüs, bakteri ve parazit) enfeksiyonları, onlar da muhtemelen otoimmün hastalıklar, bulaşıcı hastalıklar, enfeksiyon hastalıkları, patofizyolojisinde önemli bir rol oynamaktadır. Böylece, şiddeti ve süresi, bulaşıcı hastalıklara karşı TLR tepkilerin sıkı kontrol edilmelidir. Bu sensör reseptörler, ligand etkileşimleri ve sinyal bileşenleri yapısal bütünlüğünü anlamak sonraki immünolojik korunması için gerekli olduğunu izler. Ayrıca sensör manipülasyon yoluyla hastalık modifikasyonu için önemli fırsatlar sağlayacaktır. TLR sensörleri sinyal yolakları iyi karakterize olmasına rağmen, parametreler sensörleri ve ligandlar hala yetersiz tanımlanmış kalır arasındaki etkileşimleri kontrol. Biz son zamanlarda, daha önce 1,2 görülmemiştir, doğal ligand TLR aktivasyonu yeni bir mekanizma tespit ettik. Bu ligand bağlı TLR aktivasyon Neu1 sialidase aktivasyonu ile sıkıca kontrol edildiğini göstermektedir. Ayrıca Neu1 sıkıca Neu1 ve matriks metalloproteinaz-9 (MMP-9) reseptörleri 4 karmaşık çapraz konuşma içeren TrkA ve TrkB 3 gibi nörotrofin reseptörleri düzenleyen bildirdin. Sialidase tahlil başlangıçta GPCR Gαi proteinleri ve MMP-9 5 üzerinden makrofajlar, dendritik hücreler ve fibroblast hücreleri hücre yüzeyinde Neu4 sialidase aktivasyonu, bir roman ligand, thymoquinone bulmak için kullanabileceğiniz olmuştur. TLR reseptörleri için, bizim veri Neu1 sialidase zaten, TLR-2, -3 ve -4 reseptörleri ile kompleks ve iki reseptör bağlayıcı ligand üzerine indüklenir göstermektedir. Aktive Neu1 sialidase hidroliz sialyl α-2 TLR-4 dimerization, MyD88/TLR4 karmaşık işe alım, NFkB aktivasyonu ve pro-inflamatuar hücre yanıtlarını sterik hinderance kaldırmak için bağlayıcı ligand uzak ,3-bağlantılı β-galactosyl artıkları. Ortak bir raporda, Neu1 sialidase 6 makrofaj hücreleri fagositoz düzenleyen gösterilmiştir. Birlikte ele alındığında, sialidase testi ligand bağlı reseptör aktivasyonu moleküler mekanizmaları güçlü yorumlarla bize sağlamıştır. Neu1 sialidase ve TLR aktivasyonu arasında kesin bir ilişki, Trk reseptörlerinin henüz tam olarak açıklanamamış olmasına rağmen, hücre düzenleme yollar öncü ya da yeni bir yaklaşımı temsil eder.

Watch this Scientific Journal Video about Detection of  Neu1 Sialidase Activity in Regulating TOLL-like Receptor Activation at JoVE.com

Detection of  Neu1 Sialidase Activity in Regulating TOLL-like Receptor Activation

Sialidase testi canlı makrofaj hücre yüzeyinde reseptör düzeyinde iltihabi hastalıklar mikrobik enfeksiyonlar ve katılımı TLR sensörleri yeni moleküler mekanizma (lar) aydınlatmak basit bir teknik yaklaşım.

Toll-like reseptör Etkinleştirme Düzenlenmesi Neu1 Sialidase Faaliyet Algılama

Mammalian Toll-like receptors (TLRs) are a family of receptors that recognize pathogen-associated molecular patterns. Not only are TLRs crucial sensors of ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Combination of Adhesive-tape-based Sampling and Fluorescence in situ Hybridization for Rapid Detection of Salmonella on Fresh Produce

Combination of Adhesive-tape-based Sampling and Fluorescence in situ Hybridization for Rapid Detection of Salmonella on Fresh Produce

Yapışkan bant tabanlı Örnekleme ve Floresans kombinasyonu In situ</emHızlı Algılama> Hibridizasyon Salmonella Taze üretin

This protocol describes a simple approach for adhesive-tape-based sampling of tomato and other fresh produce surfaces, followed by on-tape fluorescence in ...

Quantitative Imaging of Lineage-specific Toll-like Receptor-mediated Signaling in Monocytes and Dendritic Cells from Small Samples of Human Blood

Monositler ve İnsan Kan Küçük Örneklerden Dendritik Hücrelerde Lineage özgü Toll-like reseptör-aracılı Sinyali Kantitatif Görüntüleme

Individual variations in immune status determine responses to infection and contribute to disease severity and outcome.  Aging is associated with an ...

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

Ixodes scapularis Keneler gelen tükürük, Tükürük Bezi ve hemolimf Koleksiyonu

Ticks are found worldwide and afflict humans with many tick-borne illnesses. Ticks are vectors for pathogens that cause Lyme disease and tick-borne ...

Methods for Quantitative Detection of Antibody-induced Complement Activation on Red Blood Cells

Kırmızı kan hücreleri üzerinde antikor kaynaklı kompleman aktivasyon sayısal tespiti için Yöntemler

Antibodies against red blood cells (RBCs) can lead to complement activation resulting in an accelerated clearance via complement receptors in the liver ...

Activation and Measurement of NLRP3 Inflammasome Activity Using IL-1&#946; in Human Monocyte-derived Dendritic Cells

Activation and Measurement of NLRP3 Inflammasome Activity Using IL-1ÃƒÅ½Ã‚Â² in Human Monocyte-derived Dendritic Cells

Aktivasyon ve İnsan monosit türevli dendritik hücreler, IL-1β kullanarak NLRP3 Inflammasome Aktivitenin Ölçümü

Inflammatory processes resulting from the secretion of Interleukin (IL)-1 family cytokines by immune cells lead to local or systemic inflammation, tissue ...

Isolation of Murine Peritoneal Macrophages to Carry Out Gene Expression Analysis Upon Toll-like Receptors Stimulation

Fare Periton Makrofagların izolasyonu Toll-benzeri reseptörler Uyarım üzerine Gen İfadesi Analizi Yapacak

During infection and inflammation, circulating monocytes leave the bloodstream and migrate into tissues, where they differentiate into macrophages. ...

Isolation and Activation of Murine Lymphocytes

İzolasyon ve murin lenfositlerin aktivasyonu

B and T cells, with their extremely diverse antigen-receptor repertoires, have the ability to mount specific immune responses against almost any invading ...

Flow Cytometric Analysis of Natural Killer Cell Lytic Activity in Human Whole Blood

İnsan Tüm Kan Natural Killer Hücre Parçalayıcı Faaliyet Akışı Sitometrik Analizi

NK cell cytotoxicity is a widely used measure to determine the effect of outside intervention on NK cell function. However, the accuracy and ...

Detection of Inflammasome Activation and Pyroptotic Cell Death in Murine Bone Marrow-derived Macrophages

Inflammasome harekete geçirmek ve Pyroptotic hücre ölümü fare kemik iliği türevi makrofajlar içinde tespiti

Inflammasomes are innate immune signaling platforms that are required for the successful control of many pathogenic organisms, but also promote ...

A High-throughput Platform for the Screening of Salmonella spp./Shigella spp.

A High-throughput Platform for the Screening of Salmonella spp./Shigella spp.

Salmonella spp. testi ile taranması için yüksek üretilen iş platformu /Shigella spp.

Fecal-oral transmission of acute gastroenteritis occurs from time to time, especially when people who handled food and water are infected by Salmonella ...