Name: an orthotopic model of serous ovarian cancer in immunocompetent mice for in vivo tumor imaging and monitoring of tumor immune responses
Uploaded: 2010-11-28T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses at JoVE.com

وأيد هذا العمل من قبل منظمة العفو الدولية NIH P01 منح 068730 (SNC ، NS) ، ومنح CA016520 المعاهد الوطنية للصحة / TAPITMAT (NS) ، والتمويل من القطاع الخاص من مؤسسة Claneil (NS) ، والمبيض بوغ الإطارية بشأن تغير المناخ ، ومنحة لجامعة ولاية بنسلفانيا ( CA83638 P50) وفوكس تشيس للسرطان مركز الأساسية غرانت (P30 CA06927) (DCC). المؤلفان بالشكر إلى المساعدة التقنية الممتازة لمرفق كور البصرية / ضوء بارد من إخراج الدكتور EJ Delikatny في جامعة بنسلفانيا انتوني Secreto ، من الخلايا الجذعية الأساسية طعم أجنبي وإخراج G. Desnoyers - دانيه الدكتور في جامعة بنسلفانيا للسرطان مركز للتدريب لSNC تقنية الحقن مثلي وDangaj Denada في جامعة بنسلفانيا / OCRC للمساعدة في عملية جراحية.

1. خلية ثقافة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قبل الحقن مثلي ، والثقافة MOV1 خلايا كات ، والمستمدة من DR26 الأورام ، في قارورة T175 حتى انهم 90 ٪ متموجة. خطة لاستخدام 1-5000000 الخلايا في الحقن ، وهو ما سيتطلب 1 أو 2 T175 القوارير. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في ?...

<ol>
	<li>Etzioni, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+case+for+early+detection.">The case for early detection.</a> Nat Rev Cancer. 3, 243-252 (2003).</li><li>Sasaroli, D., Coukos, G., Scholler, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beyond+CA125:+the+coming+of+age+of+ovarian+cancer+biomarkers.+Are+we+there+yet.">Beyond CA125: the coming of age of ovarian cancer biomarkers. Are we there yet.</a> Future Medicine. 3, 275-288 (2009).</li><li>Anderson, G. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+Lead+Time+of+Selected+Ovarian+Cancer+Biomarkers:+A+Nested+Case+Control+Study.">Assessing Lead Time of Selected Ovarian Cancer Biomarkers: A Nested Case Control Study.</a> J Natl Cancer Inst. 102, 26-38 (2010).</li><li>Auersperg, N., Wong, A. S., Choi, K. C., Kang, S. K., Leung, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+surface+epithelium:+biology,+endocrinology,+and+pathology.">Ovarian surface epithelium: biology, endocrinology, and pathology.</a> Endocr Rev 22. , 255-288 (2001).</li><li>Dubeau, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cell+of+origin+of+ovarian+epithelial+tumours.">The cell of origin of ovarian epithelial tumours.</a> Lancet Oncol. 9, 1191-1197 (2008).</li><li>Connolly, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Female+mice+chimeric+for+expression+of+the+simian+virus+40+TAg+under+control+of+the+MISIIR+promoter+develop+epithelial+ovarian+cancer.">Female mice chimeric for expression of the simian virus 40 TAg under control of the MISIIR promoter develop epithelial ovarian cancer.</a> Cancer Res. 63, 1389-1397 (2003).</li><li>Hensley, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetic+resonance+imaging+for+detection+and+determination+of+tumor+volume+in+a+genetically+engineered+mouse+model+of+ovarian+cancer.">Magnetic resonance imaging for detection and determination of tumor volume in a genetically engineered mouse model of ovarian cancer.</a> Cancer Biol Ther. 6, (2007).</li><li>Deliolanis, N. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Performance+of+the+red-shifted+fluorescent+proteins+in+deep-tissue+molecular+imaging+applications.">Performance of the red-shifted fluorescent proteins in deep-tissue molecular imaging applications.</a> J Biomed Opt. 13, (2008).</li><li>Hoffman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+better+fluorescent+protein+for+whole-body+imaging.">A better fluorescent protein for whole-body imaging.</a> Trends Biotechnol. 26, (2008).</li><li>Shcherbo, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=far-red+fluorescent+protein+for+whole-body+imaging.">far-red fluorescent protein for whole-body imaging.</a> Nat Methods. 4, 741-746 (2007).</li><li>Fu, X., Hoffman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+ovarian+carcinoma+metastatic+models+constructed+in+nude+mice+by+orthotopic+transplantation+of+histologically-intact+patient+specimens.">Human ovarian carcinoma metastatic models constructed in nude mice by orthotopic transplantation of histologically-intact patient specimens.</a> Anticancer Res. 13, 283-286 (1993).</li><li>Kiguchi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+patient-like+orthotopic+implantation+nude+mouse+model+of+highly+metastatic+human+ovarian+cancer.">A patient-like orthotopic implantation nude mouse model of highly metastatic human ovarian cancer.</a> Clinical &amp; experimental metastasis 16. , 751-756 (1998).</li><li>Bao, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+cancer-specific+gene+expression+by+the+survivin+promoter.">Activation of cancer-specific gene expression by the survivin promoter.</a> J Natl Cancer Inst. 94, 522-528 (2002).</li><li>Connolly, D. C., Hensley, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenograft+and+Transgenic+Mouse+Models+of+Epithelial+Ovarian+Cancer+and+Non+Invasive+Imaging+Modalities+to+Monitor+Ovarian+Tumor+Growth+In+situ+-Applications+in+Evaluating+Novel+Therapeutic+Agents.+Current+Protocols+in+Pharmacology+45.">Xenograft and Transgenic Mouse Models of Epithelial Ovarian Cancer and Non Invasive Imaging Modalities to Monitor Ovarian Tumor Growth In situ -Applications in Evaluating Novel Therapeutic Agents. Current Protocols in Pharmacology 45.</a> , 1-36 .</li><li>Milne, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+analysis+of+immune+infiltrates+in+high-grade+serous+ovarian+cancer+reveals+CD20,+FoxP3+and+TIA-1+as+positive+prognostic+factors.">Systematic analysis of immune infiltrates in high-grade serous ovarian cancer reveals CD20, FoxP3 and TIA-1 as positive prognostic factors.</a> , (2009).</li></ol>

الجراحة والحقن مثلي حقن مثلي في جراب المبيض مطالب التدريب والدقة. وبالتالي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في حالة سوء الممارسة الجراحية والخبرة مع الجثث الاولى. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام الإناث تفضيل...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>DMEM-GLUTAMAX</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>10564-011</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco</td>
<td>14040</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Versene</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Lonza</td>
<td>17-711E</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Heating pad</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Deltaphase</td>
<td>39 DP</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Povidone pads</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dynarex</td>
<td>1108</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Alcohol pads</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>06-669-62</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Artificial tears ointment </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Phoenix Pharma., Inc.</td>
<td>17845-153</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ketoprofen</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fort Dodge laboratories</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>3cc/insulin syringe</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD</td>
<td>309301</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Polyg Polyglycolic Acid suture/needle (3/8 19mm)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Syneture</td>
<td>9612-31</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tissue adhesive</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Vetbond</td>
<td>3M</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vet Bactrim/ oral suspension</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Hi-tech Pharmacal</td>
<td>840823</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>IVIS-Lumina</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Caliper lifesciences</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Isofluorane</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Phoenix Pharma., Inc.</td>
<td>J108013</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fetal Bovine Serum, Qualified</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>10437036</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Penicillin/streptomycin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco</td>
<td>15140</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>TurboFP635 mammalian vector</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Evrogen</td>
<td>FP721</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>T175 flasks</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>cellstar</td>
<td>660-190</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

an orthotopic model of serous ovarian cancer in immunocompetent mice for in vivo tumor imaging and monitoring of tumor immune responses

خلفية : عادة يتم تشخيص سرطان المبيض في مرحلة متقدمة حيث نسبة حالة / وفيات مرتفعة وهكذا يظل الأكثر فتكا من جميع سرطانات الجهاز التناسلي للمرأة بين النساء في الولايات المتحدة 1،2،3. الأورام المصلية هي الأشكال الأكثر انتشارا من سرطان المبيض وراثيا على 4،5 TG - MISIIR أبوغزاله يمثل نموذج الفأر الوحيد الذي يتطور بشكل عفوي هذا النوع من الأورام. TG - MISIIR أبوغزاله الفئران أعرب SV40 تحويل المنطقة الخاضعة لسيطرة العقاقير المثبطة مولر النوع الثاني من مستقبلات (MISIIR) مروج الجين 6. وقد تم تحديد خطوط إضافية المعدلة وراثيا التي تعبر عن العلامات SV40 والتحوير ، ولكن لا تطور أورام المبيض. ورم غير الفئران المعرضة للمعرض عمر نموذجية لC57Bl / 6 الفئران وخصبة. ويمكن استخدام هذه الفئران كمتلقين طعم خيفي مسانج للخلايا السرطانية المعزولة من TG - MISIIR - TAG - DR26 الفئران. الهدف : على الرغم من التصوير الورم ممكن 7 ، الكشف المبكر عن الأورام العميقة الصعبة في الحيوانات الحية الصغيرة. لتمكين الدراسات قبل السريرية في نموذج حيواني سليمة مناعيا لسرطان المبيض المصلي ، وصفنا نموذج الفأر مسانج لهذا النوع من سرطان المبيض الذي يسمح التصوير في الجسم الحي ، ودراسات للالمكروية الورم ورم والاستجابات المناعية. طرق : أولا نحن المستمدة TAG سرطان الماوس + خط الخلية (MOV1) من ورم المبيض العفوي المقطوع في الأسبوع 26 من العمر من العمر TG - MISIIR أبوغزاله DR26. ثم ، فإننا transduced ستابلي MOV1 الخلايا مع متجه الفيروسة البطيئة TurboFP635 الثدييات التي تكود Katushka ، متحولة بعيدة للبروتين أحمر فلوري في البحر الأحمر من Entacmaea quadricolor النعمان مع الإثارة / الانبعاثات في ماكسيما 588/635 8،9،10 نانومتر. نحن مزروع orthotopically MOV1 كات في المبيض 11،12،13،14 غير الورم الفئران TG - MISIIR أبوغزاله الإناث عرضة. وأعقب تطور الورم عن طريق التصوير الضوئي في الجسم الحي والمكروية الورم كان تحليلها من قبل المناعية. المتقدمة مزروع Orthotopically MOV1 خلايا أورام المبيض كات مصلي : النتائج. يمكن MOV1 الأورام كات يمكن تصور من قبل في مجال التصوير فيفو تصل إلى ثلاثة أسابيع بعد الزرع (الشكل 1) وكانت مخترقة مع الكريات البيض ، كما لوحظ في سرطان المبيض الإنسان 15 (الشكل 2). الاستنتاجات : نحن تصف نموذجا مثلي من سرطان المبيض مناسبة للتصوير في الجسم الحي من الأورام في وقت مبكر نظرا لارتفاع درجة الحموضة في المحافظة على استقرار وصمود للضوء من Katushka في الأنسجة العميقة. نقترح استخدام هذا النموذج مسانج رواية الاصابة بسرطان المبيض لمصلي في الدراسات المجراة التصوير ورصد الاستجابات المناعية الورم والمناعية.

Watch this Scientific Journal Video about An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses at JoVE.com

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

لدراسة<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; نمو الورم ورم والمكروية ، استخدمنا نموذج الفأر مسانج ومثلي من سرطان المبيض في الحيوانات مناعيا. transduced نحن خلية الورم خط الماوس (MOV1) مع بروتين فلوري Katushka (MOV1<sup&gt; كات</sup&gt;) ، وهنا نعرض لها مثلي في زرع المبيض و<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; التصوير.

نموذج مثلي من سرطان المبيض في الفئران مصلي مناعيا ل في الجسم الحي التصوير الورم ورصد الاستجابات المناعية ورم

Background: Ovarian cancer is generally diagnosed at an advanced stage where the case/fatality ratio is high and thus remains the most lethal of all ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

Murine Model of CD40-activation of B cells

الفئران نموذج تفعيل CD40 - B من الخلايا

Research on B cells has shown that CD40 activation improves their antigen presentation capacity. When stimulated with interleukin-4 and CD40 ligand ...

An In Vitro Model for Measuring Immune Responses to Malaria in the Context of HIV Co-infection

An In Vitro Model for Measuring Immune Responses to Malaria in the Context of HIV Co-infection

ل<em&gt; في المختبر</em&gt; نموذج لقياس الاستجابات المناعية لمكافحة الملاريا في سياق الفيروس المسبب للإيدز

Malaria and HIV co-infection is a growing health priority. However, most research on malaria or HIV currently focuses on each infection individually. ...

Molecular Diffusion in Plasma Membranes of Primary Lymphocytes Measured by Fluorescence Correlation Spectroscopy

إنتشار الجزيئي في أغشية البلازما الخلايا اللمفاوية الابتدائية تقاس الإسفار الارتباط الطيفي

Fluorescence correlation spectroscopy (FCS) is a powerful technique for studying the diffusion of molecules within biological membranes with high spatial ...

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

و إيل-8 عابر نموذج الماوس المعدلة وراثيا ل<em&gt; في فيفو</em&gt; رصد طويل الأمد للردود الالتهابية

Airway inflammation is often associated with bacterial infections and represents a major determinant of lung disease. The in vivo determination of the ...

Isolation of Salmonella typhimurium-containing Phagosomes from Macrophages

Isolation of Salmonella typhimurium-containing Phagosomes from Macrophages

عزل السالمونيلا تيفيموريوم-التي تحتوي على فاجوسوميس من الضامة

Salmonella typhimurium is a facultative intracellular bacterium that causes gastroenteritis in humans. After invasion of the lamina propria, S. ...

Visualizing Intracellular SNARE Trafficking by Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy

تصور داخل الخلايا المطوقة الاتجار بواسطة عمر Fluorescence التصوير المجهري

Soluble N-ethylmaleimide sensitive fusion protein (NSF) attachment protein receptor (SNARE) proteins are key for membrane trafficking, as they catalyze ...

Characterization of Thymus-dependent and Thymus-independent Immunoglobulin Isotype Responses in Mice Using Enzyme-linked Immunosorbent Assay

وصف الاستجابات ايستب الغلوبولين المناعي تعتمد على الغدة الصعترية، والغدة الصعترية مستقلة في الفئران باستخدام مقايسة الممتز المرتبط بالانزيم

Antibodies, also termed as immunoglobulins (Ig), secreted by differentiated B lymphocytes, plasmablasts/plasma cells, in humoral immunity provide a ...

Tailoring In Vivo Cytotoxicity Assays to Study Immunodominance in Tumor-specific CD8+ T Cell Responses

Tailoring In Vivo Cytotoxicity Assays to Study Immunodominance in Tumor-specific CD8+ T Cell Responses

الخياطة في فيفو الاختبارات الخلوية لدراسة المناعي في الأورام الخاصةCD8 + T الاستجابات الخلية

Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE)-based in vivo cytotoxicity assays enable sensitive and accurate quantitation of CD8+ cytolytic T lymphocyte ...

Implantation and Monitoring by PET/CT of an Orthotopic Model of Human Pleural Mesothelioma in Athymic Mice

غرس ورصد من قبل PET/CT من نموذج المجسم من ورم الظهاره المخروطية البشرية الجنبي في الفئران Athymic

Malignant pleural mesothelioma (MPM) is a rare and aggressive tumor arising in the mesothelium that covers the lungs, the heart, and the thoracic cavity. ...

Visualization, Quantification, and Mapping of Immune Cell Populations in the Tumor Microenvironment

التصور، القياس الكمي، ورسم خرائط للخلايا المناعية في البيئة الدقيقة الورم

The immune landscape of the tumor microenvironment (TME) is a determining factor in cancer progression and response to therapy. Specifically, the density ...