Name: preparation of rat tail tendons for biomechanical and mechanobiological studies
Uploaded: 2010-07-30T17:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Rat Tail Tendons for Biomechanical and Mechanobiological Studies at JoVE.com

Denna artikel har stöd av NSERC Grant # 299.280, IRSST som ett stipendium till G. Förälder och FRSQ som en doktorand Research Award till M. Cyr. Vi tackar Yoan Lemieux-Laneville för att utföra manipulationer inspelade på video.

<html> Före varje manipulering, måste du identifiera den grupp av senor som ska användas beroende på vilka experiment du genomför och apparater till ert förfogande. För våra syften, var ventrala senor utvalda eftersom de är mindre och därmed lättare att manipulera vid mätning av tvärsnittsarea och montering dem i bioreaktor kammaren. Observera att alla instrument är autoklaveras eller steriliseras med 70% etanol. Dessutom är en sprayflaska som innehåller 70% etanol placeras br...

<ol>
	<li>Bennett, M. B., Ker, R., Dimery, N., Alexander, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+properties+of+various+mammalian+tendons.">Mechanical properties of various mammalian tendons.</a> J. Zool. Lond. A209, 537-548 (1986).</li><li>Dupuis, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> D&#233;shydratation de matrices collag&#233;niques reconstruites in vitro: effets sur les propri&#233;t&#233;s m&#233;caniques et histologiques [dissertation]. , 114-114 (1981).</li><li>Haut, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-dependent+influence+of+strain+rate+on+the+tensile+failure+of+rat+tail+tendon.">Age-dependent influence of strain rate on the tensile failure of rat tail tendon.</a> Journal of Biomechanical Engineering. 105, 296-299 (1983).</li><li>Hupp&#233;, N., Lessard, J. -. L., Langelier, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Bioreactor+Design+for+the+Mechanobiological+Study+of+Soft+Tissue+Damage+and+Repair+in+Conditions+that+Provide+the+Best+Approximation+of+Actual+Use.">A Bioreactor Design for the Mechanobiological Study of Soft Tissue Damage and Repair in Conditions that Provide the Best Approximation of Actual Use.</a> , (1985).</li><li>Langelier, E., Dupuis, D., Guillot, M., Goulet, F. &. a. m. p. ;. a. m. p., Rancourt, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cross-sectional+profiles+and+volume+reconstructions+of+soft+tissues+using+laser+beam+measurements.">Cross-sectional profiles and volume reconstructions of soft tissues using laser beam measurements.</a> J Biomech Eng. 126, 796-802 (2004).</li><li>Lee, T. Q., Woo, S. L. -. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+method+for+determining+cross-sectional+shape+and+area+of+soft+tissues.">A new method for determining cross-sectional shape and area of soft tissues.</a> J Biomech Eng. 110, 110-114 (1988).</li><li>Parent, G., Cyr, M., Cousineau-Pelletier, P., Desbiens-Blais, F. &. a. m. p. ;. a. m. p., Langelier, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+Techniques+for+the+Evaluation+of+Cross-Sectional+Area+in+Rat+Tail+Tendons+Generate+Significant+Errors.">Current Techniques for the Evaluation of Cross-Sectional Area in Rat Tail Tendons Generate Significant Errors.</a> , (1985).</li></ol>

Genom att tillämpa de experimentella procedurer, kan vi göra ett brett utbud av in vitro-studier på denna typ av vävnader. Som till exempel, var en studie om vävnad degeneration genomförs genom tillämpning av under-stimulans för att RTTS under en period av tio dagar. Varje dag, utvärderade vi vävnad mekaniska egenskaper i oförstörande stresstester avkoppling. Till slut kunde vi konstatera RTT stressen variation och därmed analysera utvecklingen av mekaniska egenskaper. <...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>D-PBS </td>
<td>Reagent</td>
<td>Wisent inc.</td>
<td>311-410-CL</td>
<td>Saline solution</td>
</tr>
<tr>
<td>Glucose </td>
<td>Reagent</td>
<td>Wisent inc. </td>
<td>609-037-EL </td>
<td>Saline solution
 1g/L</td>
</tr>
<tr>
<td>Antibiotics-antimycotics </td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen Corp.</td>
<td>15240-062 </td>
<td>Saline solution
 1%</td>
</tr>
<tr>
<td>DMEM</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen Corp.</td>
<td>12800-017</td>
<td>Culture solution</td>
</tr>
<tr>
<td>Sodium Bicarbonate</td>
<td>Reagent</td>
<td>Wisent inc.</td>
<td>600-105-CG</td>
<td>Culture solution 3.7g/L</td>
</tr>
<tr>
<td>FBS</td>
<td>Reagent</td>
<td>Wisent inc.</td>
<td>090150</td>
<td>Culture solution 10%</td>
</tr>
<tr>
<td>Antibiotics-antimycotics</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen Corp.</td>
<td>15240-062</td>
<td>Culture solution 1%</td>
</tr>
<tr>
<td>Optic Micrometer</td>
<td>Tool</td>
<td>Custom-made</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Manipulation plate</td>
<td>Tool</td>
<td>Custom-made</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Bioreactor chamber</td>
<td>Tool</td>
<td>Custom-made</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

preparation of rat tail tendons for biomechanical and mechanobiological studies

Rat svans senor (RTTS) är en gemensam biologisk modell som används i experimentella in vitro-studier inom senan fysiologi och tendinopati. Att arbeta med dessa vävnader är en utmaning eftersom de är mycket bräckliga, och fram tills nu fanns det ingen rigoröst detaljerat protokoll för deras isolering. Inför dessa utmaningar har vi utvecklat metoder och instrument för att underlätta hantering av RTTS och kontroll vävnad livskraft, sterilitet och integritet. Den här artikeln beskriver de experimentella metoder som används för att förbereda RTTS för biomekaniska och mechanobiological studier. Vårt arbete är uppdelat i fyra steg: brytning, tvärsnittsarea mätning, sköljning och lastning i bioreaktor kammaren. Vid varje steg är alla procedurer, material och manipulationer presenteras i detalj, så att de lätt kan reproduceras. Dessutom är de specifika utvecklat instrument presenteras: en manipulation plåt som används för att avskilja RTTS, till en optisk mikrometer för att placera vävnaden under tvärsnittsarea mätning och ett förankringssystem fästa RTTS på en bioreaktor. Slutligen beskriver vi de resultat som uppnåtts efter flera tester för att validera våra metoder. Genomförbarhet, sterilitet och integritet utvärderingar visar att våra rutiner är tillräckligt stränga för manipulationer av ömtåliga vävnader såsom senor råtta svans.

Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Rat Tail Tendons for Biomechanical and Mechanobiological Studies at JoVE.com

Preparation of Rat Tail Tendons for Biomechanical and Mechanobiological Studies

Den här artikeln beskriver de experimentella metoder som används för att förbereda senor råtta svans för biomekaniska och mechanobiological studier. Flera funktioner av de viktigaste stegen för att förbereda påvisas, börjar med utvinning, tvärsnittsarea mätning, sköljning och lastning i bioreaktor kammaren.

Beredning av senor Rat Tail för biomekaniska och Mechanobiological Studier

Rat tail tendons (RTTs) are a common biological model used in experimental in vitro studies in the fields of tendon physiology and tendinopathy. Working ...

Research

JoVE Journal

Biology

Windowing Chicken Eggs for Developmental Studies

Windowing hönsägg för utvecklingsstudier

The study of development has been greatly aided by the use of the chick embryo as an experimental model.  The ease of accessibility of the embryo has ...

Interview: Protein Folding and Studies of Neurodegenerative Diseases

Intervju: Protein Folding och studier av neurodegenerativa sjukdomar

In this interview, Dr. Lindquist describes relationships between protein folding, prion diseases and neurodegenerative disorders. The problem of the ...

Preparation of Rat Brain Aggregate Cultures for Neuron and Glia Development Studies

Beredning av Aggregate råtthjärna kulturer för Neuron och Glia utvecklingsstudier

An in vitro system that recapitulates the development and differentiation of progenitors into mature neurons and glia in the central nervous system (CNS) ...

Preparation and Culture of Rat Lens Epithelial Explants for Studying Terminal Differentiation

Upprättande och kultur Epithelial Råtta Lens explants för att studera terminal differentiering

The anterior surface of the ocular lens is covered by a monolayer of epithelial cells, which proliferate in an annular zone underlying the ciliary body.  ...

Mutagenesis and Functional Analysis of Ion Channels Heterologously Expressed in Mammalian Cells

Mutagenes och funktionsanalys av jonkanaler Uttryckt Heterologously i däggdjursceller

We will demonstrate how to study the functional effects of introducing a point mutation in an ion channel. We study G protein-gated inwardly rectifying ...

Preparation of Highly Coupled Rat Heart Mitochondria

Beredning av Mycket Tillsammans Rat hjärta mitokondrier

The function of mitochondria in generation of cellular ATP in the process of oxidative phosphorylation is widely recognised. During the past decades there ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

In vivo Elektroporering av Morpholinos i Regenerating Adult Zebrafish stjärtfenan

Certain species of urodeles and teleost fish can regenerate their tissues. Zebrafish have become a widely used model to study the spontaneous regeneration ...

Quantifying Single Microvessel Permeability in Isolated Blood-perfused Rat Lung Preparation

Kvantifiera Single microvessel permeabilitet i Isolerad Blod-perfusion Rat Lung Förberedelse

The isolated blood-perfused lung preparation is widely used to visualize and define signaling in single microvessels. By coupling this preparation with ...

Preparation of Rat Serum Suitable for Mammalian Whole Embryo Culture

Beredning av Rat Serum Passar Mammalian Hela Embryo Culture

Mammalian whole embryo culture (WEC) is a widely used technique for examining pharmacological toxicity in developing mouse and rat embryos and for ...

Sampling Blood from the Lateral Tail Vein of the Rat

Provtagning Blod från den laterala svansvenen av Rat

Blood samples are commonly obtained in many experimental contexts to measure targets of interest, including hormones, immune factors, growth factors, ...