Name: strategies for study of neuroprotection from cold-preconditioning
Uploaded: 2010-09-02T17:30:00
Duration: 16 min 27 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Strategies for Study of Neuroprotection from Cold-preconditioning at JoVE.com

وقد تم تمويل هذا العمل من المنح المقدمة من المعهد الوطني للاضطرابات العصبية والسكتة الدماغية (NS - 19108) ، ومؤسسة البحوث الصداع النصفي ، ومؤسسة الابيض ريتشارد P. Kraig. السيدة مارسيا P. Kraig ساعد في إعداد وسائل الإعلام والثقافة ، والحفاظ على الثقافات شريحة. نشكر يلينا جرينبرج على تعليقاتها وتنقيحات على النسخة النهائية من هذه المادة.

<ol>
	<li>Aptowicz, C. O., Kunkler, P. E., Kraig, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Homeostatic+plasticity+in+hippocampal+slice+cultures+involves+changes+in+voltage-gated+Na++channel+expression.">Homeostatic plasticity in hippocampal slice cultures involves changes in voltage-gated Na+ channel expression.</a> Brain Res. 998, 155-163 (2004).</li><li>Beattie, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+synaptic+strength+by+glial+TNFalpha.">Control of synaptic strength by glial TNFalpha.</a> Science. 295, 2282-2285 (2002).</li><li>Breder, C. D., Dewitt, D., Kraig, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+inducible+cyclooxygenase+in+rat+brain.">Characterization of inducible cyclooxygenase in rat brain.</a> J Comp Neurol. 355, 296-315 (1995).</li><li>Caggiano, A. O., Breder, C. D., Kraig, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+elevation+of+cyclooxygenase-2,+but+not+lipoxygenase,+in+regions+synaptically+distant+from+spreading+depression.">Long-term elevation of cyclooxygenase-2, but not lipoxygenase, in regions synaptically distant from spreading depression.</a> J Comp Neurol. 376, 447-462 (1996).</li><li>Caggiano, A. O., Kraig, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eicosanoids+and+nitric+oxide+influence+induction+of+reactive+gliosis+from+spreading+depression+in+microglia+but+not+astrocytes.">Eicosanoids and nitric oxide influence induction of reactive gliosis from spreading depression in microglia but not astrocytes.</a> J Comp Neurol. 369, 93-108 (1996).</li><li>Caggiano, A. O., Kraig, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prostaglandin+E2+and+4-aminopyridine+prevent+the+lipopolysaccharide-induced+outwardly+rectifying+potassium+current+and+interleukin-1beta+production+in+cultured+rat+microglia.">Prostaglandin E2 and 4-aminopyridine prevent the lipopolysaccharide-induced outwardly rectifying potassium current and interleukin-1beta production in cultured rat microglia.</a> J Neurochem. 70, 2357-2368 (1998).</li><li>Caggiano, A. O., Kraig, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prostaglandin+E+receptor+subtypes+in+cultured+rat+microglia+and+their+role+in+reducing+lipopolysaccharide-induced+interleukin-1beta+production.">Prostaglandin E receptor subtypes in cultured rat microglia and their role in reducing lipopolysaccharide-induced interleukin-1beta production.</a> J Neurochem. 72, 565-575 (1999).</li><li>Calabrese, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+therapies+for+stroke+and+traumatic+brain+injury+often+display+U-shaped+dose+responses:+occurrence,+mechanisms,+and+clinical+implications.">Drug therapies for stroke and traumatic brain injury often display U-shaped dose responses: occurrence, mechanisms, and clinical implications.</a> Crit Rev Toxicol. 38, 557-577 (2008).</li><li>Calabrese, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+stress+response+terminology:+Integrating+the+concepts+of+adaptive+response+and+preconditioning+stress+within+a+hormetic+dose-response+framework.">Biological stress response terminology: Integrating the concepts of adaptive response and preconditioning stress within a hormetic dose-response framework.</a> Toxicol Appl Pharmacol. 222, 122-128 (2007).</li><li>Calabrese, E. J., Baldwin, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hormesis:+the+dose-response+revolution.">Hormesis: the dose-response revolution.</a> Annu Rev Pharmacol Toxicol. 43, 175-197 (2003).</li><li>Hansel, N. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+CD4++T-cell+gene+expression+in+allergic+subjects+using+two+different+microarray+platforms.">Analysis of CD4+ T-cell gene expression in allergic subjects using two different microarray platforms.</a> Allergy. 63, 366-369 (2008).</li><li>Hulse, R. E., Kunkler, P. E., Fedynyshyn, J. P., Kraig, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+multiplexed+bead-based+cytokine+immunoassays+for+rat+serum+and+brain+tissue.">Optimization of multiplexed bead-based cytokine immunoassays for rat serum and brain tissue.</a> J Neurosci Methods. 136, 87-98 (2004).</li><li>Hulse, R. E., Swenson, W. G., Kunkler, P. E., White, D. M., Kraig, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monomeric+IgG+is+neuroprotective+via+enhancing+microglial+recycling+endocytosis+and+TNF-alpha.">Monomeric IgG is neuroprotective via enhancing microglial recycling endocytosis and TNF-alpha.</a> J Neurosci. 28, 12199-12211 (2008).</li><li>Hulse, R. E., Winterfield, J., Kunkler, P. E., Kraig, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Astrocytic+clasmatodendrosis+in+hippocampal+organ+culture.">Astrocytic clasmatodendrosis in hippocampal organ culture.</a> Glia. 33, 169-179 (2001).</li><li>Kraig, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TNF-alpha+and+Microglial+Hormetic+Involvement+in+Neurological+Health+and+Migraine.">TNF-alpha and Microglial Hormetic Involvement in Neurological Health and Migraine.</a> International Dose-Respose Society. , (2010).</li><li>Kunkler, P. E., Hulse, R. E., Kraig, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiplexed+cytokine+protein+expression+profiles+from+spreading+depression+in+hippocampal+organotypic+cultures.">Multiplexed cytokine protein expression profiles from spreading depression in hippocampal organotypic cultures.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 24, 829-839 (2004).</li><li>Kunkler, P. E., Hulse, R. E., Schmitt, M. W., Nicholson, C., Kraig, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+current+source+density+analysis+in+hippocampal+organotypic+culture+shows+that+spreading+depression+occurs+with+uniquely+reversing+currents.">Optical current source density analysis in hippocampal organotypic culture shows that spreading depression occurs with uniquely reversing currents.</a> J Neurosci. 25, 3952-3961 (2005).</li><li>Kunkler, P. E., Kraig, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactive+astrocytosis+from+excitotoxic+injury+in+hippocampal+organ+culture+parallels+that+seen+in+vivo.">Reactive astrocytosis from excitotoxic injury in hippocampal organ culture parallels that seen in vivo.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 17, 26-43 (1997).</li><li>Kunkler, P. E., Kraig, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+waves+precede+electrophysiological+changes+of+spreading+depression+in+hippocampal+organ+cultures.">Calcium waves precede electrophysiological changes of spreading depression in hippocampal organ cultures.</a> J Neurosci. 18, 3416-3425 (1998).</li><li>Kunkler, P. E., Kraig, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=P/Q+Ca2++channel+blockade+stops+spreading+depression+and+related+pyramidal+neuronal+Ca2++rise+in+hippocampal+organ+culture.">P/Q Ca2+ channel blockade stops spreading depression and related pyramidal neuronal Ca2+ rise in hippocampal organ culture.</a> Hippocampus. 14, 356-367 (2004).</li><li>Lambertsen, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglia+protect+neurons+against+ischemia+by+synthesis+of+tumor+necrosis+factor.">Microglia protect neurons against ischemia by synthesis of tumor necrosis factor.</a> J Neurosci. 29, 1319-1330 (2009).</li><li>Lee, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulator+of+G-protein+signaling+10+promotes+dopaminergic+neuron+survival+via+regulation+of+the+microglial+inflammatory+response.">Regulator of G-protein signaling 10 promotes dopaminergic neuron survival via regulation of the microglial inflammatory response.</a> J Neurosci. 28, 8517-8528 (2008).</li><li>Mattson, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hormesis+and+disease+resistance:+activation+of+cellular+stress+response+pathways.">Hormesis and disease resistance: activation of cellular stress response pathways.</a> Hum Exp Toxicol. 27, 155-162 (2008).</li><li>Ning, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+and+simultaneous+gene+profiling+of+84+drug-metabolizing+genes+in+primary+human+hepatocytes.">Systematic and simultaneous gene profiling of 84 drug-metabolizing genes in primary human hepatocytes.</a> J Biomol Screen. 13, 194-201 (2008).</li><li>Oppenheim, J., Feldman, M., Oppenheim, J. J., Feldman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> in Cytokine Reference. 1, (2001).</li><li>Pfaffl, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+mathematical+model+for+relative+quantification+in+real-time+RT-PCR.">A new mathematical model for relative quantification in real-time RT-PCR.</a> Nucleic Acids Res. 29, e45-e45 (2001).</li><li>Stellwagen, D., Beattie, E. C., Seo, J. Y., Malenka, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+regulation+of+AMPA+receptor+and+GABA+receptor+trafficking+by+tumor+necrosis+factor-alpha.">Differential regulation of AMPA receptor and GABA receptor trafficking by tumor necrosis factor-alpha.</a> J Neurosci. 25, 3219-3228 (2005).</li><li>Stellwagen, D., Malenka, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+scaling+mediated+by+glial+TNF-alpha.">Synaptic scaling mediated by glial TNF-alpha.</a> Nature. 440, 1054-1059 (2006).</li><li>Streit, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglia+as+neuroprotective,+immunocompetent+cells+of+the+CNS.">Microglia as neuroprotective, immunocompetent cells of the CNS.</a> Glia. 40, 133-139 (2002).</li><li>Wilde, G. J., Pringle, A. K., Sundstrom, L. E., Mann, D. A., Iannotti, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Attenuation+and+augmentation+of+ischaemia-related+neuronal+death+by+tumour+necrosis+factor-alpha+in+vitro.">Attenuation and augmentation of ischaemia-related neuronal death by tumour necrosis factor-alpha in vitro.</a> Eur J Neurosci. 12, 3863-3870 (2000).</li></ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

وتتضح أهمية أساسية مفهومين المهم ترسيم نظام إشارات خلوى المشاركة في الباردة شروط مسبقة العصبية في أرقام 6 و 7. الأولى ، هي السيتوكينات تركيز منخفض للغاية مما يشير الجزيئات في الدماغ العادي. ومع ذلك ، التغييرات الفسيولوجية تركيز خلوى لديها إمكانات هائلة لتغيير بنية الدماغ ووظيفته (أي النمط الظاهري) وذلك بسبب قدرتها على تغيير التعبير الجيني (الشكل 6). علاوة على ذلك ، والسيتوكينات زائدة للغاية وعديد المظاهر في هذا السيتوكينات متعددة يمكن أن يكون لها آثار مماثلة وخلوى واحد يمكن أن يكون لها تأثيرات متغيرة (الشكل 7). وبالتالي ، لإنشاء بدقة الفطرية ، خلوى أسس العصبية من شروط مسبقة الباردة (أو غيرها من المنبهات الفسيولوجية شروط مسبقة) ، تحليل مركب من المتغيرات ذات الصلة يجب أن يكون إشارة تحدد. ويتم إنجاز ذلك عن طريق فحص الاستراتيجيات المضاعفة. هذا سوف إنشاء خلوى &quot;توقيع&quot; شروط مسبقة الباردة العصبية. <img src="/files/ftp_upload/2192/2192fig6.jpg" alt="الشكل 6" /> الشكل 6. قوة إشارات خلوى الدماغ. الرسوم التوضيحية ينقل القوة الهائلة يشير تركيزات الفسيولوجية للدماغ السيتوكينات بالمقارنة مع نظرائهم من تركيزات المعترف بها جيدا الأخرى. ويمثل التركيز على عكس المسافة ، بدءا الطولي القط واحدة كنقطة مرجعية. الصوديوم (10 م -1 يتضح من حبة من الفلفل) والبوتاسيوم (10 م -3 يتضح من الطماطم) موجودة في الفضاء في الدماغ خلالي في مستويات حول 150 و 3 ملم ، على التوالي ، ويكون جيدا في الأدوار المعترف بها وظيفة خلايا العصبية الكهربية. وبالمثل ، ودرجة الحموضة (أي ، ~ 10 -7 M مستويات من أيونات الهيدروجين وكما هو موضح 780 متر على طول بحيره في شيكاغو) والكالسيوم (أي ~ 10 -8 M مستويات كما هو موضح 7.8 كم رأيت من صورة القمر الصناعي على طول بحيره البحث في شيكاغو من ماكورميك مكان إلى نقطة الرعن في هايد بارك بالقرب من جامعة شيكاغو). بالإضافة إلى ذلك ، أصدرت العصبية خلالي الى الفضاء خلال هذه التركيزات المحلية يؤثر نشاط المنطقة من المخ. في المقابل ، يمكن السيتوكينات (كما هو موضح المسافة من الارض الى المريخ) يغير وظيفة المخ في تركيزات أكثر من عشرة ملايين مرات أقل. <img src="/files/ftp_upload/2192/2192fig7.jpg" alt="الشكل 7" /> الشكل 7. ويمكن الإشارة التفاعلية الممرات خلوى الفطرية. السيتوكينات هي زائدة عن الحاجة للغاية وعديد المظاهر في هذا السيتوكينات متعددة لها آثار مماثلة وخلوى واحد يمكن أن يكون لها آثار متباينة. هذا التنوع نابع من إشارات التفاعلية المعقدة التي تحدث على مستوى يغاندس ، والمستقبلات ، وphosphoproteins. مزيد من تعقيد ينبع من حقيقة أن المخ يتكون من أنواع مختلفة من الخلايا ، مع كل من الخلايا قادرة محددة خلوى الفطرية ، ومستقبلة ، والتغيرات بروتين فسفوري ؛ فسوبروتين ذات الصلة. لأغراض التوضيح هنا ، تظهر فقط خلوى الفطرية مسارات إشارات (المستمدة من دراسات الخلايا المناعية). عن البساطة ، ويتم رسمها في المخ مثل خلية واحدة (الخط الأبيض) تظهر التفاعلات المحتملة لالسيتوكينات الفطرية (IL - 1α و IL - 1β (المشار إليه هنا بوصفه IL - 1α / β) ، TNF - α ، IL - 6 ، الإنترفيرون γ و IL - 10) ، والمستقبلات (IL - 1R1 ، TNFR1 ، IL-6/gp130 ، IFNγR وIL - 10R) ، وphosphoproteins (أي تحركات ERK1 / 2 ، P38 (P38 - MAPK) وJNK) وعوامل النسخ (ATF - 2 ، NFκB وSTAT3). على سبيل المثال ، TNF - α عبر إشارات إلى TNFR1 JNK ، P38 MAPK وERK1 2 / ، والذي يطلق التعبير الجيني عن طريق ATF - 2. TNF - α يغير أيضا التعبير الجيني مباشرة من خلال تفعيل NFκB. معا ، وتفعيل هذه العوامل تثير زيادة النسخ (السهم) وانخفاض (نهاية حادة) التعبير عن السيتوكينات ومستقبلاتها على النحو المبين. الأهم من ذلك ، تبين أن هذه المسارات التغييرات في واحدة خلوى (مثلا ، TNF - α) إنتاج تأثير السيتوكينات (مثل IL - 1β) الأخرى. وبالتالي ، لإنشاء بدقة ، خلوى أسس العصبية من شروط مسبقة الباردة ، مصممة تحليل مركب من المتغيرات ذات الصلة يجب أن يكون إشارة. هذا سوف إنشاء الفطرية خلوى &quot;توقيع&quot; شروط مسبقة الباردة. (صورة جمعت من بيانات مرجعية # 25).

إعداد شريحة الثقافات <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم الكاشف / معدات </td><td> شركة </td><td> كتالوج / موديل </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> Millicell - CM إدراج زراعة الأنسجة (30 ملم) </td><td> الحرارية فيشر </td><td> PICM0 - 3050 </td><td></td></tr><tr><td> القاعدية متوسطة النسر </td><td> Invitrogen </td><td> 21010 </td><td></td></tr><tr><td> ايرل محلول الملح المتوازن </td><td> سيغما </td><td> E2888 </td><td></td></tr><tr><td> حصان المصل </td><td> Invitrogen </td><td> 26050-088 </td><td></td></tr><tr><td> Glutamax </td><td> Invitrogen </td><td> 35050 </td><td></td></tr><tr><td> جنتاميسين </td><td> Invitrogen </td><td> 15710-064 </td><td></td></tr><tr><td> Fungizone </td><td> Invitrogen </td><td> 15295 </td><td></td></tr><tr><td> D - غلوكوز </td><td> سيغما </td><td> G8769 </td><td></td></tr><tr><td> BSL - 1 غطاء الدخان </td><td> خباز </td><td></td><td></td></tr><tr><td> McIlwain الأنسجة المروحية </td><td> برينكمان </td><td></td><td></td></tr><tr><td> أقراص تفلون </td><td> برينكمان </td><td> 023-49-310-1 </td><td></td></tr><tr><td> ملعقة الصيدلي </td><td> الحرارية فيشر </td><td> 14-373 - 25A </td><td></td></tr><tr><td> منحني قزحية مقص </td><td> أدوات العلوم غرامة </td><td> 14091-09 </td><td></td></tr><tr><td> مقص مستقيم طويل </td><td> أدوات العلوم غرامة </td><td> 14002-14 </td><td></td></tr><tr><td> ملقط طويل </td><td> الحرارية فيشر </td><td> 13-812-40 </td><td></td></tr><tr><td> الزاوية ملقط </td><td> أدوات العلوم غرامة </td><td> 11808-02 </td><td></td></tr><tr><td> ملقط قصيرة </td><td> الحرارية فيشر </td><td> 13-812-38 </td><td></td></tr><tr><td> # 5 INOX ملقط </td><td> أدوات العلوم غرامة </td><td> 11254-20 </td><td></td></tr><tr><td> 2 ايريس spatulae </td><td> أدوات العلوم غرامة </td><td> 10094-13 </td><td></td></tr><tr><td> 150 × 15 ملم أطباق بتري </td><td> الحرارية فيشر </td><td> 08-757-148 </td><td></td></tr><tr><td> 60 × 15 مم أطباق بتري </td><td> الحرارية فيشر </td><td> 08-757 - 100B </td><td></td></tr><tr><td> M8 البرية stereomicroscope </td><td> Heerbrugg البرية </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Gey محلول الملح التوازن </td><td> سيغما </td><td> G9779 </td><td></td></tr><tr><td> BLAK راي قياس الأشعة فوق البنفسجية على الموجات القصيرة متر </td><td> UVP </td><td> J - 225 </td><td></td></tr><tr><td> 6 جيدا الأطباق فالكون الثقافة </td><td> الحرارية فيشر </td><td> 08-772 - 1B </td><td></td></tr><tr><td> Neurobasal </td><td> Invitrogen </td><td> 21103</td><td></td></tr><tr><td> B27 تكملة </td><td> Invitrogen </td><td> 17504 </td><td></td></tr><tr><td> Gem21 Neuroplex </td><td> الاحيائية الجوزاء </td><td> 400-160-010 </td><td></td></tr><tr><td> حمض الأسكوربيك </td><td> سيغما </td><td> A4544 </td><td></td></tr><tr><td> محلل CO 2 </td><td> Bacharach </td><td> # 2820 </td><td></td></tr></tbody></table> الفرز المسبق للشريحة حيوية الثقافات <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم الكاشف / معدات </td><td> شركة </td><td> كتالوج / موديل </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> Sytox الخضراء </td><td> Invitrogen </td><td> S7020 </td><td></td></tr><tr><td> DMIBRE مجهر مقلوب </td><td> لايكا </td><td></td><td></td></tr></tbody></table> الباردة شروط مسبقة <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم الكاشف / معدات </td><td> شركة </td><td> كتالوج / موديل </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> BSL - 2 الأبخرة هود </td><td> NuAire </td><td></td><td></td></tr></tbody></table> Excitotoxic الإصابات <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم الكاشف / معدات </td><td> شركة </td><td> كتالوج / موديل </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> CoolSnap FX اتفاقية مكافحة التصحر الكاميرا </td><td> Photometrics </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Fluoroscein </td><td> Invitrogen </td><td> F36915 </td><td></td></tr><tr><td> MetaMorph البرمجيات </td><td> الأجهزة الجزيئية </td><td> ضد 7.5.04 </td><td></td></tr><tr><td> 100 ميكرون عميق عدادة الكريات </td><td> Hausser العلمية </td><td></td><td></td></tr><tr><td> N - ميثيل مد اسبارتاتي </td><td> Calbiochem </td><td> 454575 </td><td></td></tr><tr><td> SigmaStat البرمجيات </td><td> Systat شركة برمجيات </td><td> ضد 3.5 </td><td></td></tr></tbody></table> شارك في العلاجات تطبيق شروط مسبقة مع الباردة <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم الكاشف / معدات </td><td> شركة </td><td> كتالوج / موديل </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> sTNFR1 </td><td> R &amp; D نظم </td><td> 425 - R1 - 050 </td><td></td></tr><tr><td> الأبقار مصل الزلال </td><td> سيغما </td><td> A - 4503 </td><td></td></tr></tbody></table> عزل الحمض النووي الريبي <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم الكاشف / معدات </td><td> شركة </td><td> كتالوج / موديل </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> RNAl العاطر </td><td> Ambion </td><td> AM7021 </td><td></td></tr><tr><td> كيت الصغيرة RNEasy </td><td> Qiagen </td><td> 74004 </td><td></td></tr><tr><td> β - المركابتويثانول </td><td> الصياد </td><td> 03446-100 </td><td></td></tr><tr><td> Diposable 1.5 ريبونوكلياز خالية المدقة </td><td> الجنوب أداة دقيقة جيرسي والعفن ، وشركة </td><td> 749521-1590 </td><td></td></tr><tr><td> RNasin </td><td> Promega </td><td> N261A </td><td></td></tr><tr><td> تريس aminomethane [hydroxymethyl] </td><td> سيغما </td><td> T3069 </td><td></td></tr><tr><td> EDTA (ملح الصوديوم ethylenediaminetetraacetic حمض هيدرات </td><td> سيغما </td><td> # E7889 </td><td></td></tr></tbody></table> RNA الكمي <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم الكاشف / معدات </td><td> شركة </td><td> كتالوج / موديل </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> RiboGreen الفحص </td><td> Invitrogen </td><td> R11491 </td><td></td></tr><tr><td> الخميرة الحمض الريبي النووي النقال </td><td> Invitrogen </td><td> 15401-011 </td><td></td></tr><tr><td> 1.5 مل أنابيب الطرد المركزي </td><td> الولايات المتحدة الأمريكية والعلم </td><td> 16155500 </td><td></td></tr><tr><td> 96 - جيدا لوحة فحص الفلورسنت </td><td> نونك </td><td> DK - 4000 </td><td></td></tr><tr><td> 96 - قارئ جيد لوحة الفلوريسنت </td><td> Tecan </td><td> سافير الثاني </td><td></td></tr></tbody></table> PCR الكمي <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم الكاشف / معدات </td><td> شركة </td><td> كتالوج / موديل </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> iScript عدة عكس النسخ </td><td> الحيوي راد </td><td> 170-8891 </td><td></td></tr><tr><td> SYBR الخضراء </td><td> Invitrogen </td><td> S7563 </td><td></td></tr><tr><td> البلاتين طق بوليميريز </td><td> Invitrogen </td><td> RNA Ultrasense 11732-927 </td><td></td></tr><tr><td> iCycler thermocycler </td><td> الحيوي راد </td><td> iCycler الوحدة البصرية </td><td></td></tr><tr><td> iCycler نظام برمجيات </td><td> الحيوي راد </td><td> ضد 3.1 </td><td></td></tr></tbody></table> PCR الكمي لميكروأرس] <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم الكاشف / معدات </td><td> شركة </td><td> كتالوج / موديل </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> ريبونوكلياز ذهاب </td><td> المنتجات الحيوية الجزيئية </td><td> # 7000 </td><td></td></tr><tr><td> RT 2 كيت ستراند الأولى </td><td> SABiosciences </td><td> C - 03 </td><td></td></tr><tr><td> SYBR الخضراء المستندة إلى مزيج PCR </td><td> SABiosciences </td><td> PA - 011 </td><td> محددة لiCycler </td></tr><tr><td> 2 RT PCR التعريف صفيف </td><td> SABiosciences </td><td> بارن - 011A </td><td></td></tr></tbody></table> البروتين الفحص <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم الكاشف / معدات </td><td> شركة </td><td> كتالوج/ موديل </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> انحلال الخلايا طقم </td><td> الحيوي راد </td><td> 171-304011 </td><td></td></tr><tr><td> Microcentrifuge </td><td> فيشر العلمية </td><td> الصغرى 7 </td><td></td></tr><tr><td> BSA البروتين الأسهم </td><td> الحيوي راد </td><td> 500-0007 </td><td></td></tr><tr><td> BCA عدة البروتين مقايسة </td><td> الحرارية العلمية </td><td> 23225 </td><td></td></tr><tr><td> 96 المناعية لوحات MicroWell </td><td> نونك </td><td> 449824 </td><td></td></tr><tr><td> ختم الشريط </td><td> الحيوي راد </td><td> 2239444 </td><td></td></tr><tr><td> 96 لوحة قارئ جيد </td><td> بيركن إلمر </td><td> 1420 - mulilabel العداد </td><td></td></tr><tr><td> Bioplex الجرذ مقايسة خلوى TNF - α </td><td> الحيوي راد </td><td> X0000001T </td><td></td></tr></tbody></table> Immunostaining <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم الكاشف / معدات </td><td> شركة </td><td> كتالوج / موديل </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> 16 ٪ لامتصاص العرق </td><td> Aesar ألفا </td><td> 43368 </td><td></td></tr><tr><td> ليسين </td><td> سيغما </td><td> L - 6001 </td><td></td></tr><tr><td> فوسفات الصوديوم </td><td> فيشر العلمية </td><td> S374 - 1 </td><td></td></tr><tr><td> الصوديوم بريودات </td><td> سيغما </td><td> S - 1878 </td><td></td></tr><tr><td> أزيد الصوديوم </td><td> سيغما </td><td> S - 2002 </td><td></td></tr><tr><td> بيروكسيد الهيدروجين (30 ٪) </td><td> سيغما </td><td> H1009 </td><td></td></tr><tr><td> مصل الماعز </td><td> كولورادو شركة المصل </td><td> CS 0920 </td><td></td></tr><tr><td> تريتون X - 100 </td><td> سيغما </td><td> T - 8787 </td><td></td></tr><tr><td> تلوين الأطباق </td><td> تيد بيلا ، شركة </td><td> 14511 </td><td></td></tr><tr><td> لوحة شاكر </td><td> مختبر الآلات الخط ، وشركة </td><td> 3520 </td><td></td></tr><tr><td> # 1 ورقات تصفية (185 ملم) </td><td> Whatman </td><td> 1001-185 </td><td></td></tr><tr><td> 3،3 - diaminobenzidine </td><td> سيغما </td><td> D8001 </td><td></td></tr><tr><td> ثنائي ميثيل سلفوكسيد </td><td> سيغما </td><td> D8418 </td><td></td></tr><tr><td> الإيثانول </td><td> Pharmco - AAPER </td><td> 111000200 </td><td></td></tr><tr><td> الزيلين </td><td> فيشر العلمية </td><td> X3S - 4 </td><td></td></tr><tr><td> Permount الإعلام تصاعد </td><td> فيشر العلمية </td><td> SP15 - 100 </td><td></td></tr><tr><td> ناظم البرد </td><td> لايكا </td><td> الطول 050 3 S </td><td></td></tr><tr><td> نسيج تيك </td><td> تيد بيلا ، شركة </td><td> 27050 </td><td></td></tr><tr><td> غرامة غيض فرشاة الدهان </td><td> تيد بيلا </td><td> 11806 </td><td></td></tr><tr><td> القلم PAP حظر </td><td> تيد بيلا ، شركة </td><td> 22309 </td><td></td></tr><tr><td> SFX إشارة محسن </td><td> Invitrogen </td><td> A31631 </td><td></td></tr><tr><td> إطالة Antifade </td><td> Invitrogen </td><td> P7481 </td><td></td></tr></tbody></table>

strategies for study of neuroprotection from cold-preconditioning

إصابة الجهاز العصبي هو سبب كثرة الأمراض والوفيات الناجمة عن التخدير العام والعمليات الجراحية ذات الصلة التي يمكن تخفيف حدتها من خلال تنمية فعالة وسهلة وآمنة لإدارة العلاجات شروط مسبقة. نحن نسعى لتحديد إشارات العصبية المسؤولة عن المناعة شروط مسبقة الباردة باعتبارها وسيلة لتحديد أهداف جديدة لتطوير علاجات لحماية الدماغ قبل ظهور الإصابات. على مستوى منخفض الموالية للالتهابات مما يشير الوسيط التغييرات على مر الزمن ضرورية لالباردة العصبية شروط مسبقة. يشير هذا يتسق مع المبادئ الأساسية لإنهاض تكييف الفسيولوجية ، والتي تتطلب أن المحفزات مهيج تصل قوته العتبة وقتا كافيا للتكيف مع المحفزات لحماية لتصبح واضحة. تبعا لذلك ، يشير الى ترسيم المناعي المشاركين في الباردة شروط مسبقة العصبية يتطلب أن النظم البيولوجية والتلاعب التجريبية بالإضافة إلى القدرات التقنية واستنساخه للغاية وحساسة. نهجنا هو استخدام شريحة الحصين الثقافات باعتباره النموذج في المختبر الذي يعكس بشكل وثيق في الجسم الحي مع نظيراتها متعددة متشابك الشبكات العصبية تتأثر macroglia ناضجة وهادئة / الدبقية الصغيرة. هذه الدولة الدبقية أهمية خاصة بالنسبة لالدبقية الصغيرة لأنها هي المصدر الرئيسي للالسيتوكينات ، والتي تعمل في نطاق femtomolar. أيضا ، يمكن الحفاظ على الثقافات شريحة في المختبر لعدة أسابيع ، وهو وقت كاف لإثارة المحفزات تفعيل وتقييم الاستجابات التكيفية. أخيرا ، يمكن التحكم بدقة الظروف البيئية باستخدام شريحة الثقافات بحيث يشير خلوى الباردة شروط مسبقة يمكن قياسه ، تحاكي ، ومنظم لتحليل الجوانب عقدة حرجة. تحليلات خلوى نظام الإشارات تتطلب استخدام تقنيات حساسة وقابلة للتكرار المضاعفة. نستخدم PCR الكمي لTNF - α إلى الشاشة لتنشيط دبقية تليها الكمية في الوقت الحقيقي qPCR فحص مجموعة لتقييم التغيرات خلوى الأنسجة واسعة. هذا الأخير هو الأكثر حساسية وسيلة لقياس متعددة استنساخه نظام إشارات خلوى التغييرات في وقت واحد. وأكد تغييرات هامة مع qPCR المستهدفة ومن ثم الكشف عن البروتين. نحن لتحقيق تغييرات على أساس النسيج باستخدام بروتين خلوى المضاعفة المقايسات تدفق microsphere cytometric Luminex باستخدام التكنولوجيا. يتم تحديد الخلية المحددة الإنتاج المزدوج خلوى مع التسمية المناعية. أخذت معا ، وهذا قد إعداد أنسجة المخ وأسلوب استخدامها ، بالإضافة إلى استراتيجيات التحقيق المقترحة ، ويكون النهج الأمثل لتحديد أهداف محتملة لتطوير علاجات جديدة يمكن أن تحاكي مزايا شروط مسبقة الباردة.

Watch this Scientific Journal Video about Strategies for Study of Neuroprotection from Cold-preconditioning at JoVE.com

Strategies for Study of Neuroprotection from Cold-preconditioning

نحن نسعى لتحديد إشارات العصبية المسؤولة عن المناعة شروط مسبقة الباردة باعتبارها وسيلة لتحديد أهداف جديدة لتطوير علاجات لحماية الدماغ قبل ظهور الإصابات. نقدم استراتيجيات العمل التي تتطلب مثل هذه النظم البيولوجية ، بالاضافة الى التلاعب التجريبية القدرات التقنية التي يتم استنساخه للغاية وحساسة.

استراتيجيات لدراسة شروط مسبقة من العصبية الباردة

Neurological injury is a frequent cause of morbidity and mortality from general anesthesia and related surgical procedures that could be alleviated by ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Laser Capture Microdissection of Drosophila Peripheral Neurons

Laser Capture Microdissection of Drosophila Peripheral Neurons

القبض على الليزر Microdissection ذبابة الفاكهة الخلايا العصبية المحيطية

The dendritic arborization (da) neurons of the Drosophila peripheral nervous system (PNS) provide an excellent model system in which to investigate the ...

Preparation of Acute Hippocampal Slices from Rats and Transgenic Mice for the Study of Synaptic Alterations during Aging and Amyloid Pathology

إعداد شرائح الحصين الحادة من الجرذان والفئران المعدلة وراثيا لدراسة التعديلات متشابك وامراض الشيخوخة خلال اميلويد

The rodent hippocampal slice preparation is perhaps the most broadly used tool for investigating mammalian synaptic function and plasticity. The ...

Vibrodissociation of Neurons from Rodent Brain Slices to Study Synaptic Transmission and Image Presynaptic Terminals

Vibrodissociation من الخلايا العصبية من الدماغ القوارض شرائح لدراسة نقل صورة متشابك ومحطات قبل المشبكي

Mechanical dissociation of neurons from the central nervous system has the advantage that presynaptic boutons remain attached to the isolated neuron of ...

Sequential Photo-bleaching to Delineate Single Schwann Cells at the Neuromuscular Junction

صور متتابعة تبيض لتحديد خلايا شوان واحدة عند تقاطع الاعصاب

Sequential photo-bleaching provides a non-invasive way to label individual SCs at the NMJ. The NMJ is the largest synapse of the mammalian nervous system ...

Membrane Potential Dye Imaging of Ventromedial Hypothalamus Neurons From Adult Mice to Study Glucose Sensing

غشاء المحتملة صبغ التصوير من بطني إنسي المهاد الخلايا العصبية من الفئران الكبار لدراسة الجلوكوز الاستشعار

Studies of neuronal activity are often performed using neurons from rodents less than 2 months of age due to the technical difficulties associated with ...

Isolation of CA1 Nuclear Enriched Fractions from Hippocampal Slices to Study Activity-dependent Nuclear Import of Synapto-nuclear Messenger Proteins

عزل CA1 النووي المخصب الكسور من شرائح الحصين لدراسة تعتمد على نشاط استيراد النووية من رسول البروتينات Synapto النووية

Studying activity dependent protein expression, subcellular translocation, or phosphorylation is essential to understand the underlying cellular ...

Real-Time Impedance-based Cell Analyzer as a Tool to Delineate Molecular Pathways Involved in Neurotoxicity and Neuroprotection in a Neuronal Cell Line

محلل خلية مقرها الممانعة الحقيقي في الوقت كأداة لتحديد المسارات الجزيئية تشارك في العصبية والحمايه العصبيه في خط الخلية العصبية

Many brain-related disorders have neuronal cell death involved in their pathophysiology. Improved in vitro models to study neuroprotective or neurotoxic ...

Organotypic Hippocampal Slice Cultures As a Model to Study Neuroprotection and Invasiveness of Tumor Cells

أورجانوتيبيك شريحة هيبوكامبال الثقافات كنموذج للدراسة نيوروبروتيكتيون واختزاع الخلايا السرطانية

In organotypic hippocampal slice cultures (OHSC), the morphological and functional characteristics of both neurons and glial cells are well preserved. ...

Time-dependent Increase in the Network Response to the Stimulation of Neuronal Cell Cultures on Micro-electrode Arrays

زيادة تعتمد على الوقت في استجابة الشبكة لتحفيز الثقافات خلية الخلايا العصبية على صفائف الدقيقة الكهربائي

Micro-electrode arrays (MEAs) can be used to investigate drug toxicity, design paradigms for next-generation personalized medicine, and study network ...

Experimental Models to Study the Neuroprotection of Acidic Postconditioning Against Cerebral Ischemia

نماذج تجريبية لدراسة الحماية العصبية من الوضعية الحمضية ضد نقص التروية الدماغية

Stroke is one of the leading causes of mortality and disability worldwide, with limited therapeutic approaches. As an endogenous strategy for ...