Name: strategies for study of neuroprotection from cold-preconditioning
Uploaded: 2010-09-02T17:30:00
Duration: 16 min 27 s
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이 작품은 국립 신경 장애 뇌졸중 연구소 (NS - 19108), 편두통 연구 재단, 그리고 리처드 P. Kraig로 화이트 재단 교부금에 의해 투자되었다. 미스 마샤 P. Kraig는 문화 매체와 슬라이스 문화의 유지 보수의 준비에 도움. 우리는이 문서의 최종 버전에 대한 그녀의 의견과 수정에 대한 옐레나 Grinberg 감사합니다.

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	<li>Aptowicz, C. O., Kunkler, P. E., Kraig, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Homeostatic+plasticity+in+hippocampal+slice+cultures+involves+changes+in+voltage-gated+Na++channel+expression.">Homeostatic plasticity in hippocampal slice cultures involves changes in voltage-gated Na+ channel expression.</a> Brain Res. 998, 155-163 (2004).</li><li>Beattie, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+synaptic+strength+by+glial+TNFalpha.">Control of synaptic strength by glial TNFalpha.</a> Science. 295, 2282-2285 (2002).</li><li>Breder, C. D., Dewitt, D., Kraig, R. 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L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglia+protect+neurons+against+ischemia+by+synthesis+of+tumor+necrosis+factor.">Microglia protect neurons against ischemia by synthesis of tumor necrosis factor.</a> J Neurosci. 29, 1319-1330 (2009).</li><li>Lee, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulator+of+G-protein+signaling+10+promotes+dopaminergic+neuron+survival+via+regulation+of+the+microglial+inflammatory+response.">Regulator of G-protein signaling 10 promotes dopaminergic neuron survival via regulation of the microglial inflammatory response.</a> J Neurosci. 28, 8517-8528 (2008).</li><li>Mattson, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hormesis+and+disease+resistance:+activation+of+cellular+stress+response+pathways.">Hormesis and disease resistance: activation of cellular stress response pathways.</a> Hum Exp Toxicol. 27, 155-162 (2008).</li><li>Ning, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+and+simultaneous+gene+profiling+of+84+drug-metabolizing+genes+in+primary+human+hepatocytes.">Systematic and simultaneous gene profiling of 84 drug-metabolizing genes in primary human hepatocytes.</a> J Biomol Screen. 13, 194-201 (2008).</li><li>Oppenheim, J., Feldman, M., Oppenheim, J. 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J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglia+as+neuroprotective,+immunocompetent+cells+of+the+CNS.">Microglia as neuroprotective, immunocompetent cells of the CNS.</a> Glia. 40, 133-139 (2002).</li><li>Wilde, G. J., Pringle, A. K., Sundstrom, L. E., Mann, D. A., Iannotti, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Attenuation+and+augmentation+of+ischaemia-related+neuronal+death+by+tumour+necrosis+factor-alpha+in+vitro.">Attenuation and augmentation of ischaemia-related neuronal death by tumour necrosis factor-alpha in vitro.</a> Eur J Neurosci. 12, 3863-3870 (2000).</li></ol>

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

냉간 preconditioning neuroprotection에 참여 시토킨 신호 시스템의 묘사에 중요한 두 가지 근본적으로 중요한 개념은 그림 6과 그림 7에 있습니다. 첫째, 크린 시토킨 정상적인 두뇌의 분자 신호를 매우 낮은 농도입니다. 그럼에도 불구하고, 생리학 시토킨 농도 변화 때문에 유전자 발현을 변경하는 능력 (그림 6)의 뇌 구조와 기능 (즉, 표현형)을 변경하는 엄청난 잠재력이 있습니다. 또한, 크린 시토킨 비​​슷한 효과와 단일 시토킨 변수 효과 (그림 7)을 가질 수있을 수 높은 중복하고 여러 크린 시토킨에 pleiotropic 있습니다. 따라서, 정확하게 차가운 - preconditioning, (또는 다른 생리 preconditioning 자극)와 관련된 신호 변수의 복합 분석 것은 결정되어야합니다에서 neuroprotection에 대한 본래 시토킨 - 기지를 설립. 이것은 멀티 플렉스 전략 분석을 통해 수행됩니다. 이것은 차가운 - preconditioning neuroprotection의 시토킨 &quot;서명&quot;을 수립합니다. <img src="/files/ftp_upload/2192/2192fig6.jpg" alt="그림 6" /> 그림 6. 두뇌 시토킨 신호의 파워. 삽화 다른 잘 인식 &#39;매쉬&#39;의 농도에 비해 뇌 크린 시토킨의 생리적 농도의 거대한 신호 전력을 전달. 농도는 기준점으로 하나의 고양이 수염으로 시작, 거리의 역수로 표현된다. 나트륨 (10 -1 M은 고추의 입자에 의해 그림)와 칼륨이 (토마토로 그림 10 -3 M) 각각 150 주변 3 MM의 수준에서 중간 뇌 공간에 존재, 및 잘 인식 역할을 신경 세포 electrophysiological 기능을 수행합니다. 마찬가지로, PH (즉, ~ 10 -7 M 수소 이온의 수준과 시카고의 레이크 프런트를 따라 780m로 그림)과 칼슘 (즉, 7.8 km는 맥코믹에서 시카고의 레이크 프런트 따라 위성 Google 이미지에서 본 그림과 같이 ~ 10 -8 M 수준 ) 시카고 대학 근처에 하이드 파크 (Hyde Park) 프로 몬 토리 포인트에 놓습니다. 또한,이 농도 이상의 중간 공간에 출시 신경 전달 물질은 현지 뇌 영역의 활동에 영향을 미칩니다. 반대로, 크린 시토킨는 (지구에서 화성의 거리로 표시) 이상의 천만 배 적은 농도에서 뇌 기능을 변경할 수 있습니다. <img src="/files/ftp_upload/2192/2192fig7.jpg" alt="그림 7" /> 그림 7. 타고난 시토킨 경로의 인터랙티브 신호. 크린 시토킨 상당히 중복하고 여러 크린 시토킨에 pleiotropic 아르 비슷한 효과를 가질 수 있으며 하나의 시토킨 변수 영향을 미칠 수 있습니다. 이러한 다양성은 리간드, 수용체, 그리고 phosphoproteins의 수준에서 발생하는 복잡한 상호 작용 신호 때문이다. 또한 복잡한 두뇌 세포 특정 타고난 시토킨, 수용체, 관련 phosphoprotein 변경 각각의 능력과 다양한 세포 유형으로 구성되어있다는 사실에서 유래. 여기에 설명을 위해 경로를 (면역 세포 연구에서 파생된) 신호에만 타고난 시토킨가 표시됩니다. 단순 들어, 두뇌는 본래 크린 시토킨에 대한 잠재적인 상호 작용을 보여주는 하나의 셀 (흰색 라인) (IL - 1α와 IL - 1β () IL - 1α / β, TNF - α, IL - 6로 여기에 언급로 그려진 것입니다 IFN - γ와 IL - 10), 수용체 (IL - 1R1, TNFR1, IL-6/gp130, IFNγR 및 IL - 10R) 및 phosphoproteins (즉, kinases ERK1 / 2, P38 (P38 - MAPK)와 JNK) 및 전사 요인 (ATF - 2, NFκB와 STAT3). ATF - 2를 통해 유전자 발현을 실행 JNK, p38 - MAPK 및 ERK1 / 2에 TNFR1 통해 예를 들어, TNF - α는 신호. TNF - α는 NFκB 활성화를 통해 직접 유전자 발현을 바꿀지도 모르겠어. 함께, 이러한 전사 인자의 활성화로 표시 크린 시토킨 및 수용체의 표현 (뭉툭한 끝) 증가 (화살표) 및 감소 보여주고 있습니다. 중요한 것은, 이러한 경로 하나 시토킨에 변화 (예를 들어, TNF - α) 다른 (예를 들어, IL - 1β) 크린 시토킨의 영향 생산을 보여줍니다. 따라서, 정확하게 차가운 - preconditioning, 관련 신호 변수의 복합 분석을 결정해야합니다에서 neuroprotection에 대한 시토킨 - 기지를 설립. 이것은 감기 - preconditioning의 본래 시토킨 &quot;서명&quot;을 수립합니다. (이미지 참조 # 25 데이터에서 컴파일되었습니다.)

슬라이스 문화의 준비 <table border="1"><tbody><tr><td> 시약 / 장비의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 / 모델 번호 </td><td> 댓글 </td></tr><tr><td> Millicell - CM 조직 문화를 삽입 (30 ㎜) </td><td> 써모 피셔 </td><td> PICM0 - 3050 </td><td></td></tr><tr><td> 기초 중간 이글 </td><td> Invitrogen </td><td> 21,010 </td><td></td></tr><tr><td> 얼의 밸런스드 소금 솔루션 </td><td> 시그마 </td><td> E2888 </td><td></td></tr><tr><td> 호스 혈청 </td><td> Invitrogen </td><td> 26050-088 </td><td></td></tr><tr><td> Glutamax </td><td> Invitrogen </td><td> 35,050 </td><td></td></tr><tr><td> Gentamicin </td><td> Invitrogen </td><td> 15710-064 </td><td></td></tr><tr><td> Fungizone </td><td> Invitrogen </td><td> 15,295 </td><td></td></tr><tr><td> D - 글루코오스 </td><td> 시그마 </td><td> G8769 </td><td></td></tr><tr><td> BSL - 1 퓸 후드 </td><td> 빵 굽는 사람 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 맥일웨인 조직 헬기 </td><td> Brinkmann </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 테플론 디스크 </td><td> Brinkmann </td><td> 023-49-310-1 </td><td></td></tr><tr><td> 주걱 </td><td> 써모 피셔 </td><td> 14-373 - 25A </td><td></td></tr><tr><td> 곡선 홍채 가위 </td><td> 파인 과학 도구 </td><td> 14091-09 </td><td></td></tr><tr><td> 롱 스트레이트 가위 </td><td> 파인 과학 도구 </td><td> 14002-14 </td><td></td></tr><tr><td> 롱 포셉 </td><td> 써모 피셔 </td><td> 13-812-40 </td><td></td></tr><tr><td> 직각 포셉 </td><td> 파인 과학 도구 </td><td> 11808-02 </td><td></td></tr><tr><td> 짧은 포셉 </td><td> 써모 피셔 </td><td> 13-812-38 </td><td></td></tr><tr><td> # 5 Inox 포셉 </td><td> 파인 과학 도구 </td><td> 11254-20 </td><td></td></tr><tr><td> 이 이리스 spatulae </td><td> 파인 과학 도구 </td><td> 10094-13 </td><td></td></tr><tr><td> 150 X 15mm 페트리 요리 </td><td> 써모 피셔 </td><td> 08-757-148 </td><td></td></tr><tr><td> 60 X 15mm 페트리 요리 </td><td> 써모 피셔 </td><td> 08-757 - 100B </td><td></td></tr><tr><td> 와일드 M8 stereomicroscope </td><td> 와일드 Heerbrugg </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Gey의 균형 소금 솔루션 </td><td> 시그마 </td><td> G9779 </td><td></td></tr><tr><td> Blak - 레이 단파 자외선 측정 미터 </td><td> UVP </td><td> J - 225 </td><td></td></tr><tr><td> 6 - 잘 팰컨 문화 요리 </td><td> 써모 피셔 </td><td> 08-772 - 1B </td><td></td></tr><tr><td> Neurobasal </td><td> Invitrogen </td><td> 21,103</td><td></td></tr><tr><td> B27 보충 </td><td> Invitrogen </td><td> 17,504 </td><td></td></tr><tr><td> Gem21 Neuroplex </td><td> 제미 Bioproducts </td><td> 400-160-010 </td><td></td></tr><tr><td> 아스코르비 산 </td><td> 시그마 </td><td> A4544 </td><td></td></tr><tr><td> CO 2 분석기 </td><td> 바카라 </td><td> # 2820 </td><td></td></tr></tbody></table> 슬라이스 문화의 활력을위한 사전 검사 <table border="1"><tbody><tr><td> 시약 / 장비의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 / 모델 번호 </td><td> 댓글 </td></tr><tr><td> Sytox 그린 </td><td> Invitrogen </td><td> S7020 </td><td></td></tr><tr><td> DMIBRE 거꾸로 현미경 </td><td> Leica </td><td></td><td></td></tr></tbody></table> 콜드 - Preconditioning <table border="1"><tbody><tr><td> 시약 / 장비의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 / 모델 번호 </td><td> 댓글 </td></tr><tr><td> BSL - 2 퓸 후드 </td><td> NuAire </td><td></td><td></td></tr></tbody></table> Excitotoxic 상해 <table border="1"><tbody><tr><td> 시약 / 장비의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 / 모델 번호 </td><td> 댓글 </td></tr><tr><td> CoolSnap FX CCD 카메라 </td><td> Photometrics </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Fluoroscein </td><td> Invitrogen </td><td> F36915 </td><td></td></tr><tr><td> MetaMorph 소프트웨어 </td><td> 분자 장치 </td><td> V. 7.5.04 </td><td></td></tr><tr><td> 100 μm의 깊이 hemacytometer </td><td> Hausser 과학 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> N - 메틸 - D - aspartate </td><td> Calbiochem </td><td> 454575 </td><td></td></tr><tr><td> SigmaStat 소프트웨어 </td><td> Systat 소프트웨어 주식 회사 </td><td> V. 3.5 </td><td></td></tr></tbody></table> 콜드 Preconditioning 적용된 공동 트리 트먼트 <table border="1"><tbody><tr><td> 시약 / 장비의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 / 모델 번호 </td><td> 댓글 </td></tr><tr><td> sTNFR1 </td><td> R &amp; D 시스템 </td><td> 425 - R1 - 050 </td><td></td></tr><tr><td> 소 혈청 알부민 </td><td> 시그마 </td><td> A - 4503 </td><td></td></tr></tbody></table> RNA 격리 <table border="1"><tbody><tr><td> 시약 / 장비의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 / 모델 번호 </td><td> 댓글 </td></tr><tr><td> RNAl ater </td><td> 앰비온 </td><td> AM7021 </td><td></td></tr><tr><td> 마이크로 RNEasy 키트 </td><td> Qiagen </td><td> 74,004 </td><td></td></tr><tr><td> β - 메르 캅 토 에탄올 </td><td> 어부 </td><td> 03446-100 </td><td></td></tr><tr><td> Diposable 1.5 RNAse - 무료 페슬 </td><td> 사우스 제르 정밀 도구 및 몰드 주식 회사 </td><td> 749521-1590 </td><td></td></tr><tr><td> RNasin </td><td> Promega </td><td> N261A </td><td></td></tr><tr><td> 트리스 [히드록시 메틸] aminomethane </td><td> 시그마 </td><td> T3069 </td><td></td></tr><tr><td> EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산) (ethylenediaminetetraacetic 산성 나트륨 소금 하이드 레이트 </td><td> 시그마 </td><td> # E7889 </td><td></td></tr></tbody></table> RNA의 양을 정함 <table border="1"><tbody><tr><td> 시약 / 장비의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 / 모델 번호 </td><td> 댓글 </td></tr><tr><td> RiboGreen 어세이 </td><td> Invitrogen </td><td> R11491 </td><td></td></tr><tr><td> 효모 tRNA </td><td> Invitrogen </td><td> 15401-011 </td><td></td></tr><tr><td> 1.5 ML 원심 분리기 튜브 </td><td> 미국 과학 </td><td> 16155500 </td><td></td></tr><tr><td> 96 - 웰 플레이트 형광 분석 </td><td> Nunc </td><td> DK - 4000 </td><td></td></tr><tr><td> 96 - 웰 플레이트 형광 판독기 </td><td> Tecan </td><td> Safire II </td><td></td></tr></tbody></table> 정량 PCR <table border="1"><tbody><tr><td> 시약 / 장비의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 / 모델 번호 </td><td> 댓글 </td></tr><tr><td> iScript 역방향 전송 키트 </td><td> 바이오 래드 </td><td> 170-8891 </td><td></td></tr><tr><td> SYBR 그린 </td><td> Invitrogen </td><td> S7563 </td><td></td></tr><tr><td> 플래티넘 DNA 형성 촉매 효소 </td><td> Invitrogen </td><td> RNA Ultrasense 11732-927 </td><td></td></tr><tr><td> iCycler thermocycler </td><td> 바이오 래드 </td><td> iCycler 광학 모듈 </td><td></td></tr><tr><td> iCycler 시스템 소프트웨어 </td><td> 바이오 래드 </td><td> V. 3.1 </td><td></td></tr></tbody></table> Microarrays에 대한 정량 PCR <table border="1"><tbody><tr><td> 시약 / 장비의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 / 모델 번호 </td><td> 댓글 </td></tr><tr><td> 어웨이 RNase </td><td> 분자 BioProducts </td><td> # 7000 </td><td></td></tr><tr><td> 알티 2 퍼스트 스트랜드 키트 </td><td> SABiosciences </td><td> C - 03 </td><td></td></tr><tr><td> SYBR 그린 기반의 PCR 믹스 </td><td> SABiosciences </td><td> PA - 011 </td><td> iCycler에 대한 특정 </td></tr><tr><td> RT PCR이 프로파일의 배열 </td><td> SABiosciences </td><td> PARN - 011A </td><td></td></tr></tbody></table> Proteomic 어세이 <table border="1"><tbody><tr><td> 시약 / 장비의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그/ 모델 번호 </td><td> 댓글 </td></tr><tr><td> 세포 용해 키트 </td><td> 바이오 래드 </td><td> 171-304011 </td><td></td></tr><tr><td> Microcentrifuge </td><td> 피셔 사이 언티픽 </td><td> 마이크로 7 </td><td></td></tr><tr><td> BSA 단백질 재고 </td><td> 바이오 래드 </td><td> 500-0007 </td><td></td></tr><tr><td> BCA 단백질 분석 키트 </td><td> 써모 과학 </td><td> 23,225 </td><td></td></tr><tr><td> 단백질 96 MicroWell 플레이트 </td><td> Nunc </td><td> 449824 </td><td></td></tr><tr><td> 실링 테이프 </td><td> 바이오 래드 </td><td> 2,239,444 </td><td></td></tr><tr><td> 96 - 웰 플레이트 리더 </td><td> 퍼어킨 엘머 </td><td> 1420 - mulilabel 카운터 </td><td></td></tr><tr><td> Bioplex 랫 TNF - α의 시토킨 분석 </td><td> 바이오 래드 </td><td> X0000001T </td><td></td></tr></tbody></table> Immunostaining <table border="1"><tbody><tr><td> 시약 / 장비의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 / 모델 번호 </td><td> 댓글 </td></tr><tr><td> 16 % Paraformaldehyde </td><td> 알파 Aesar </td><td> 43,368 </td><td></td></tr><tr><td> 라이신 </td><td> 시그마 </td><td> L - 6001 </td><td></td></tr><tr><td> 인산 나트륨 </td><td> 피셔 사이 언티픽 </td><td> S374 - 1 </td><td></td></tr><tr><td> 나트륨 periodate </td><td> 시그마 </td><td> S - 1878 </td><td></td></tr><tr><td> 나트륨 azide </td><td> 시그마 </td><td> S - 2002 </td><td></td></tr><tr><td> 과산화수소 (30 %) </td><td> 시그마 </td><td> H1009 </td><td></td></tr><tr><td> 염소 혈청 </td><td> 콜로라도 세럼 회사 </td><td> CS 0920 </td><td></td></tr><tr><td> 트리톤 X - 100 </td><td> 시그마 </td><td> T - 8787 </td><td></td></tr><tr><td> 얼룩 요리 </td><td> 테드 펠라 (주) </td><td> 14,511 </td><td></td></tr><tr><td> 플레이트 쉐이크 </td><td> 랩 - 라인 인 스트 루먼트 (주) </td><td> 3520 </td><td></td></tr><tr><td> # 1 필터 보고서 (185mm) </td><td> 워트 먼지 </td><td> 1001-185 </td><td></td></tr><tr><td> 3,3 - diaminobenzidine </td><td> 시그마 </td><td> D8001 </td><td></td></tr><tr><td> 디메틸 sulfoxide </td><td> 시그마 </td><td> D8418 </td><td></td></tr><tr><td> 에탄올 </td><td> Pharmco - AAPER </td><td> 111000200 </td><td></td></tr><tr><td> 크실렌 </td><td> 피셔 사이 언티픽 </td><td> X3S - 4 </td><td></td></tr><tr><td> Permount 설치 미디어 </td><td> 피셔 사이 언티픽 </td><td> SP15 - 100 </td><td></td></tr><tr><td> 그라 이오 스탯 </td><td> Leica </td><td> cm 3 050 S </td><td></td></tr><tr><td> 조직 테크 </td><td> 테드 펠라 (주) </td><td> 27,050 </td><td></td></tr><tr><td> 미세 팁 페인트 브러쉬 </td><td> 테드 펠라 </td><td> 11,806 </td><td></td></tr><tr><td> PAP 차단 펜 </td><td> 테드 펠라 (주) </td><td> 22,309 </td><td></td></tr><tr><td> SFX 신호 향상제 </td><td> Invitrogen </td><td> A31631 </td><td></td></tr><tr><td> Antifade을 연장 </td><td> Invitrogen </td><td> P7481 </td><td></td></tr></tbody></table>

strategies for study of neuroprotection from cold-preconditioning

신경 부상 관리가 용이​​하고 안전 preconditioning 치료 효과의 개발에 의해 완화 수있는 전신 마취와 관련 수술 절차의 병적 상태와 사망률의 자주 원인입니다. 우리는 부상 발병하기 전에 두뇌를 보호하는 치료제 개발을위한 새로운 목표를 식별하는 수단으로 추위 preconditioning에 대한 책임 신경 면역 신호를 정의하기 위해 추구합니다. 시간이 지남에 따라 변화를 신호 낮은 수준의 프로 염증 중재자 감기 - preconditioning neuroprotection을 위해 필수적입니다. 이 신호는 자극성의 자극이 분명 될 보호를위한 자극에 적응을위한 충분한 시간 임계값 크기에 도달할 것을 요구 생리 조절 hormesis의 기본 신조와 일치합니다. 따라서, 냉간 preconditioning neuroprotection에 관련된 면역 신호의 묘사는 생물 학적 시스템과 실험 조작 플러스 기술 역량이 높은 재현성과 구분이 필요합니다. 우리의 접근 방식은 밀접하게 자신의 성숙하고 정지 macroglia / microglia의 영향을 다중 시냅스 신경 네트워크와 생체내 매쉬의를 반영 체외 모델로 hippocampal 슬라이스 문화를 사용하는 것입니다. 그들이 femtomolar 범위에서 작동중인 크린 시토킨의 주요 소스되므로이 glial 상태 microglia에 특히 중요합니다. 또한, 슬라이스 문화가 몇 주 동안 체외에서 유지 될 수있는가 활성화 자극을 보여주고과 적응 반응을 평가할 수있는 충분한 시간입니다. 마지막으로, 환경 조건이 정확하게 그 시토킨가의 신호 때문에 슬라이스 문화를 사용하여 제어할 수 있습니다 추​​위 preconditioning 것은, 측정 했었 및 중요한 노드 측면을 해부하다하기 위해 변조된 수 있습니다. 시토킨 신호 시스템 분석은 민감하고 재현성 멀티 플렉스 기술의 사용을 필요로합니다. 우리는 조직 전체 시토킨 변화를 평가하는 정량 실시간 qPCR 배열 검사 다음 microglial 정품 인증 화면으로 TNF - α에 대한 양적 PCR을 사용합니다. 후자는 동시에 변화를 신호 여러 시토킨 시스템을 측정하는 가장 민감하고 재현성을 의미합니다. 중요한 변경 사항은 타겟 qPCR 그리고 단백질 감지와 함께 확인하고 있습니다. 우리는 Luminex 기술을 사용하여 다중 microsphere 흐름 cytometric assays를 사용하여 조직 기반 시토킨 단백질의 변화에​​ 대한 조사. 셀 - 특정 시토킨 생산은 이중 레이블 immunohistochemistry로 결정됩니다. 함께 촬영, 제안 조사 전략을 결합이 뇌 조직 준비 및 사용의 스타일, 차가운 - preconditioning의 장점을 모방 수있는 새로운 치료제의 개발을위한 잠재적인 목표를 식별을위한 최적의 접근법 수 있습니다.

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Strategies for Study of Neuroprotection from Cold-preconditioning

우리는 부상 발병하기 전에 두뇌를 보호하는 치료제 개발을위한 새로운 목표를 식별하는 수단으로 추위 preconditioning에 대한 책임 신경 면역 신호를 정의하기 위해 추구합니다. 우리는 생물 학적 시스템, 실험 조작 플러스 높은 재현성 및 민감 기술 용량을 필요로 이러한 작업을위한 전략을 제시한다.

콜드 preconditioning에서 Neuroprotection 연구를위한 전략

Neurological injury is a frequent cause of morbidity and mortality from general anesthesia and related surgical procedures that could be alleviated by ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Laser Capture Microdissection of Drosophila Peripheral Neurons

Laser Capture Microdissection of Drosophila Peripheral Neurons

의 레이저 캡처 Microdissection Drosophila 주변 뉴런

The dendritic arborization (da) neurons of the Drosophila peripheral nervous system (PNS) provide an excellent model system in which to investigate the ...

연구

신경과학

Preparation of Acute Hippocampal Slices from Rats and Transgenic Mice for the Study of Synaptic Alterations during Aging and Amyloid Pathology

노화와 아밀로이드 병리 동안 시냅틱 얼터 레이션의 연구에 대한 고양이와 트렌스 제닉 마우스의 급성 Hippocampal 조각의 준비

The rodent hippocampal slice preparation is perhaps the most broadly used tool for investigating mammalian synaptic function and plasticity. The ...

Vibrodissociation of Neurons from Rodent Brain Slices to Study Synaptic Transmission and Image Presynaptic Terminals

쥐 뇌 조각에서 뉴런의 Vibrodissociation는 시냅틱 전송 및 이미지 Presynaptic 터미널 공부

Mechanical dissociation of neurons from the central nervous system has the advantage that presynaptic boutons remain attached to the isolated neuron of ...

Sequential Photo-bleaching to Delineate Single Schwann Cells at the Neuromuscular Junction

연속 신경 근육 분기점에서 싱글 Schwann 세포를 윤곽을 그리다하는 사진 표백

Sequential photo-bleaching provides a non-invasive way to label individual SCs at the NMJ. The NMJ is the largest synapse of the mammalian nervous system ...

Membrane Potential Dye Imaging of Ventromedial Hypothalamus Neurons From Adult Mice to Study Glucose Sensing

막 성인 쥐에서 Ventromedial 시상 하부 뉴런의 잠재적 인 염료 이미징은 포도당 감지를 연​​구하는

Studies of neuronal activity are often performed using neurons from rodents less than 2 months of age due to the technical difficulties associated with ...

Isolation of CA1 Nuclear Enriched Fractions from Hippocampal Slices to Study Activity-dependent Nuclear Import of Synapto-nuclear Messenger Proteins

해마 조각에서 CA1 핵 농축 분획의 분리는 Synapto 핵 메신저 단백질의 활동에 의존하는 핵 가져 오기를 공부합니다

Studying activity dependent protein expression, subcellular translocation, or phosphorylation is essential to understand the underlying cellular ...

Real-Time Impedance-based Cell Analyzer as a Tool to Delineate Molecular Pathways Involved in Neurotoxicity and Neuroprotection in a Neuronal Cell Line

신경 세포주에 신경 독성과 신경에 관여하는 분자 진학의 윤곽을하는 도구로 실시간 임피던스 기반의 세포 분석기

Many brain-related disorders have neuronal cell death involved in their pathophysiology. Improved in vitro models to study neuroprotective or neurotoxic ...

Organotypic Hippocampal Slice Cultures As a Model to Study Neuroprotection and Invasiveness of Tumor Cells

Organotypic Hippocampal 슬라이스 문화 연구 Neuroprotection 및 종양 세포의 침입을 모델로

In organotypic hippocampal slice cultures (OHSC), the morphological and functional characteristics of both neurons and glial cells are well preserved. ...

Time-dependent Increase in the Network Response to the Stimulation of Neuronal Cell Cultures on Micro-electrode Arrays

미세 전극 배열에서 신경 세포 배양의 자극에 대한 네트워크 반응의 시간 의존적 증가

Micro-electrode arrays (MEAs) can be used to investigate drug toxicity, design paradigms for next-generation personalized medicine, and study network ...

Experimental Models to Study the Neuroprotection of Acidic Postconditioning Against Cerebral Ischemia

대뇌 허혈에 대한 산성 후행 조절의 신경 보호를 연구하기위한 실험 모델

Stroke is one of the leading causes of mortality and disability worldwide, with limited therapeutic approaches. As an endogenous strategy for ...