Name: specific marking of hiv-1 positive cells using a rev-dependent lentiviral vector expressing the green fluorescent protein
Uploaded: 2010-09-23T18:30:00
Duration: 9 min 53 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Specific Marking of HIV-1 Positive Cells using a Rev-dependent Lentiviral Vector Expressing the Green Fluorescent Protein at JoVE.com

העבודה נתמכה בחלקה על ידי שירות הבריאות הציבורי מענק 1R01AI081568 מ NIAID ל י.ו. ועל ידי תרומות נדיבות של תורמים הרוכבים של רייד 2009 איידס NYCDC מאורגן על ידי מ &#39;רוזן Day2 בע&quot;מ

1. Transfection של פלסמידים עבור הפקה של Rev-מותנה חלקיקים lentiviral הגדרת: Rev-GFP תלוי וקטור lentiviral, pNL-GFP-RRE-SA, תוארה בעבר 4,5,6. כדי להרכיב לתוך חלקיק נגיפי, הפלסמיד היה contransfected לתוך HEK293 בתאי T לבנות עם HIV-1 אריזה, pCMVΔ8.2 (בתנאי בחביבות על ידי ד&quot;ר Dider Trono), וכן פלסמיד שנשא את גליקופרוטאין VSV-G (pHCMV-G) . Transfection בוצע בשיטת סידן פוספט. הכנת מאגרים: 10 X בהרוורד (Hepes בופר) הוכנה על ידי המסת 5 גרם של Hepes, 8 גרם של NaCl, 0.37 גרם של KCl, 1 גרם דקסטרוז, 0.103 גרם Na 2 HPO 4 (anhydrous) ב 100 מ&quot;ל של H 2 O. The10 Aliquot X בהרוורד חיץ לתוך 1 מ&quot;ל aliquots ולאחסן ב -20 ° C. בזמן transfection, להמיר את 10 X 2 X בהרוורד כדי בהרוורד עם H 2 O (1: 5 דילול), ולהתאים את ה-pH על בין 7.05-7.12. (ל -10 מ&quot;ל 2 X בהרוורד, זה בדרך כלל דורש כ 50 μL של 1M NaOH). סנן לעקר את החיץ 2X בהרוורד על ידי עובר דרך 0.22 מיקרומטר Millipore הסינון. חיץ CaCl 2 נעשתה על ידי המסת CaCl 2 ב 10 Hepes מ&quot;מ עד 2M ריכוז הסופי. התאם ל-pH 5.8, מסנן לעקר את החיץ ולאחסן ב 4 ° C. נוהל: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יום אחד לפני transfection, זרע 2 x 10 6 תאים HEK293T ב 100 מ&quot;מ, צלחת פטרי, ולגדל תאים לילה 10 מ&quot;ל DMEM + 10% FBS על 37 מעלות צלזיוס, 5% CO 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למחרת, להסיר supernatant מתאי ולהחליף עם 5 מ&quot;ל טרי DMEM + 10% FBS, התרבות תאים ברציפות במשך 4 שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בתוך צינור קלקר 5 מ&quot;ל, להוסיף 480 μL חיץ 2X בהרוורד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בתוך צינור פוליסטירן השני 5 מ&quot;ל, להוסיף 60 μL 2M CaCl 2 חיץ, ה-DNA פלסמיד, ו transfection TE חיץ (1 mM טריס, 25 mM EDTA, pH 8.0) עד נפח כולל של 480 μL. עבור צלחת פטרי כל פלסמידים יש להוסיף ביחס של 10 מיקרוגרם של pNL-GFP-RRE-SA, 7.5 מיקרוגרם של pCMVΔR8.3, ו 2.5 מ&quot;ג של pHCMV-G. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מוסיפים את פלסמיד דנ&quot;א CaCl 2 dropwise תערובת של הצינור 2 בהרוורד X, דגירה בטמפרטורת החדר למשך 30 דקות. המשקע בסדר יהוו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מוסיפים את μL 960 של התערובת dropwise ידי פיפטה אל התאים. לדגור על 37 ° C CO, 5% 2 לילה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למחרת, להסיר את supernatant ולהוסיף טרי 10 מ&quot;ל DMEM + 10% FBS, ברציפות דגירה התאים ב 37 ° C CO, 5% 2 לילה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בשלב transfection 48 שעות לכתוב, הקציר וירוס על ידי הסרת supernatant והעברתו לתוך צינורות 50 מ&quot;ל סטרילי. הוסף 10 מ&quot;ל טרי טרי DMEM FBS + 10% לתוך צלחת פטרי כל ולהמשיך תרבות בין לילה. חנות supernatant וירוס ב 4 ° C. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המשך הקציר transfection 72 שעות שלאחר ידי איסוף supernatant. מערבבים את כל supernatants ו בצנטריפוגה supernatants XG ב 500 במשך 15 דקות כדי גלולה ולסלק פסולת התא. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Supernatant נאספו מסונן באמצעות מסנן Millipore 0.22 מיקרומטר. הווירוס היה מרוכז יותר באמצעות גודל הדרה עמודות. </li></ol> 2. תתרכז חלקיקים נגיפיים ולקבוע titer ויראלי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חלקיקים נגיפיים רוכזו על ידי טור בגודל הרחקה (100,000 מגוואט מנותקים, Centricoin). Supernatant ויראלי נטען לתוך הטור, ו centrifuged XG ב 6000 ב 4 מעלות צלזיוס במשך 15 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Supernatant ויראלי מרוכז נאסף, aliquoted, ומאוחסנים ב -80 ° C. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Titer ויראלי נקבע על ידי זיהום של TNF-שטופלו, HIV-1 קו התא חיובי Jacket, J1.1 7. היו תאים בתרבית בצלחת 96 גם ב 2.5 x 10 5 תאים לכל מ&quot;ל (100 מ&quot;ל סה&quot;כ נפח), וכן נגוע 100 מ&quot;ל של דילול סדרתי vNL-GFP-RRE-SA במשך שבוע. כייל (TCID50) של החלקיקים הוערך על ידי ספירת בארות GFP חיובית בעקבות השיטה של ​​ריד Muench 8. </li></ol> 3. סימון HIV-1 תאים חיובי עם החלקיקים lentiviral, vNL-GFP-RRE-SA הגדרת: תא T מסוג CD4 אנושי קו, CEM-SS, היה נגוע הראשון עם HIV-1. ב 48 השעות שלאחר הזיהום, התאים היו superinfected עם חלקיקי lentiviral, vNL-GFP-RRE-SA. בעקבות superinfection עוד יומיים, GFP חיובי תאים נותחו על ידי cytometry הזרימה. כמו שליטה, HIV-1 נגוע CEM-SS התאים נדבקו זהה עם vNL-GFP-RRE-SA. רק ב-HIV-1-נגועים CEM-SS תאים הולידה את ה-GFP בתאים חיוביים אך לא HIV-1 נגוע CEM-SS תאים. נוהל: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שעתיים לפני ההדבקה, להוסיף polybrane לריכוז סופי 4 מ&quot;ג / מ&quot;ל. ספירת תאים ולקחת 2 x 10 5 תאים עבור כל זיהום. להדביק תאים עם נ&quot;ג 200 (p24) של HIV-1-3 NL4 למשך 2 שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כביסה תאים על ידי צנטריפוגה XG ב 300 במשך 10 דקות, resuspendתאים לתוך 2 x 10 5 תאים / מ&quot;ל, והתרבות 37 מעלות צלזיוס למשך 48 שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ספירת תאים ולקחת 2 x 10 5 תאים לכל זיהום vNL-GFP-RRE-SA. מוסיפים 100 מ&quot;ל של vNL-GFP-RRE-SA ו לדגור על 37 מעלות צלזיוס למשך הלילה. שטפו תאים resuspend לתוך 2 x 10 5 תאים / מ&quot;ל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע ניתוח תזרים cytometry ב superinfection 48 שעות הודעה. תאים נגועים היו pelleted ו resuspended לתוך paraformaldehede 500 מ&quot;ל 1%, מודגרות בטמפרטורת החדר למשך 20 דקות, ניתח אז על נתח FACScan (בקטון דיקנסון). </li></ol> 4. נציג תוצאות אם הניסויים מבוצעים בהצלחה, אוכלוסייה גדולה של GFP יזוהו בתאים HIV-1-נגועים CEM-SS על ידי cytometer את הזרימה, בעוד שליטה, התאים GFP חיובי לא יזוהו ב HIV-1 נגוע CEM-SS תאים. אם הניסויים מבוצעים בהצלחה, וקטור Rev-מותנה lentiviral, vNL-GFP-RRE-SA, יאפשר זיהוי ספציפי מאוד של איידס משכפלים לחיות אוכלוסיות תאים, באמצעות מדידה של חלבון פלואורסצנטי ירוק הביטוי (GFP). בדוגמה זו, שנקטפו CEM-SS תאים הוכתמו נוגדן PE-שכותרתו עכברוש חד שבטי כנגד CD24 העכבר, HSA, ונותחו לאחר מכן על cytometer זרימה הן HSA וביטוי GFP. <img src="/files/ftp_upload/2198/2198fig1.jpg" alt="איור 1" /> באיור 1. כפי שמוצג כאן, אוכלוסייה גדולה של GFP זוהה HIV-1-נגועים בתאי superinfected עם vNL-GFP-RRE-SA (איור 1 ג&#39;). לעומת זאת, התאים GFP חיובי לא התגלו או CEM-SS תאים HIV-1 נגוע ללא superinfection lentiviral (איור 1 א) או HIV-1 לתאים נגוע עם superinfection lentiviral (איור 1b).

<ol>
	<li>Garcia, J. A., Wu, F. K., Mitsuyasu, R., Gaynor, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interactions+of+cellular+proteins+involved+in+the+transcriptional+regulation+of+the+human+immunodeficiency+virus.">Interactions of cellular proteins involved in the transcriptional regulation of the human immunodeficiency virus.</a> EMBO Journal. 6, 3761-3770 (1987).</li><li>Merzouki, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV-1+gp120/160+expressing+cells+upregulate+HIV-1+LTR+directed+gene+expression+in+a+cell+line+transfected+with+HIV-1+LTR-reporter+gene+constructs.">HIV-1 gp120/160 expressing cells upregulate HIV-1 LTR directed gene expression in a cell line transfected with HIV-1 LTR-reporter gene constructs.</a> Cell Mol Biol (Noisy-le-grand. 41, 445-452 (1995).</li><li>Aguilar-Cordova, E., Chinen, J., Donehower, L., Lewis, D. E., Belmont, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+sensitive+reporter+cell+line+for+HIV-1+tat+activity,+HIV-1+inhibitors,+and+T+cell+activation+effects.">A sensitive reporter cell line for HIV-1 tat activity, HIV-1 inhibitors, and T cell activation effects.</a> AIDS Res Hum Retroviruses. 10, 295-301 (1994).</li><li>Wu, Y., Beddall, M. H., Marsh, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rev-dependent+lentiviral+expression+vector.">Rev-dependent lentiviral expression vector.</a> Retrovirology. 4, 12-12 (2007).</li><li>Wu, Y., Beddall, M. H., Marsh, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rev-dependent+indicator+T+cell+line.">Rev-dependent indicator T cell line.</a> Current HIV Research. 5, 395-403 (2007).</li><li>Young, J., Tang, Z., Yu, Q., Yu, D., Wu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+killing+of+HIV-1-positive+macrophages+and+T+Cells+by+the+Rev-dependent+lentivirus+carrying+anthrolysin+O+from+Bacillus+anthracis.">Selective killing of HIV-1-positive macrophages and T Cells by the Rev-dependent lentivirus carrying anthrolysin O from Bacillus anthracis.</a> Retrovirology. 5, 36-36 (2008).</li><li>Perez, V. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+HIV-1-infected+T+cell+clone+defective+in+IL-2+production+and+Ca2++mobilization+after+CD3+stimulation.">An HIV-1-infected T cell clone defective in IL-2 production and Ca2+ mobilization after CD3 stimulation.</a> Journal of Immunology. 147, 3145-3148 (1991).</li><li>Reed, L. J., Muench, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+of+estimating+fifty+percent+endpoints.">A simple method of estimating fifty percent endpoints.</a> American Journal of Hygiene. 27, 493-497 (1938).</li></ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

כמו עם תאת תלויי וקטורים התפתחה בשלב מוקדם יותר ביטוי, מערכת Rev המתואר כאן הוא ניצול של תהליך התפתח HIV. הכללת Rev-התלות הופכת את וקטור מבוססי LTR הביטוי תלויה מאוד בנוכחות של שכפול ה-HIV. היישום של וקטור זה כפי שדווח כאן, וירוס ה-HIV תלויי הכתב, מציעה גישה חדשה הרומן לזהות נשאי HIV לתאים. וקטור מאפשר בדיקה של תאים חיים, יכול לבטא את כל הגן לניסויים בסיסי או קליני, כמו lentivirus פסאודו הקלדת יש גישה סוגי תאים ורקמות ביותר.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Biosafety Cabinet</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>37&deg;C 5%CO2 incubator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Flow cytometer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>FACSCalibur</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Centrifuge</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Beckman</td>
<td>Allega&trade;6KR</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>4&deg;C regrigerator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>-20&deg;C refrigerator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td> -80&deg;C refrigerator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Cell counter</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Nexcelom</td>
<td>Cellometer&trade; AutoT4</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>HEK293T cell line</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>NIH</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>CEM-SS cell line</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>NIH</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Jurkat cell line J1.1</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>NIH</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>DMEM</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>11965-118</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>RPMI 1640</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>21870</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>HI FBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>10438-018</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>HIV-1NL4-3</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>prepared by tranfsection of HeLa cells with cloned proviral DNA</td>
</tr>
<tr>
<td>pNL-GFP-RRE</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>copmlete deletion of all HIV ORFs of pNL4-3</td>
</tr>
<tr>
<td>pNL-GFP-RRE-SA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Insert HIV-1 A5 and D4 into pNL-GFP-RRE</td>
</tr>
<tr>
<td>pCMV&Delta;8.2</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>provided by Dr. Dider Trono</td>
</tr>
<tr>
<td>pHCMV-G</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>10 x HBS (Hepes Buffered Saline)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>11344-041</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>2M CaCl2 buffer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>S-013-154-10</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>1% paraformaldehy</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma Aldrich</td>
<td>158127</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Bleach</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>50ml Falcon tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD Bioscience</td>
<td>358206</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>5ml round bottom tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD Bioscience</td>
<td>352063</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>0.45&mu;M Millipore filter</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Millipore</td>
<td>SLHA033SS</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>0.20&mu;M Millipore filter</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Millipore</td>
<td>SLFG85000</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>100mm Petri-dish</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma Aldrich</td>
<td>CLS430588</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Size-exclusion column (100,000MW cut off)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>SartoriuStedim biotech</td>
<td>VS2041</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>2ml frozen tube</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Axygen</td>
<td>SCT-200</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>96-well plate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD Bioscience</td>
<td>353227</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>1.7mL Microcentrifuge Tube</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Axygen</td>
<td>MCT- 175-C</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

specific marking of hiv-1 positive cells using a rev-dependent lentiviral vector expressing the green fluorescent protein

רוב HIV-תגובה וקטורים ביטוי מבוססים על האמרגן HIV, לחזור מסוף ארוך (LTR). בעוד מגיבים חלבון ה-HIV מוקדם, תאת, LTR הוא גם מגיב למצבים ההפעלה הסלולרית לפעילות הכרומטין המקומי שבו האינטגרציה התרחשה. זה יכול לגרום ל-HIV פעילות עצמאית גבוהה, הגביל את השימושיות של הכתב LTR מבוססי תאים סימן נשאיות 1,2,3. הנה, אנחנו נבנה וקטור ביטוי lentiviral שיש לה, בנוסף LTR תאת-תגובה, מספר רב של רצפי דנ&quot;א HIV הכוללים את אלמנט Rev-HIV בתגובה אתרי שחבור 4,5,6. וקטור שולב וירוס כתב lentiviral, המתיר גילוי ספציפי מאוד של שכפול ה-HIV בקרב אוכלוסיות תא חי. הפעילות של וקטור נמדדה על ידי ביטוי של חלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP). היישום של וקטור זה כפי שדווח כאן מציעה גישה חלופית הרומן השיטות הקיימות, כגון PCR באתרו או מכתים HIV אנטיגן, לזהות נשאי HIV לתאים. וקטור יכול גם לבטא גנים טיפוליים לניסויים קליניים בסיסיים או למקד נשאי HIV לתאים.

Watch this Scientific Journal Video about Specific Marking of HIV-1 Positive Cells using a Rev-dependent Lentiviral Vector Expressing the Green Fluorescent Protein at JoVE.com

Specific Marking of HIV-1 Positive Cells using a Rev-dependent Lentiviral Vector Expressing the Green Fluorescent Protein

פיתחנו וקטור lentiviral שיש לה, בנוסף LTR תאת מגיב, את אלמנט Rev-תגובה (RRE) כי ניתן לווסת את ביטוי הגן הכתב בצורה HIV-1 ו-תאת Rev-מותנה. וקטור מאפשר את זיהוי ספציפי של שכפול HIV בתאים חיים באמצעות ביטוי ה-GFP.

סימון ספציפיות של HIV-1 תאים חיוביים באמצעות וקטור Rev-מותנה lentiviral מבטא את חלבון פלואורסצנטי ירוק

Most of HIV-responsive expression vectors are based on the HIV promoter, the long terminal repeat (LTR). While responsive to an early HIV protein, Tat, ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Genotypic Inference of HIV-1 Tropism Using Population-based Sequencing of V3

הסקה Genotypic של כמיהות HIV-1 שימוש אוכלוסייה מבוססת רצף של V3

Background: Prior to receiving a drug from CCR5-antagonist class in HIV therapy, a patient must undergo an HIV tropism test to confirm that his or her ...

Prediction of HIV-1 Coreceptor Usage (Tropism) by Sequence Analysis using a Genotypic Approach

Prediction of HIV-1 Coreceptor Usage Tropism by Sequence Analysis using a Genotypic Approach

ניבוי של שימוש בנגיף HIV-1 Coreceptor (זיקה) על ידי ניתוח רצף באמצעות גישת genotypic

Maraviroc (MVC) is the first licensed antiretroviral drug from the class of coreceptor antagonists. It binds to the host coreceptor CCR5, which is used by ...

In vitro Uncoating of HIV-1 Cores

In vitro Uncoating of HIV-1 Cores

ב Uncoating במבחנה של HIV-1 ליבות

The genome of the retroviruses is encased in a capsid surrounded by a lipid envelope. For lentiviruses, such as HIV-1, the conical capsid shell is ...

New Tools to Expand Regulatory T Cells from HIV-1-infected Individuals

כלים חדשים כדי להרחיב תאי T רגולטוריים מאנשים HIV-1 נגוע-

CD4+ Regulatory T cells (Tregs) are potent immune modulators and serve an important function in human immune homeostasis. Depletion of Tregs has led to ...

Assessing the Innate Sensing of HIV-1 Infected CD4+ T Cells by Plasmacytoid Dendritic Cells Using an Ex vivo Co-culture System.

Assessing the Innate Sensing of HIV-1 Infected CD4+ T Cells by Plasmacytoid Dendritic Cells Using an Ex vivo Co-culture System.

הערכת חישה המולדת של CD4 הנגוע ב- HIV-1<sup&gt; +</sup&gt; T תאים על ידי תאים דנדריטים Plasmacytoid שימוש<em&gt; Ex vivo</em&gt; עמית תרבות מערכת.

HIV-1 innate sensing requires direct contact of infected CD4+ T cells with plasmacytoid dendritic cells (pDCs). In order to study this process, the ...

Conformational Evaluation of HIV-1 Trimeric Envelope Glycoproteins Using a Cell-based ELISA Assay

הערכת קונפורמציה של HIV-1 trimeric מעטפת גליקופרוטאינים שימוש ELISA Assay מבוסס Cell

HIV-1 envelope glycoproteins (Env) mediate viral entry into target cells and are essential to the infectious cycle. Understanding how those glycoproteins ...

Isolation of Exosomes from the Plasma of HIV-1 Positive Individuals

בידוד של Exosomes מהפלזמה של HIV-1 אנשים חיוביים

Exosomes are small vesicles ranging in size from 30 nm to 100 nm that are released both constitutively and upon stimulation from a variety of cell types. ...

SILAC Based Proteomic Characterization of Exosomes from HIV-1 Infected Cells

אפיון proteomic SILAC מבוסס של Exosomes מ- HIV-1 תאים נגועים

Proteomics is the large-scale analysis of proteins. Proteomic techniques, such as liquid chromatography tandem mass spectroscopy (LC-MS/MS), can ...

Dextran Enhances the Lentiviral Transduction Efficiency of Murine and Human Primary NK Cells

לתוספי משפר את היעילות התמרה חושית Lentiviral של תאי NK העיקרי מאתר ואנושי

The efficient transduction of specific genes into natural killer (NK) cells has been a major challenge. Successful transductions are critical to defining ...

Induction of Paralysis and Visual System Injury in Mice by T Cells Specific for Neuromyelitis Optica Autoantigen Aquaporin-4

אינדוקציה של שיתוק ופציעה מערכת הראייה אצל עכברים מאת T תאים ספציפיים עבור אופטיקה Neuromyelitis Autoantigen Aquaporin-4

While it is recognized that aquaporin-4 (AQP4)-specific T cells and antibodies participate in the pathogenesis of neuromyelitis optica (NMO), a human ...