Name: feeder-free adaptation, culture and passaging of human ips cells using complete knockout serum replacement feeder-free medium
Uploaded: 2010-07-15T17:00:00
Duration: 8 min 29 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Feeder-Free Adaptation, Culture and Passaging of Human IPS Cells using Complete KnockOut Serum Replacement Feeder-Free Medium at JoVE.com

Примечание: Для поддержания стерильных условиях культуры, все процедуры в данном протоколе проводятся с использованием стерильной лабораторной практики и проводится в соответствии ламинарном боксе. Перед началом, убедитесь, что любые средства массовой информации находится в равновесии до 37 ° С и надлежащим образом в газовых камерах. Подготовка Geltrex покрытием Блюда культуры Примечание: см. приложение для использования CELLstart покрытием блюда культуры <ol><li> Оттепель одна трубка Geltrex (1 мл) медленно при температуре 2-8 ° С и разбавленных 1:100 она в 99 мл Нокаут D-MEM/F-12. Смешайте раствор нежно. Примечание: Некоторые линий плюрипотентных клеток могут требовать различные разведения Geltrex для оптимального роста. См. приложение для альтернативного разведения. </li><li> Обложка всей поверхности каждой культуры блюдо с решением Geltrex (1 мл на 35-мм блюдо, 1,5 мл для 60-мм блюдо). </li><li> Печать каждое блюдо с парафильмом для предотвращения высыхания и инкубировать блюда в течение 1 часа при температуре 37 ° C. Примечание: На данном этапе вы можете хранить Geltrex покрытием блюда культуры при 4 ° С в течение 1 месяца. Печать каждое блюдо с парафильмом для предотвращения Geltrex от высыхания. </li><li> Перед началом использования, передачи Geltrex покрытием блюда ламинарном боксе и позволит им, чтобы уравновесить до комнатной температуры (около 1 часа). </li></ol> Подготовка Полное питатель-Free SR KnockOut среднего <ol><li> Для приготовления 1 мл 10 мкг / мл Базовое решение FGF, асептически смесь компонентов, перечисленных ниже. Алиготе решение и хранить при температуре -20 ° С до 6 месяцев. <table border="0"><tbody><tr><td> Основные FGF </td><td> 10 мкг </td></tr><tr><td> D-PBS </td><td> 990 мкл </td></tr><tr><td> 10% BSA </td><td> 10 мкл </td></tr></tbody></table> Примечание: BSA может быть заменен или HSA Нокаут SR на той же концентрации. </li><li> Для подготовки 50 мл 2 мг / мл Dispase решение, асептически смесь компонентов, перечисленных ниже. Фильтры стерилизации раствора и хранить при 4 ° С в течение 2 недель. <table border="0"><tbody><tr><td> Dispase </td><td> 100 мг </td></tr><tr><td> D-PBS </td><td> 50 мл </td></tr></tbody></table></li><li> Для подготовки 100 мл полной SR KnockOut питатель-Free (KSR-FF) среду асептически объединить компоненты, перечисленные в таблице ниже. <table border="1"><tbody><tr><td> Компонент </td><td> Концентрация сток </td><td> Конечная концентрация </td><td> Объем </td></tr><tr><td> Нокаут DMEM/F12 (кат. нет. 12660-012) </td><td> - </td><td> 1X </td><td> 76,8 мл </td></tr><tr><td> GlutaMAX-I (кат. № 35050-061) </td><td> 200 мМ </td><td> 2 мМ </td><td> 1 мл </td></tr><tr><td> KnockOut SR (кат. нет. 10828-028) </td><td> - </td><td> 20% </td><td> 20 мл </td></tr><tr><td> KnockOut SR-GFC (кат. нет. A10580-01) </td><td> 50X </td><td> 1X </td><td> 2 мл </td></tr><tr><td> bFGF (кат. нет. PHG0024) </td><td> 10 мкг / мл </td><td> 20 нг / мл </td><td> 200 мкл </td></tr></tbody></table> Вы можете хранить KSR-FF среде при температуре 2-8 ° С не более одной недели. </li><li> Перед предварительно уравновешивающая полной среде с температурой и газами, асептически добавить необходимый объем 2 меркаптоэтанол (55 мМ фондовом концентрация) для 0,1 ммоль конечной концентрации. Например, чтобы подготовить 100 мл KSR-FF средний добавить 182 мкл 55 мМ 2-меркаптоэтанол (1:550 разведение) Кроме того, 2-меркаптоэтанол могут быть добавлены к 1X завершены средние и хранить при температуре 2-8 ° С в течение до одной недели. </li></ol> Адаптация к iPSCs KSR-FF среднего <ol><li> Перед началом, предварительно уравновешиваются ваш Geltrex покрытием блюд до комнатной температуры в капюшон. </li><li> Культура iPSCs на клетки MEF подачи, пока они не 70-80% вырожденная. Пожалуйста, обратитесь к GIBCO мышиных эмбриональных фибробластов пособие для MEF протоколы на основе культуры. </LI&gt; <li> Предварительно теплой необходимый объем Dispase в 37 ° С водяной бане. См. Таблицу 1 ниже для деталей относительно объемов требуется. </li><li> Предварительно равновесие необходимый объем KSR-FF в 37 ° С водяной бане for15 мин. См. Таблицу 1 ниже для деталей относительно объемов требуется. </li><li> Аспирируйте среды от культуры блюд, а также добавить соответствующее количество Dispase решение. Инкубируйте блюда при температуре 37 ° С в течение 3-5 минут. </li><li> Аспирируйте Dispase решения от каждой культуры судна и смыть клетки MEF подачи осторожно D-PBS (от 2 до 3 раза). </li><li> Добавить соответствующей суммы полной среды SR KnockOut к каждой культуры судна. Используйте скребок ячейки или 5 мл пипетки, чтобы мягко очистить клетки с поверхности сосуда для культивирования. Примечание: см. Приложение альтернативные протоколы адаптации трудно адаптироваться плюрипотентных клеточных линий, </li><li> Сбор клеточной суспензии из каждой культуры блюдо на отдельные 15 мл конические пробирки. Промыть каждую культуру сосуд с соответствующим количеством полной среде SR нокаутом, и добавить D-PBS промыть среды в 15 мл конические пробирки, содержащие суспензии клеток. Будьте осторожны, чтобы не сломать ячейки сгустки в одиночных камерах </li><li> Центрифуга 15 мл конические пробирки при 200 мкг в течение 5 минут, чтобы гранулы iPSCs. </li><li> Аспирируйте супернатант из IPSC гранул. Ресуспендируют пеллет в соответствующее количество KSR-FF среды согласно коэффициенту распределения (табл. 1). Не разбивайте ячейки сгустки до меньшего размера, потому что меньшие сгустки не придают скважины на поверхность. Примечание: Мы рекомендуем разделить соотношении 1:2 в течение первых 3 места после iPSCs были пассировали непосредственно из культуральной среды IPSC MEF для KSR-FF среды. Как правило, раскол соотношение между 1:3 и 1:05 уместна, но пассажи в 1:02 обеспечивает более высокую плотность клеток, необходимых при адаптации в фидерных свободной культуры. </li><li> До покрытия iPSCs на Geltrex покрытием блюда, аспирации остаточного решение Geltrex из предварительно покрытых блюдо, и постепенно добавить соответствующее количество суспензии клеток в каждой культуре блюдо. Обратите внимание: не полоскать блюд до обшивки. </li><li> Перемещение культуры блюдо вперед и назад и из стороны в сторону несколько раз, чтобы разогнать клетки по всей поверхности блюда. Аккуратно культуры блюдо в 37 ° C инкубаторе с влажной атмосфере от 4 до 6% СО 2 в воздухе. Замените провел среде с KSR-FF с каждым днем. </li></ol> Пассирования клеток человека плюрипотентных использованием KSR-FF <ol start="13"><li> Соблюдайте человека iPSCs растет в полной KSR-FF под микроскопом, чтобы подтвердить, что клетки 70-80% сливной и готова к пересеву. См. Рисунок 1. Примечание: Если колонии становятся слишком плотная или слишком большим, увеличилась дифференциация происходит. </li><li> Вырежьте и удалите все дифференцированные IPSC колонии до пассажей культуры. </li><li> Предварительно теплой необходимый объем Dispase в 37 ° С водяной бане. См. Таблицу 1 ниже для деталей относительно объемов требуется. </li><li> Предварительно равновесие необходимый объем KSR-FF в 37 ° С водяной бане for15 мин. См. Таблицу 1 ниже для деталей относительно объемов требуется. </li><li> Аспирируйте провел среды из сосуда для культивирования с помощью пипетки, и промойте клетки дважды с D-PBS. </li><li> Аккуратно добавить подогретого Dispase решение культуры судна (например, 1 мл раствора на Dispase 60-мм культуры блюдо). Swirl культуры судна, чтобы покрыть всю поверхность клетки. </li><li> Инкубируйте культуру судна при температуре 37 ° С в течение 3 минут. </li><li> Удалить сосуд из инкубатора, аспирация Dispase решение, и осторожно мыть клетки с D-PBS. </li><li> Аккуратно очистить клетки с поверхности культуры блюдо, используя сотовый скребок и передачи клеткам стерильные 15 мл центрифужную пробирку. </li><li> Промыть культуры блюдо дважды с KSR-FF, мягко &quot;распыления от&quot; любой клетки, которые не отделены. Бассейн промыть среды с клетками в 15 мл трубки. </li><li> Центрифуга трубке при 200 мкг в течение 5 минут при комнатной температуре до гранул клеток. </li><li> Тщательно аспирата супернатант, не нарушая осадок клеток и отбросить его. </li><li> Аккуратно вылить содержимое трубки, чтобы полностью вытеснить клеточный осадок из трубки вниз. </li><li> Аккуратно ресуспендирования клеток в предварительно уравновешенную KSR-FF использованием 5 мл серологические пипетки. Не растирают. Примечание: очень важно, на шаг, чтобы аккуратно ресуспендируют клетки без применения силы, чтобы избежать повреждений. </li><li> Передача клетки свежих 60-мм Geltrex покрытием блюдо в нужном Коэффициент распределения и двигаться культуры блюдо вперед-назад и из стороны в сторону несколько раз, чтобы разогнать клетки через ее поверхность. </li><li> Место культуры блюдо в 37 ° C инкубаторе с влажной атмосфереОт 4 до 6% СО 2 в воздухе. </li><li> На следующий день, мягко заменить провел среде с KSR-FF, чтобы удалить ячейку мусора. Замените провел среда повседневной после этого. Соблюдайте плюрипотентных клетках ежедневно и прохождение их по мере необходимости (примерно раз в 4-5 дней). Пассирования рекомендуется, когда клетки достигают 70-80% слияния. Для КП криоконсервации клеток и оттаивания, обратитесь к нашему протокол под названием &quot;Cryopreserving и восстановление клеток человека плюрипотентных использованием Полное KnockOut сыворотки питатель-Free Замена Medium&quot;. </li></ol> Ожидаемые результаты <img src="/files/ftp_upload/2236/2236fig1.jpg" alt="Рисунок 1" /> Рисунок 1. Изображение фазового контраста ниже показаны iPSCs выросли на Geltrex покрытием культуры блюда с использованием полного KnockOut сыворотки питатель-Free Замена среды. IPSCs выставку морфологии похож на ЭСК, характеризуется большими ядрами и скудной цитоплазмой. (40-кратном увеличении) <table border="1"><tbody><tr><td> Компонент </td><td> 35 блюд </td><td> Блюдо 60 мм </td><td> Блюдо 100 мм </td></tr><tr valign="top"><td> Полное KnockOut SR среда </td><td> 2 мл </td><td> 4 мл </td><td> 10 мл </td></tr><tr valign="top"><td> Решение Geltrex </td><td> 1 мл </td><td> 1,5 мл </td><td> 4-5 мл </td></tr><tr valign="top"><td> Dispase </td><td> 0,5 мл </td><td> 1 мл </td><td> 3-4 мл </td></tr><tr valign="top"><td> D-PBS для полоскания </td><td> 2 мл </td><td> 4 мл </td><td> 10 мл </td></tr></tbody></table> Таблица 1. Рекомендуемые объемы <a href="http://www.jove.com/files/ftp_upload/2236/2236appendix.pdf">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть приложение</a> .

<ol>
	<li>Takahashi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+pluripotent+stem+cells+from+mouse+embryonic+and+adult+fibroblast+cultures+by+defined+factors.">Induction of pluripotent stem cells from mouse embryonic and adult fibroblast cultures by defined factors.</a> Cell. 126, 663-676 (2006).</li><li>Takahashi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+pluripotent+stem+cells+from+adult+human+fibroblasts+by+defined+factors.">Induction of pluripotent stem cells from adult human fibroblasts by defined factors.</a> Cell. 131, 861-872 (2007).</li><li>Yu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induced+pluripotent+stem+cell+lines+derived+from+human+somatic+cells.">Induced pluripotent stem cell lines derived from human somatic cells.</a> Science. 318, 1917-1920 (2007).</li><li>Maherali, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+and+techniques+for+the+generation+of+induced+pluripotent+stem+cells.">Guidelines and techniques for the generation of induced pluripotent stem cells.</a> Cell Stem Cell. 3, 595-605 (2008).</li><li>Li, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+rat+and+human+induced+pluripotent+stem+cells+by+combining+genetic+reprogramming+and+chemical+inhibitors.">Generation of rat and human induced pluripotent stem cells by combining genetic reprogramming and chemical inhibitors.</a> Cell Stem Cell. 4, 16-19 (2009).</li><li>Liao, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+induced+pluripotent+stem+cell+lines+from+adult+rat+cells.">Generation of induced pluripotent stem cell lines from adult rat cells.</a> Cell Stem Cell. 4, 11-15 (2009).</li><li>Dimos, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induced+pluripotent+stem+cells+generated+from+patients+with+ALS+can+be+differentiated+into+motor+neurons.">Induced pluripotent stem cells generated from patients with ALS can be differentiated into motor neurons.</a> Science. 321, 1218-1221 (2008).</li><li>Aasen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+and+rapid+generation+of+induced+pluripotent+stem+cells+from+human+keratinocytes.">Efficient and rapid generation of induced pluripotent stem cells from human keratinocytes.</a> Nat Biotechnli. 26, 1276-1284 (2008).</li><li>Park, I. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+human-induced+pluripotent+stem+cells.">Generation of human-induced pluripotent stem cells.</a> Nat Protoc. 3, 1180-1186 (2008).</li></ol>

Авторы этой статьи являются сотрудниками Life Technologies, которая производит реактивы и инструменты, используемые в этой статье.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Knockout DMEM/F12</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cat. no. 12660-012</td>
<td>Note: see appendix for the use of alternative DMEM products</td>
</tr>
<tr>
<td>GlutaMAX-I</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cat. No. 35050-061</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>KnockOut Serum Replacement</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>KnockOut SR, Cat. no. 10828-028</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>KnockOut Serum Replacement Growth Factor Cocktail</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>KnockOut SR-GFC, Cat. no. A10580-01</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>FGF-basic, human recombinant protein, 10 &mu;g</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>bFGF, Cat. no. PHG0024</td>
<td>Note: see appendix for alternative bFGF pack sizes.</td>
</tr>
<tr>
<td>2-Mercaptoethanol</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cat. no. 21985-023</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dispase</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cat. no. 17105-041</td>
<td>Note: see appendix for alternative passaging methods.</td>
</tr>
<tr>
<td>Geltrex hESC-Qualified Reduced Growth Factor Basement Matrix, 1 mL</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cat. no. A10480-01</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dulbecco&#x2019;s Phosphate Buffered Saline (D-PBS) without calcium and magnesium </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cat. no. 14190-144</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sterile Tissue Culture Hood</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Incubator set at 37&deg;C</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pipette-Aid</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Water Bath set at 37&deg;C</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sterile serological pipettes (5 mL, 10 mL)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Centrifuge</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>15 mL centrifuge tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>60mm Tissue Culture treated dishes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

feeder-free adaptation, culture and passaging of human ips cells using complete knockout serum replacement feeder-free medium

Открытие в 2006 году, что человеческие и мышиных фибробластов может быть перепрограммирован для получения плюрипотентных клетках 1-3 с качествами, удивительно похожи на эмбриональные стволовые клетки создал новую ценную источником плюрипотентных клеток для открытия новых лекарств, клеточная терапия, и фундаментальных исследований. GIBCO СМИ и реагенты были на переднем крае плюрипотентных исследований стволовых клеток в течение многих лет. Нокаут DMEM дополнен Нокаут сыворотки Замена средств по выбору для эмбрионального роста стволовых клеток, а теперь плюрипотентных клеточных культур 3-9. Это золотой стандарт системы средств массовой информации теперь может быть использован для подачи без культуры с добавлением Knockout SR Коктейль фактор роста. Традиционные человека плюрипотентных ES и методов клеточной культуры требует использования мыши или человека слоев фибробластов подачи или подачи с кондиционером среды. Эти культуры методы трудоемки, трудно масштабировать и трудно поддерживать бедра клетки недифференцированной из-за неопределенных условиях. Invitrogen разработала Нокаут SR фактор роста коктейль, чтобы позволить Вам легко перенести ваши бедра культур ячейки подачи без сохраняя при этом ваше использование Нокаут SR.

Watch this Scientific Journal Video about Feeder-Free Adaptation, Culture and Passaging of Human IPS Cells using Complete KnockOut Serum Replacement Feeder-Free Medium at JoVE.com

Feeder-Free Adaptation, Culture and Passaging of Human IPS Cells using Complete KnockOut Serum Replacement Feeder-Free Medium

Следующий протокол предусматривает обучение для адаптации человека индуцированных плюрипотентных стволовых (IPS) Клетки для фидерных без культуры с помощью полного KnockOut сыворотки питатель-Free Замена среды (КСР-FF). Как только адаптированные, инструкции для постоянного обслуживания также обеспечены.

Питатель-Free адаптации, культуры и пассажи клеток человека IPS использованием Полное KnockOut сыворотки питатель-Free Замена среднего

The discovery in 2006 that human and mouse fibroblasts could be reprogrammed to generate iPS cells 1-3 with qualities remarkably similar to embryonic stem ...

Research

JoVE Journal

Biology

Passaging HuES Human Embryonic Stem Cell-lines with Trypsin.

Пассирования оттенков эмбриональных стволовых клеток человека линий с Трипсин

In this video we demonstrate how our lab routinely passages HuES human embryonic stem cell lines with trypsin.  Human embryonic stem cells are artifacts ...

Human ES cells: Starting Culture from Frozen Cells

ЭС клетки человека: начиная культуры из замороженных клеток

Here we demonstrate how our lab begins a HuES human embryonic stem cell line culture from a frozen stock.  First, a one to two day old ten cm plate of  ...

Predicting the Effectiveness of Population Replacement Strategy Using Mathematical Modeling

Прогнозирование эффективности населения Стратегия Замена использованием математического моделирования

Charles Taylor and John Marshall explain the utility of mathematical modeling for evaluating the effectiveness of population replacement strategy.  ...

Passaging Human Neural Stem Cells

Пассирования правам нервные стволовые клетки

The ability to manipulate human neural stem/precursor cells (hNSPCs) in vitro provides a means to investigate their utility as cell transplants for ...

Culture and Maintenance of Human Embryonic Stem Cells  

Культура и поддержание человеческих эмбриональных стволовых клеток

Human embryonic stem (hES) cells must be monitored and cared for in order to maintain healthy, undifferentiated cultures. At minimum, the cultures must be ...

Cryopreserving and Recovering of Human iPS Cells using Complete KnockOut Serum Replacement Feeder-Free Medium

Cryopreserving и восстановление клеток человека плюрипотентных использованием Полное KnockOut сыворотки питатель-Free Замена среднего

Generation of Human Cardiomyocytes: A Differentiation Protocol from Feeder-free Human Induced Pluripotent Stem Cells

Поколению прав кардиомиоцитов: Дифференциация Протокол от Ф-свободной человеческой индуцированных плюрипотентных стволовых клеток

In order to investigate the events driving heart development and to determine the molecular mechanisms leading to myocardial diseases in humans, it is ...

Isolation of Small Noncoding RNAs from Human Serum

Выделение малых некодирующих РНК из сыворотки крови человека

The analysis of RNA and its expression is a common feature in many laboratories. Of significance is the emergence of small RNAs like microRNAs, which are ...

MicroRNA Expression Profiles of Human iPS Cells, Retinal Pigment Epithelium Derived From iPS, and Fetal Retinal Pigment Epithelium

Профили микроРНК выражение человеческой плюрипотентных клеток, пигментного эпителия сетчатки, полученных из IPS, и плода пигментного эпителия сетчатки

The objective of this report is to describe the protocols for comparing the microRNA (miRNA) profiles of human induced-pluripotent stem (iPS) cells, ...

Preparation of Rat Serum Suitable for Mammalian Whole Embryo Culture

Подготовка сыворотки крыс Подходит для млекопитающих всей эмбрионов культуры

Mammalian whole embryo culture (WEC) is a widely used technique for examining pharmacological toxicity in developing mouse and rat embryos and for ...