Name: preparation of neuronal cultures from midgastrula stage drosophila embryos
Uploaded: 2007-07-04T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos at JoVE.com

وأيد هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة لمنح NS27501 DKOD. مزيد من الدعم لهذا العمل من المنح أستاذ HHMI إلى DKOD.

أولا جمع الأجنة ذبابة الفاكهة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد لوحات جمع البيض <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يغلي 200 مل درهم 2 O مع آغار ز 8 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تبرد إلى 50 درجة مئوية </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة ...

<ol>
	<li>Rohrbough, J., O'Dowd, D. K., Baines, R. A., Broadie, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+bases+of+behavioral+plasticity:+Establishing+and+modifying+synaptic+circuits+in+the+Drosophila+Genetic+System.">Cellular bases of behavioral plasticity: Establishing and modifying synaptic circuits in the Drosophila Genetic System.</a> J. Neurobiol. 54, 254-271 (2003).</li><li>O'Dowd, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Voltage-gated+currents+and+firing+properties+of+embryonic+Drosophila+neurons+grown+in+a+chemically+defined+medium.">Voltage-gated currents and firing properties of embryonic Drosophila neurons grown in a chemically defined medium.</a> J. Neurobiol. 27, 113-126 (1995).</li><li>Lee, D., O'Dowd, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fast+excitatory+synaptic+transmission+mediated+by+nAChR+in+cultured+Drosophila+neurons.">Fast excitatory synaptic transmission mediated by nAChR in cultured Drosophila neurons.</a> J. Neurosci. 19, 5311-5321 (1999).</li><li>Lee, D., O'Dowd, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cyclic-AMP-dependent+plasticity+at+excitatory+cholinergic+synapses+in+Drosophila+neurons:+Alterations+in+the+memory+mutant+dunce.">Cyclic-AMP-dependent plasticity at excitatory cholinergic synapses in Drosophila neurons: Alterations in the memory mutant dunce.</a> J. Neurosci. 20, 2104-2111 (2000).</li><li>Hodges, D. D., Lee, D., Boswell, K., Preston, C. F., Hall, L. M., O'Dowd, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=tipE+regulates+sodium-dependent+repetitive+firing+in+Drosophila+neurons.">tipE regulates sodium-dependent repetitive firing in Drosophila neurons.</a> Mol. Cell Neurosci. 19, 402-416 (2002).</li><li>Lee, D., Su, H., Dowd, O., K, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GABA+receptors+containing+Rdl+subunits+mediate+fast+inhibitory+synaptic+transmission+in+Drosophila+neurons.">GABA receptors containing Rdl subunits mediate fast inhibitory synaptic transmission in Drosophila neurons.</a> J. Neurosci. 23, 4625-4634 (2003).</li></ol>

في الثقافات ذبابة الفاكهة المحضرة من الأجنة مرحلة midgastrula الخلايا العصبية تنشأ من neuroblast السلائف ، وكثير منها الفجوة قبل التمايز في المختبر. هذا النظام يوفر بالتالي فرصة فريدة لاستكشاف عوامل وراثية وبيئية مهمة في مراحل مبكرة جدا من تطور الخلايا العصبية (Rohrbaugh وآخرون ، 2003). لقد أظه?...

يجب المحافظة على الثقافات المحرز في هذا الإعلام في حاضنة CO2 بحوالي 5 ٪ 22-24 درجة مئوية. نستخدم معيار الثقافة أنسجة الثدييات حاضنة وضعت في غرفة باردة وساخنة إلى 23 درجة مئوية. دائما استخدام الماء المصفى تعقيمها واجري في الحاويات التي هي محفوظة لوسائل الإعلام والمكملات فقط. لم يضع مقياس درجة الحموضة أو تحريك شريط تستخدم لأغراض أخرى في وسائل الإعلام.

preparation of neuronal cultures from midgastrula stage drosophila embryos

هذا الفيديو يوضح الإجراء لصنع الثقافات العصبية الأولية من أجنة ذبابة الفاكهة midgastrula المرحلة. وأظهرت وسائل لجمع الأجنة وdechorionation وذلك باستخدام مواد التبييض. باستخدام الماصة الزجاج تعلق على الفم أنبوب الشفط ، نحن لتوضيح وإزالة جميع الخلايا من الأجنة واحد. ويتضح من طريقة لتفريق الخلايا من كل embyro إلى انخفاض عدد (5 لتر) متوسطة صغيرة من الزجاج على ساترة غير المصقول. وجهة نظر من خلال المجهر في 1 ساعة بعد الطلاء يوضح كثافة الخلية المفضل. معظم الخلايا التي تزرع في البقاء على قيد الحياة عندما يتم تعريف المتوسطة neuroblasts التي تقسم مرة أو أكثر في الثقافة قبل توسيع العمليات لالتهاب الأعصاب من قبل 12-24 ساعة. وجهة نظر من خلال المجهر يوضح مستوى ثمرة neurite والمتفرعة من المتوقع في ظل ثقافة صحية في 2 أيام في المختبر. تزرع الثقافات في بيكربونات البسيط القائم المتوسطة محددة ، في حاضنة CO 2 5 ٪ إلى 22-24 درجة مئوية. عمليات التهاب الأعصاب مواصلة تطويرها على مدى الأسبوع الأول في الثقافة وعندما اجراء اتصالات مع neurites من الخلايا المجاورة التي غالبا ما تشكل اتصالات متشابك وظيفية. الخلايا العصبية في التعبير عن هذه الثقافات الجهد بوابات الصوديوم والكالسيوم والبوتاسيوم ، وقنوات ومنفعل كهربائيا. ثقافة هذا النظام مفيد لدراسة العوامل الوراثية الجزيئية والبيئية التي تنظم تمايز الخلايا العصبية ، استثارة ، وتشكيل المشبك / وظيفة.

Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos at JoVE.com

Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos

هذا الفيديو يوضح إعداد الثقافات العصبية الأولية من أجنة ذبابة الفاكهة midgastrula المرحلة. آراء الثقافات الحية تظهر الخلايا 1 بعد ساعة من الطلاء ، والخلايا العصبية متباينة بعد 2 أيام من النمو في وسط بيكربونات المستندة إلى المعرفة. والخلايا العصبية كهربائيا منفعل وشكل اتصالات متشابك.

التحضير للثقافات متعلق بالخلايا العصبية من أجنة ذبابة الفاكهة المرحلة Midgastrula

This video illustrates the procedure for making primary neuronal cultures from midgastrula stage Drosophila embryos. The methods for collecting embryos ...

Research

JoVE Journal

Biology

Primary Neuronal Cultures from the Brains of Late Stage Drosophila Pupae

متعلق بالخلايا العصبية الثقافات الأساسي من الأمخاخ في وقت متأخر من المرحلة ذبابة الفاكهة شرانق

In this video, we demonstrate the preparation of primary neuronal cultures from the brains of late stage Drosophila pupae. The procedure begins with the ...

Placing Growth Factor-Coated Beads on Early Stage Chicken Embryos

وضع عامل النمو المغلفه الخرز على أجنة الدجاج المرحلة المبكرة

The neural tube expresses many proteins in specific spatiotemporal patterns during development.   These proteins have been shown to be critical for cell ...

In Ovo Electroporations of HH Stage 10 Chicken Embryos

Electroporations OVO في مرحلة الجنين سمو الدجاج 10

Large size and external development of the chicken embryo have long made it a valuable tool in the study of developmental biology.  With the advent of ...

Neuronal Cell Cultures from Aplysia for High-Resolution Imaging of Growth Cones

الخلية العصبية من الثقافات Aplysia عن التصوير عالية الدقة من المخاريط النمو

Neuronal growth cones are the highly motile structures at the tip of axons that can detect guidance cues in the environment and transduce this information ...

The Preparation of Drosophila Embryos for Live-Imaging Using the Hanging Drop Protocol

The Preparation of Drosophila Embryos for Live-Imaging Using the Hanging Drop Protocol

لإعداد ذبابة الفاكهة الأجنة لايف التصوير باستخدام بروتوكول إسقاط الشنق

Green fluorescent protein (GFP)-based timelapse live-imaging is a powerful technique for studying the genetic regulation of dynamic processes such as ...

Preparation of Aplysia Sensory-motor Neuronal Cell Cultures

Preparation of Aplysia Sensory-motor Neuronal Cell Cultures

إعداد Aplysia الحسية والحركية الثقافات الخلية متعلق بالخلايا العصبية

The nervous system of the marine mollusk Aplysia californica is relatively simple, consisting of approximately 20,000 neurons.  The neurons are large (up ...

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

إعداد الأجنة المجهري للإلكترون من ذبابة الفاكهة أنبوب القلب الجنينية

The morphogenesis of the Drosophila  embryonic heart tube has emerged as a valuable model system for studying cell migration, cell-cell adhesion and cell ...

In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos

In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos

داخل الجسم الحي الطرد المركزي الجنين ذبابة الفاكهة

A major strategy for purifying and isolating different types of intracellular organelles is to separate them from each other based on differences in ...

Upright Imaging of Drosophila Embryos

Upright Imaging of Drosophila Embryos

تستقيم تصوير ذبابة الفاكهة الأجنة

Several well-known morphogenetic gradients and cellular movements occur along the dorsal/ventral axis of the Drosophila embryo. However, the current ...

Primary Cell Cultures from Drosophila Gastrula Embryos

Primary Cell Cultures from Drosophila Gastrula Embryos

الخلية الأولية من الثقافات ذبابة الفاكهة الأجنة المعيدة

Here we describe a method for preparing and culturing primary cells dissociated from Drosophila gastrula embryos.   In brief, a large amount of staged ...